氣相色譜儀具有效率高、選擇性高、靈敏度高、分析速度快等特點,但僅適用于低蒸氣壓、低沸點樣品的分析,有機物中只有20%的樣品適用于氣相色譜儀的分析。高效液相色譜儀彌補了氣相色譜儀的不足,適用于80%有機物的分析。高效液相色譜儀與氣相色譜儀的區別如下:
一、分離機理:
1.高效液相色譜儀(HPLC)是基于吸附、分配、篩選、離子交換和親和的原理。有多種固定相可供選擇。
2.氣相色譜儀是根據吸附分配原理進行分離的。有多種固定相可供選擇。
二、進樣方式:
1.高效液相色譜儀的樣品應制成溶液。
2.氣相色譜儀樣品需要加熱、氣化或裂解。
三、流動相:
1、高效液相色譜儀:
(1)液體流動相可以是離子型、極性、弱極性和非極性溶液。它能與分析樣品相互作用,提高分離的選擇性。
(2)液相動態粘度高,流動相輸送壓力高。
2、氣相色譜儀:
(1)氣體流動相為惰性氣體,不與分析樣品相互作用。
(2)氣流相動力粘度小,流動相輸送壓力低。
四、色譜柱:
1.固定相尺寸5-10um,填充柱直徑3-6m,柱長10-25cm,柱效103-104理論塔板/m,毛細管柱內徑0.01-0.03mm,柱長5-10m,柱效104-105理論塔板/m,柱溫為室溫。
2.氣相色譜儀中固定相的粒徑為0.1-0.5 m;填充柱的內徑為1-4 mm,柱長為1-4 m,柱效率為102-104理論塔板/m;毛細管柱的內徑為0.1-0.3 mm,柱長為10-100 m,柱效率為103-104理論塔板。ys/m,“497”為常溫-300℃。
五、檢測器:
1、高效液相色譜儀:
(1)通用型檢測器:ELSD和RID。
(2)選擇性檢測器:UVD、PDAD、FD、ECD。
2、氣相色譜儀:
(1)通用檢測器:TCD和FID。
(2)選擇性檢測器:ECD、FPD、NPD。
六、柱外效應:
1.高效液相色譜儀的溶質在液相中的擴散系數很小,色譜柱以外的死空間應盡量小,以減少柱外效應對分離效果的影響。
2.氣相色譜儀的溶質擴散系數較大,柱外效應影響較小。盡可能減小柱外效應對分離效果的影響。
七、應用:
1.高效液相色譜儀可以分析低沸點和低分子量有機化合物、高沸點和高分子量有機化合物、無機離子化合物、熱不穩定化合物和生物活性物質。
2.氣相色譜儀可以分析低沸點、低分子量有機物和永久性氣體,高沸點有機物可以用程序升溫分析,高聚物可以用熱解技術分析。
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