植物細胞分裂素的保綠與阻止衰老的作用實驗

實驗方法原理：在植物中廣泛存在細胞分裂素。它能促進細胞分裂，抑制核酸酶，蛋白酶等一些水解酶的活性，使大分子物質少受破壞。用細胞分裂素處理正在衰老的葉片，能阻止葉綠素的破壞，延長葉片壽命。

把植物的離體葉片放在適宜濃度的細胞分裂素溶液中，置于25－30℃黑暗條件下，葉片中葉綠素的分解比對照慢，證明分裂素具有保綠作用。

實驗材料：小麥幼苗

試劑、試劑盒：

激動素溶液

丙酮 

儀器、耗材：

培養皿                                                                  

量筒                                                                                                                                 

藥物天平                                                              

小漏斗                                                                  

小剪刀                                                              

容量瓶                                                                 

研缽                                                                  

濾紙                                                                  

721分光光度計

實驗步驟：

一、材料與設備

小麥幼苗

直徑8cm 培養皿，10  ml 量筒，100  ml 量筒，藥物天平，小漏斗，小剪刀，25  ml 容量瓶，研缽，濾紙，721分光光度計

藥品

100pp M 激動素溶液：10毫克激動素用少量0.1N HCl溶解，用蒸餾水定容至100  ml 。

丙酮，0.1NHCl，80%g丙酮。

二、實驗步驟

1．在7個培養皿中分別加入蒸餾水和0.05pp M ，0.5pp M ，5pp M ，50pp M 的激動素溶液各10  ml 。每一處理重復3次。

2．選生長一致的小麥幼苗，剪下第一完全葉，切去尖端1.5cm ，取其后3cm 長的切斷。向每一培養皿放進此切斷0.500-1.000克。然后將培養皿放在散射光下培養1－2周。

3．從培養皿中取出小麥葉片，用濾紙吸干水分，放入研缽中。再向研缽中放入少量石英砂，少量碳酸鈣以及4－5  ml 80%丙酮，仔細研磨成漿，過濾到100  ml 容量瓶中，研缽用80%丙酮4－5  ml 洗兩次，洗出液過濾。濾渣和濾紙再放入研缽中，研磨，過濾。如此反復，直到濾出液無綠色。濾液用80%丙酮定容至100  ml 。

4．將721分光光度計靈敏度轉在3的位置，以80%丙酮為空白對照，在663n M 和645n M 處比色。

三、結果

葉綠素濃度按下式計算：

〔ch1〕=20.2×D645+8.02×D663

〔ch1〕=葉綠素濃度，單位 M g/升。

D645：葉綠素溶液在645n M 處的消光值。

D663：葉綠素溶液在663n M 處的消光值。