梅毒實驗室檢測技術評價

梅毒是一種經輸血或使用血制品以及性傳播的傳染病，因此梅毒抗體檢測是獻血員必不可少的檢測項目。梅毒的病原體是梅毒螺旋體(treponema pallidum，TP)，其含有表面抗原，能刺激機體產生兩類抗體，一類為螺旋體的特異性抗體；另一類為螺旋體的非特異性抗體。根據梅毒螺旋體的生物學及免疫學特性，目前國內實驗室常用的梅毒螺旋體檢測方法，根據所用抗原不同主要分為特異性和非特異性兩大類。

1、梅毒螺旋體抗原血清試驗用活的或死的梅毒螺旋體或其成分來作抗原測定抗螺旋體抗體

這種試驗敏感性和特異性均高，一般用作確認試驗。這種試驗是檢測血清中抗梅毒螺旋體IgG或IgM抗體，該抗體即使患者經過足夠治療，仍能長期存在，甚至終身不消失，血清反應持續存在陽性。適用于血站獻血員的篩查。

1.1 熒光密螺旋體抗體吸收試驗(fluorescent treponemal anti-body-absorption test，FTA-ABS)是以Reiter 株抗原吸收待檢血清，保證了試驗結果的特異性；以整條梅毒螺旋體檢測血清中抗體，提高了試驗的敏感性。文獻報道FTA—ABS對各期梅毒檢測的特異性達到92％，它的主要缺點是需熒光顯微鏡設備，當標本熒光微弱病情可疑時，試驗結果判定常帶有主觀色彩。另外，還有報道其提取物為活菌，存在一定危險性．故其應用受到很大限制。美國常用此試驗作為梅毒的確認試驗。

1.2 梅毒螺旋體血球凝集試驗(treponema pallidum hemagglu-tination assay，TPHA)是用生物細胞(火雞或羊紅細胞)做抗原載體，吸附從兔睪丸中提取的粗制梅毒螺旋體粉碎物抗原，檢測血清中特異性梅毒螺旋體抗體．是目前國內許多醫院常用的梅毒血清確認試驗。試劑制備過程排除了各種非特異性反應．因此TPHA的敏感性和特異性較高。缺點是試劑成本較高，操作較麻煩，不利于獻血員大量標本的篩查。且易發生自凝現象和生物學假陽性。另外，其測定過程中包括多次吸液過程，易造成操作者差錯，結果又依賴于操作者肉眼判斷和解釋，而且結果不易于保存，尤其不利于實驗室作為資料保存。

1.3 梅毒螺旋體明膠凝集試驗(treponema pallidum particle agglutination，TPPA)TPPA作為梅毒抗體檢測的確證方法，有著很高的敏感度和特異性，操作較簡便。結果清晰易判斷，但價格昂貴且結果判斷難以自動化。

1.4 梅毒螺旋體免疫印跡試驗(western immunoblotting tech-nique)是80年代發展起來的一種檢測技術，它結合了免疫學和分子生物學的特點，敏感性高，特異性強。有報道認為免疫印跡法用于梅毒診斷優于FTA—ABS和TPHA方法，對早期潛伏梅毒、神經梅毒的陽性率均為100％，對于非螺旋體標本(包括正常標本、生物學假陽性標本以及γ球蛋白增高或抗核抗體的標本)檢測沒有假陽性或可疑反應。免疫印跡法操作簡便，不要求試驗儀器和環境，結果容易判定，但成本較高。

1.5 梅毒螺旋體酶聯免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay，TP-ELISA)TP-ELISA方法檢測梅毒螺旋體最早出現于1975年，是用雙抗原夾心法測定梅毒特異性抗體。TP-ELISA方法主要檢測梅毒螺旋體IgG和IgM抗體，文獻報道TP-ELISA方法的敏感性高于FTA-ABS方法用，對I 期梅毒的診斷靈敏度為93.8％．診斷特異性為100％。TP-ELISA方法檢測操作簡便，不受樣本中纖維蛋白和溶血等影響。一次可進行多份樣本的檢測，用酶標儀分析，客觀準確，結果便于保留及標準化管理，可用作篩查和確認試驗。因此，TP-ELISA方法被公認為梅毒血清學診斷實驗的首選方法。

1.6 膠體金免疫技術(TPAb)是在酶免結合基礎上發展起來的．利用免疫膠體金技術和免疫層析原理。通過硝酸纖維素上包被特異性梅毒基閃重組抗原，以檢測標本中特異性的梅毒抗體。眾所周知，近年來梅毒的發病率逐年上升，為防止流動采血車的血源浪費．我們需要一種更為快速、便捷、特異、敏感的方法來滿足實際工作的需求，而梅毒螺旋體特異性抗體膠體金法(TPAb)則具有簡單、快速、不需任何儀器的特點，其敏感性，特異性，準確性都較高。因此，可推薦應用于流動采血車。

2、螺旋體抗原血清試驗用心磷脂作抗原。測定血清中抗心磷脂抗體．此類試驗為非特異性抗體檢測試驗

2.1 快速血漿反應素環狀卡片試驗(RPR)是80年代問世的非特異性梅毒血清學試驗，所用抗原為標準的牛心肌脂抗原，該方法操作簡便、迅速，適用于大量標本檢測，目前許多血站用RPR試驗對獻血者進行梅毒普查。缺點是當感染者接受治療或疾病處于非活動期時，抗體水平會迅速下降或消失，容易出現假陰性反應，即前帶現象(prozone phenomenon)，從而造成漏檢；還易出現生物學假陽性反應。對潛伏期梅毒、神經梅毒不敏感。

2.2 甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗(TRUST) TRUST所用的抗原是從牛心提取的心磷脂和從雞蛋黃提取的卵磷脂及膽周醇，試驗結果清晰易讀，簡便快速，穩定性好，TRUST法比RPR效價測定高一個滴度。缺點是許多因素影響結果，如高脂血癥和抗心磷脂抗體陽性的血清均可干擾而出現假陽性結果柳。

3、基因診斷技術檢測梅毒螺旋體(TP—PCR)

TP-PCR檢測梅毒螺旋體DNA，特異性很強，敏感性很高，是目前診斷梅毒螺旋體的先進方法。PCR檢測梅毒螺旋體的DNA，其敏感性、特異性均優于血清學方法。由于臨床標本可能含有大量人細胞和微生物，建立對梅毒螺旋體高度特異的PCR方法是很重要的。但不利于血站大批量的標本檢測。

總之，對于梅毒檢測選擇一種敏感性和特異性均高的檢測方法非常重要。以上幾種檢測方法各有優缺點。實驗人員可根據各自的需求選擇實驗方法。研究人員仍在繼續尋找更為敏感、準確、全面的檢測方法。