火箭電泳試驗

火箭電泳試驗

火箭電泳實際是一種定量免疫電泳。其原理為：在電場作用下，抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動，二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線，而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系，因此本法可以測定樣品中抗原的含量。

材料：

1．診斷血清（抗體）：抗人IgG或IgA免疫血清

2．待檢血清（抗原）：人血清

3．參考血清

4．pH8.6，離子強度0.05M巴比妥緩沖液配制（見對流免疫電泳試驗）

5．其它：瓊脂粉，微量進樣器，打孔器，玻璃板，電泳儀

方法：

1．抗體瓊脂板的制備

同單向擴散法，但注意稀釋液應用pH8.6離子強度0.05M的巴比妥緩沖液。

2．打孔見下圖

3．將用緩沖液稀釋的適宜濃度的參考血清及適當稀釋的抗原（人血清）分別加入各孔中，每孔10或20微升，要求加量準確而不外溢。

4．把加完樣的免疫瓊脂板放入電泳槽中進行電泳，電壓4—6伏/厘米，電泳時間1—5小時，直到大部分抗原孔前端出現頂端尖窄而完全閉合的火箭狀沉淀線，關閉電源。

5．取下瓊脂板，以抗原孔中心為起點，量出各火箭狀沉淀線的高度。同單向瓊脂擴散法繪制標準曲線，查出待檢血清中Ig含量。