島津LC10AD型高效液相色譜儀操作規程

1．目的

規范島津LC-10AD型高效液相色譜儀的使用。

2．范圍

適用于島津LC-10AD型高效液相色譜儀的使用。

3．職責

質檢員對本規程的實施負責。

4．規程

4.1 系統組成

本系統由1個LC-10ADvp溶劑輸送泵、FCV-10AL低壓梯度混合器、在線脫氣機、Rheodyne 7725i手動進樣閥、SPD-10Avp紫外-可見檢測器、N2000色譜數據工作站和電腦等組成，另外還包括打印機、不間斷電源等輔助設備。

4.2 準備

4.2.1 準備所需的流動相，用合適的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20min。

4.2.2 根據待檢樣品的需要更換合適的洗脫柱（注意方向）和定量環。

4.2.3 配制樣品和標準溶液（也可在平衡系統時配制），用合適的0.45μm濾膜過濾。

4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數據線和輸液管道是否連接正常。

4.3 開機

接通電源，依次打開FCV-10AL低壓梯度混合器、脫氣機、LC-10ADVP輸液泵、AT-130柱溫箱，SPD-10Avp紫外檢測器，待檢測器自檢結束顯示測量狀態時，打開打印機、電腦顯示器、主機，最后打開色譜工作站。

4.4 參數設定

4.4.1 波長設定：在檢測器顯示初始屏幕時，按[func]鍵，用數字鍵輸入所需波長值，按[Enter]鍵確認。按[CE]鍵退出到初始屏幕。

4.4.2 流速設定：在輸送泵顯示初始屏幕時，按[func]鍵，用數字鍵輸入所需的流速（柱在線時流速一般不超過1ml/min），按[Enter]鍵確認。按[CE]鍵退出。

4.4.3 流動相比例設定：在輸送泵顯示初始屏幕時，按[conc]鍵，用數字鍵輸入流動相B的濃度百分數，用數字鍵輸入流動相C的濃度百分數，用數字鍵輸入流動相D的濃度百分數，按[Enter]鍵確認。按[CE]鍵退出。

4.5 更換流動相并排氣泡

4.5.1將管路的吸濾器放入裝有準備好的流動相的儲液瓶中；

4.5.2 逆時針轉動泵的排液閥180°，打開排液閥；

4.5.3 按輸送泵的[purge]鍵，pump指示燈亮，泵大約以5.0ml/min的流速沖洗，3min后停止；

4.5.4 將排液閥順時針旋轉到底，關閉排液閥。

4.5.5 如管路中仍有氣泡，則重復以上操作直至氣泡排盡。

4.5.6 如按以上方法不能排盡氣泡，從柱入口處拆下連接管，放入廢液瓶中，設流速為5ml/min，按[pump]鍵，沖洗3min后再按[pump]鍵停泵，重新接上柱并將流速重設為規定值。

4.6 平衡系統

4.6.1 按《N2000色譜數據工作站操作規程》打開“在線色譜工作站”軟件，輸入實驗信息并設定各項方法參數后，按下“數據收集”頁的[查看基線] 按鈕。

4.6.2洗脫方式

4.6.2.1 按泵的[pump]鍵， pump指示燈亮。用檢驗方法規定的流動相沖洗系統，一般最少需6倍柱體積的流動相。

4.6.2.2 檢查各管路連接處是否漏液，如漏液應予以排除。

4.6.2.3 觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動應不超過1MPa。如超過則可初步判斷為柱前管路仍有氣泡，按4.5.6操作。

4.6.2.4 觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移<0.01mV/min，噪聲為<0.001mV時，可認為系統已達到平衡狀態，可以進樣。

4.7 進樣

4.7.1 進樣前按檢測器[zero]鍵調零，按軟件中 [零點校正] 按鈕校正基線零點，再按一下 [查看基線] 按鈕使其彈起。

4.7.2 用試樣溶液清洗注射器，并排除氣泡后抽取適量。