擴增技術搭配NK細胞療法，以色列公司1期臨床結果積極

　　NK細胞，又稱自然殺傷細胞(Natural Killer Cells)，是白細胞的一種，在免疫系統的抗癌斗爭中發揮著重要作用。基于T細胞的癌癥免疫療法已經在血液腫瘤領域大放異彩。然而，由于制備功能細胞等問題，NK細胞在臨床環境中的適用性受到了限制。

　　總部位于以色列的Gamida Cell公司正在開發一種基于煙酰胺(NAM)的細胞擴增技術，應用于產生高功能性NK細胞。先前研究表明，與正常NK細胞相比，NAM-NK細胞增殖更快，壽命更長，尤其擅長產生炎癥分子，并將其他免疫細胞招募到腫瘤中。此外，當與靶向抗體組合時，NAM-NK顯示出增強的抗體依賴性細胞毒性(ADCC)。

　　近日，2019年美國移植和細胞治療(TCT)會議上，該公司報告了人類白細胞抗原(HLA)-半相合(haploidentical)或HLA-不匹配(mismatched)相關供體NAM-NK細胞療法，針對復發/難治性非霍奇金淋巴瘤(NHL)和多發性骨髓瘤(MM)患者的首次人體試驗的初步臨床數據。

　　正在進行的1期研究數據顯示，前14名患者中，3名NHL患者觀察到完全反應，1名MM患者觀察到完全反應，并且NAM-NK通常耐受良好。初步數據支持持續的臨床開發。

　　獨特的擴增技術，助力NK療法

　　基于煙酰胺(NAM)細胞擴增平臺的作用機制：

　　？NAM在細胞的代謝重編程中起關鍵作用；

　　？NAM是NAD(煙酰胺腺嘌呤二核苷酸)相關信號通路的主要調節因子；

　　？直接參與控制氧化還原敏感酶、線粒體功能、細胞代謝、能量產生、細胞運動；

　　？NAM在擴大培養期間保留細胞功能和表型。

　　1期臨床數據積極

　　『背景』

　　NK細胞的過繼轉移受限于NK細胞的短期持續性及其在輸注后受損的效應功能。先前已經表明，用NAM離體擴增NK細胞促使對多種腫瘤細胞系的有效細胞毒性，以及體內穩健的歸巢，增殖和駐留。以下報告NAM-NK在復發/難治性NHL和MM患者中的首次人體試驗。

　　『方法』

　　在供體單采血液成分術后，將CD3耗盡的單核細胞在NAM(5mM)和IL-15(20ng/ml)存在下培養2周。受試者首先接受一輪環磷酰胺和氟達拉濱化療，以消耗其免疫細胞，包括患病的免疫細胞。

　　然后他們接受遞增劑量的NAM-NK細胞(第0天和第2天)和低劑量白細胞介素-2以促進NK細胞的擴增。將利妥昔單抗(rituximab)或埃羅妥珠單抗(elotuzumab)分別給予患有NHL或MM的患者，以促進腫瘤靶向和抗體依賴性細胞毒性。

　　『結果』

　　所有14名患者：包括6例NHL患者和8例MM患者，均可評估安全性，其中12名可評估治療活性(所有6名NHL患者和8名MM患者中的6名)。大多數患者經過大量預處理并患有晚期疾病。

　　在6名NHL患者中，3名患者(濾泡性淋巴瘤2名患者，彌漫性淋巴瘤1名患者)獲得完全反應，1名患者獲得部分反應，2名患者疾病進展。獲得完全反應的2名患者隨后接受了骨髓移植。在可評估的6名MM患者中，1名患者獲得完全反應，2名患者疾病穩定，3名患者疾病進展。在評估的所有三個劑量水平觀察到活性。

　　NAM-NK通常耐受良好，沒有移植物抗宿主病(GvHD)，沒有腫瘤溶解綜合征，也沒有觀察到神經毒性綜合征。觀察到3級(n = 3)和4級(n = 1)血液學不良事件。非血液學不良事件多為1級和2級。有1例3級細胞因子釋放綜合征，1例因敗血癥死亡。

