維生素C可以導致便潛血結果的假陰性,怎樣消除維生素C對結果的影響?
北京積水潭醫院檢驗科吳俊主任:便潛血實驗一般推薦雙法檢測,即化學法+免疫法,化學法原理為過氧化物染色來判斷陽性,容易受還原性物質(如維生素C)的影響,化學法檢測抗原量寬,不受“前帶效應”影響;免疫法為血紅蛋白單抗的層析法,受還原物質的影響較小,但受抗原量影響,有“前帶效應”。所以,對于使用維生素C的患者,應該使用免疫法以消除影響。
北京協和醫院檢驗科張時民主任:糞便潛血目前主要有兩種檢測方法,化學法和免疫學方法。以化學法為檢測原理的包括鄰連甲苯胺法、愈創木樹脂法、無色孔雀綠法等,其缺點是特異性不好,敏感度不高,但價格低廉,還可根據顏色反應判斷陽性程度。這種實驗方法最好要求患者實驗前三天素食,以及避免因食用動物血或肉類食物,包括某些蔬菜的影響,這可能指某些蔬菜中含有過多葉綠素的干擾,而并不是維生素C干擾的問題,一般吃水果也不會影響太大。而一般保健性服用或治療劑量的口服維生素C的量,也不會對便潛血有顯著影響。如果你用的是尿試紙中的潛血模塊,在低濃度維生素C含量的標本中,影響并不顯著,如果是大劑量或靜脈輸注維生素C可能受到影響,導致假陰性問題發生,建議換一種方法復查。第二種方法是單克隆抗體膠體金便潛血實驗,該方法敏感度高,特異性好,一般不受食物影響以及藥物因素影響,也不會受到維生素C干擾,現在許多醫院多以該方法作為糞便潛血試驗的首選方法,他也可以作為化學法可疑標本的有效驗證方法。他的缺點是當有上消化道出血或大量出血時,比如柏油便,會因“后帶現象”導致假陰性問題發生。
廣州南方醫院檢驗科鄭磊主任:糞便隱血試驗主要有化學法和免疫學方法兩種。化學法常用的有鄰甲聯苯胺法、愈創木酯法等,其檢測原理是血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過氧化物酶的活性,催化氧化底物鄰甲聯苯胺脫氫為顯藍色的鄰甲偶氮苯。化學法雖使用方便并可半定量,但試劑不穩定、特異性較低且干擾因素較多,如服用大量維生素C或其他具有還原作用的藥物可致結果呈假陰性。免疫學方法采用單克隆抗體免疫膠體金法,其靈敏度高,且對人隱血具有高度特異性,不受食物因素影響,不受動物血紅蛋白影響,也不受維生素C影響,但應警惕柏油樣便等大量出血造成的后帶現象引起的假陰性結果。為盡量消除維生素C對大便隱血試驗的結果影響,建議:1. 做好隱血試驗的全程質量控制:如用化學法,患者在試驗前3天停止服用維生素C等藥物及大量含有過氧化物酶的食物;檢測中嚴格按試劑盒說明書規范操作,避免試劑失效,做陰性和陽性質控對照試驗;與臨床保持溝通,分析檢驗報告是否與臨床相符。2. 與免疫學方法聯合檢測。
需要注意的是,不論哪種方法檢測,都只能作為篩選或輔助診斷,必須與臨床密切結合。
南通市第一人民醫院檢驗科臨檢室曹興建主任:用免疫法和化學法同時檢測來排除維生素C對結果的影響。
(1)化學法:FOBT的化學方法較多,如鄰聯甲苯胺法、鄰甲苯胺法、還原酚酞法、聯苯胺法、無色孔雀綠法等。其原理是利用血紅蛋白中的含鐵血紅素有類似過氧化物酶的作用,將供氫體(色原)中的氫轉移給H2O2生成水(H2O),供氫體脫氫(氧化)后形成發色基團而呈色。呈色的深淺可反映血紅蛋白(出血量)的多少。特異性及抗干擾性能較差,假陽性率較高。因為其檢測的是過氧化物酶的活性,實食物因素對檢測結果影響大,原因主要與非人類Hb、飲食中的假過氧化物酶以及再水合作用有關;其假陰性的主要原因與血紅蛋白降解、維生素C作用和試劑貯存有關。
(2)免疫法:包括免疫單向擴散法、對流免疫電泳、酶聯免疫吸附試驗、膠體金免疫層析試驗等。它是用膠體金顆粒標志抗原或抗體,進行抗體或抗原的檢測。糞便隱血膠體金法測定是利用雙抗體夾心法,采用抗人血紅蛋白單克隆抗體制成,抗體能特異地結合人血紅蛋白,其靈敏度、特異性高,檢測結果不會因維生素C等抗氧化劑及鐵劑、動物血等干擾,假陽性率低,能夠較真實反應消化道出血與否。
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