研究揭示補體調控腫瘤相關B細胞的雙向作用

　　B細胞是腫瘤微環境的重要組成部分。既往多項重要研究發現，B細胞具有促進腫瘤發生發展的作用。但近期，越來越多的證據表明B細胞在抗腫瘤免疫的產生中有著至關重要的作用。有臨床研究發現針對B細胞的利妥昔單抗在實體瘤患者中沒有顯著療效；另外，有大型隊列研究結果顯示B細胞浸潤和免疫治療的效果呈正相關。這一系列的研究提示，腫瘤相關B細胞很可能存在表型和功能的異質性。

　　近日，中山大學蘇士成團隊揭示了化療后三級淋巴樣結構中一群ICOSL+ B細胞對抗腫瘤免疫產生起到關鍵作用。該成果于近日發表于《細胞》雜志上。

　　研究人員首先分別收集了乳腺癌患者接受新輔助化療前后的腫瘤組織標本，從中分離出B細胞進行單細胞測序，分析結果顯示，在化療前占很大比例的表達IL-10的B細胞，在化療后顯著減少，取而代之的是一群以ICOSL+ CR2high IL-10 -CD20+ CD38+ CD27+ IgA -IgD-為特征的B細胞。以上結果提示治療效果好的患者化療后的腫瘤浸潤B細胞發生了表型轉換。

　　研究人員進一步對數百例患者新輔助化療前后的腫瘤組織切片進行了分析。采用全視野數字化切片掃描系統和自動化分析軟件，研究人員發現在新輔助化療后的腫瘤組織中，ICOSL+B細胞的數目與患者的化療療效、長期生存時間正相關。在對B細胞定位分析中研究人員還發現，這群ICOSL+B細胞傾向于定位在化療后腫瘤局部形成的三級淋巴樣結構中，并且與T細胞直接接觸。由此可見，ICOSL+B細胞是化療后抗腫瘤免疫過程的重要參與者，可以作為判斷化療誘導的抗腫瘤免疫反應、患者療效及預后的重要指標。

　　為了探索這群B細胞的功能和產生機制，研究人員利用cas9技術，通過重組酶系統（Cre-loxP）分別建立了特異性敲除B細胞表達ICOSL和CR2的條件基因敲除小鼠。借助條件基因敲除小鼠及體外細胞共培養模型，研究人員發現腫瘤細胞在化療藥處理后，細胞膜上的磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine， PS）出現外翻，導致補體C3活化進而通過補體受體CR2激活B細胞，使得B細胞表達ICOSL。ICOSL+B細胞通過ICOSL-ICOS共刺激T細胞，激活T細胞的腫瘤殺傷功能，從而促進抗腫瘤免疫。

　　研究人員還發現，并非所有的乳腺癌細胞系都能夠在體外共培養體系中誘導ICOSL+B細胞產生。應用細胞系在線數據庫，研究人員對腫瘤表達的各類補體調節蛋白進行篩選，最后發現這一現象與細胞系表達CD55的高低相關。CD55是一種表達在細胞膜上的補體調節蛋白，能夠抑制補體C3系統的活化。在乳腺癌患者中，腫瘤組織CD55的表達量與ICOSL+B細胞的數目呈負相關，靶向CD55能促進化療后ICOSL+B細胞和抗腫瘤免疫的產生。

　　綜上所述，該研究發現化療后乳腺癌中出現了一個新的B細胞亞群，它們通過ICOSL激活T細胞相關的抗腫瘤免疫；該群細胞的產生機制是化療后腫瘤細胞免疫原性死亡引發的補體信號活化；補體調節蛋白CD55在腫瘤中的表達，決定了化療后B細胞在不同腫瘤中相反的作用。