　　『結論』

　　NAM-NK細胞已被安全地給藥，耐受性良好，增殖并在體內持續存在。在患有晚期疾病的患者中觀察到有希望的臨床活動早期證據。

　　基于正在進行臨床試驗的積極結果，2月19日，Gamida Cell與領先的基因組編輯公司Editas Medicine達成協議，評估在NAM-NK細胞中使用CRISPR基因組編輯技術。通過該協議，兩家公司旨在發現可用于改善血液系統惡性腫瘤和實體瘤治療的優化NAM-NK細胞。

　　NK細胞治療，令人興奮的前景

　　NK細胞是人體先天免疫系統的一部分。它們是淋巴細胞，來自與T細胞和B細胞共享的祖細胞。NK細胞能對身體內遇到的各種病原體迅速作出反應，是身體正常的癌癥對抗儲備，因此得名(自然殺傷細胞)。

　　這種殺傷能力是由于癌細胞分裂錯誤或DNA復制導致突變表達，使得機體確定需要破壞它們時產生的。在突變表達影響其他細胞或自身增殖之前，NK細胞識別并摧毀之。

　　NK細胞還可以招募其他細胞，例如巨噬細胞和樹突狀細胞，以增強免疫反應并吞噬殘留的細胞物質。

　　近年來，研究人員正在使用NK細胞用于抗腫瘤治療，這是令人興奮的，原因有幾個。

　　首先，因為NK細胞已經在尋找具有致突變性的特定細胞表達，所以它們不需要像CAR-T細胞那樣為每種單獨的癌性抗原提供相同類型的抗原呈遞引發劑。這意味著這些NK細胞可用于多種不同的癌癥和多種不同的患者，并且具有可能相似的結果。

　　其次，這種治療的毒性對于長期損害或后期效應的潛在影響較小，因為它們動員已經存在于體內的先天免疫系統。

　　NK細胞另一個非常有趣的特性是它們不會引起移植物抗宿主病(GvHD)。數百名甚至數千名患者，已經接受同種異體NK細胞或與患者不匹配的NK細胞治療，并且很少被報道GvHD。僅有一項研究表明，在移植過程中，在不存在免疫抑制的情況下，將NK細胞注入患者體內，與GvHD相關。

　　致力于這一免疫療法新方向的研究組織有不同的產生NK細胞的方法，一種是使用患者自己的NK細胞，而另一種方法是使用別人的NK細胞。而使用患者自己的NK細胞存在兩個問題：

　　腫瘤細胞有免疫逃逸機制，患者自己的NK細胞常常因為被干擾而存在功能異常

　　常規的化療可能造成健康NK細胞采集數量不足

　　因此，臨床試驗常使用異體NK細胞，來源包括：健康志愿者捐獻、臍帶血、多能誘導干細胞(ipsC)。相對于志愿者捐獻，以標準化的“現成(off the shelf)”方式制備的干細胞來源NK細胞更加易于獲得，同時患者等待治療時間較短。

　　MD安德森癌癥中心的研究人員正在研究CAR-NK細胞療法，但使用臍帶血并分離出NK細胞。他們插入了識別CD19的CAR，目前正在進行2017年開始的臨床試驗(NCT03056339)。受試者患有復發性疾病，并且正在關注B淋巴惡性腫瘤、非霍奇金淋巴瘤以及急性和慢性淋巴細胞白血病。

　　Fate Therapeutics正在利用人類誘導多能干細胞(iPSCs)來產生NK細胞產品。通過采集皮膚細胞或血細胞，并提供誘導信號，可以恢復它們的多能干細胞狀態，這意味著研究人員可以簡單地通過使用適當的信號分子得到任何需要的細胞，然后誘導它們成為NK細胞，并且所有這些都是在實驗室環境中進行的。這種“現成的”治療方法，有望避免患者個性化治療方法帶來的限制。2018年11月，該公司宣布FDA已經批準ipsC衍生的同種異體NK細胞療法(FT500)的IND申請。

　　2018年6月，在Cell Stem Cell期刊上發表的一項新研究中，加利福尼亞大學圣地亞哥醫學院(UCSD)和明尼蘇達大學的研究人員報告說：ipsC來源的CAR-NK細胞表現出與CAR-T細胞相似的活性，但毒性較低。數據顯示卵巢癌是一個很好的第一目標，但包括乳腺癌、腦腫瘤和結腸癌等在內的實體瘤，以及白血病等血液腫瘤也可能是潛在的治療對象。