糖的測定方法——蒽銅的比色法

　　1.原理：糖與硫酸反應脫水生成羥甲基呋喃甲醛，生產物再與蒽銅縮合成蘭色化合物，其顏色深淺與溶液中糖的濃

　　度成正比，可比色定量。

　　2.試劑

　　（1） 硫酸鋅溶液：溶解500g化學純硫酸鋅于500ml水中

　　（2） 亞鐵氰化鉀溶液：溶解10.6g化學純亞鐵氰化鉀于100ml水中

　　（3） 0.2％蒽銅試劑：溶解蒽銅0.2g于100ml95％硫酸中，置棕色瓶中冷暗處保存

　　（4） 0.1％葡萄糖液：準確稱干燥葡萄糖0.1000g 定容100ml

　　3.操作方法

　　（1） 標準曲線繪制

　　（2） 100ml容量瓶編號

　　沸水浴加熱6分鐘，取出冷卻→用1cm比色杯→610nm測定吸光度→作出以吸光度為橫坐標，糖液濃度為縱坐標的準

　　曲線

　　（3）樣品測定

　　稱10g樣品→于100ml熱水加入500ml容量瓶中－加硫酸鋅5ml→沸水浴5分鐘→取出再搖動下加亞鐵氰化鉀5ml，→冷卻→定容500ml→過濾→吸濾液25ml→于250ml容量瓶→定容250ml→取稀釋液1ml，于比色管中→加10ml蒽銅試劑→搖勻→水浴加熱6分鐘→冷卻→比色

　　試驗注意

　　1，樣液必須清澈透明，加熱后不應有蛋白質沉淀

　　2，樣品顏色較深時，可用活性炭脫色后再進行測定

　　3，此法與所用的硫酸濃度和加熱時間有關

　　4，所取糖液濃度在1-2.5mg/100ml之間