氣相色譜法測定午餐肉中的有機氯農藥

　　一、目的與要求：

　　1、掌握有機氯農藥殘留量的測定方法

　　2、初步掌握國產103型氣相色譜儀的使用方法。

　　二、原理：

　　氣相色譜法是一種比較新型的物理分離的分析方法，其作用原理是當樣品組分經氣化呈氣態的載氣的攜帶下，通過填滿固定相的色譜柱時，由于樣品組分在氣-液(或氣-固)兩相中的分配(或吸附)系數的不同而得到分離。在柱后接上檢測器，顯示色譜峰，與有機氯農藥標準溶液比較即可定性和定量地測得樣品的組成成分。

　　三、試劑與儀器：

　　1、試劑

　　(1)丙酮重蒸

　　(2)石油醚60-90℃經全玻璃系統蒸餾器重蒸至色譜圖無異常.

　　(3)無水硫酸鈉(AB)，550℃灼燒4小時。

　　(4)內標溶液，以環氧七氯為內標：稱環氧七氯0.0100克以上，用少許丙酮溶解，用石油醚定容至100毫升。

　　(5)農藥的標準溶液：

　　λ分另Jj稱取2-666，β-666，γ-666，δ-666，PP`-DDE，0P，-DDT，PP`-DDD，PP-DDT標準樣品

　　各0.01克用少量丙酮溶解后，以石油醚定容100毫升，(100ug/ml)稱A液。

　　B、精密吸取2-666，γ-666，A溶液5毫升，δ-666A溶液10毫升，

　　β-666，PP`-DDE，0P-DDT，PP`-DDD，PP-DDTA溶液各25毫升，置于1000毫升容量瓶中，用石油醚定容為B液，δ-666，γ-666，B液濃度為(0.5ug/ml)，6-666B液濃度為(1ug/ml)，β-666，PP`-DDE，0P`-DDT，PP-DDD`，PP-DDT`濃度為(2.5ug/ml)，

　　c、配制幾種不同濃度應用的標準C液。

　　分別取8種B液各16毫升，14毫升，12毫升，10毫升，8毫升置5個100毫升容量瓶內，分別加100微升環氧七氯后用石油醚定容到100毫升為C液。

　　2、儀器

　　103型氣相比色譜儀，電子捕獲檢定器。

　　色譜柱長1.2米，內徑3毫米螺旋形不銹鋼柱固定液用OV-173%及QF15%混合液。

　　柱體Chromosorbw 80-100目

　　柱溫190℃，載氣高純N2

　　檢測溫度210℃，載氣流40ml/分

　　汽化溫度210℃。

　　四、高脂樣品的提取：

　　(1)消化：

　　稱取均樣10克于200毫升園底瓶中，加入35毫升高氯酸冰醋酸(1：1)混酸于90℃水浴上加熱(加熱時要不停地振搖以免結成炭粒)，直到樣品完全溶解為止，溶液呈紫紅色液體，冷卻，加水35毫升(水：酸=1：1)，如溶液發熱仍需冷卻。

　　(2)抽提：

　　用(bp60-90℃)石油醚，以40，30，30毫升萃取3次，合并萃取液，通過無水硫酸鈉柱子，抽提液全量為100。

　　(3)凈化：

　　將l00毫升石油醚抽提倒入250毫升分液漏半中，加10毫升濃硫酸(酸：石油醚=1：l0)，輕輕振搖，靜置分層(放置過夜)，然后放掉下層酸液，重復1-2次，加2%硫酸鈉40，30，30毫升洗至中性，加入無水硫酸鈉5克，定容至l00毫升，并加入內標環氧七氯lOml，進入氣相色譜儀進行測定。

　　(4)測定

　　a、將配制的各種濃度標準c液進入色譜儀得到各種濃度的標準色譜圖山峰順序為α-666，β-666，γ-666，δ-666，環氧七氯PP`-DDE，0P-DDT，PP`-DDD，PPl-DDT，并量其峰高值。

　　b、取凈化液適量(一般在0.2UL-lOul之間，使其響應值在檢測器線性范圍內)注入氣相置譜儀內，并選取與樣品峰高相近的標準農藥峰高代入下式。

　　計算：

　　農藥殘留含量PPm。

　　按下式用內標校正。

　　殘留量：

　　PPM=(H/H2) × (C/W) X (HO/HO`) X (WO/CO`)

　　H/H`：樣品中該組分的峰高和標準液中該組分峰高。

　　HO/HO：標樣中內標的峰高和試樣中內標的峰高。 ·

　　C/W：注入到色譜儀中的標準液所含該組分的濃度(ug/m1)和樣品的重量。

　　WO/CO,：樣品W中所加人的內標重量(ug)和標準液中所含的內標濃度(ug/ml)。