一、色譜儀塔板理論的假設:
1、在色譜柱的一小段長度 H 內,組分可以在兩相之間迅速達到平衡,這一小段柱長稱為理論塔板高度 H。
2、流動相進入色譜柱不是連續進行的,而是脈動式,每次進量為一個塔板體積。
3、所有組分開始時都存在于第 0 號塔板上,而且樣品沿軸向(縱向)的擴散可以忽略。
4、所有塔板上的分配系數都相同,與組分在某一塔板上的量無關。
二、描述柱效的指標:
H = L/n
式中:H 為理論塔板高度,L 為柱長,n 為理論塔板數。
n =16(tR/W)2
式中:tR 為組分的保留時間,W 為組分的色譜峰寬。
從以上兩式可以看出,W 越小,n 越大,H 越小,柱效越高,因此,n 和 H 是描述柱效的指標。
由于 tM 包括在tR中,而實際的 tM 不參與色譜柱內分配,所計算的 n 值盡管很大,H 很小,但與實際柱效相差甚遠,所以提出把 tM 扣除,采用有效理論塔板數和有效理論塔板高度評價柱效。
三、塔板理論的特點和不足:
塔板理論用熱力學觀點形象地描述了溶質在色譜柱中的分配平衡和分離過程,導出了流出曲線的數學模型,成功地解釋了流出曲線的形狀和濃度極大值的位置,提出了計算和評價柱效的參數。但某些基本假設并不完全符合色譜柱內實際發生的分離過程。
1、當色譜柱長一定時,塔板數越大,被測組分在色譜柱內被分配的次數越多,柱效越高,所得色譜峰越窄。
2、不同物質在同一色譜柱上的分配系數不同,用有效理論塔板數和有效理論塔板高度作為衡量柱效的指標時,應指明被測物質。
3、柱效的高低不能表示被分離組分的實際分離效果。當兩組分的分配系數相同時,無論該色譜柱的塔板數多大都無法分離。
4、塔板理論無法解釋同一色譜柱在不同的流動相流速下柱效不同的實驗結果,無法指出影響柱效的因素和提高柱效的途徑。
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