芯片等電聚焦分離蛋白質的原理與常規毛細管等電聚焦基本相同,都是依據蛋白質的等電點(pI)不同而進行分離。Hofmann等首次將毛細管等應用于蛋白質分析。
Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等電聚焦模式分離廠牛血清白蛋白和增強型綠色熒光蛋白(EGFP)。Das等。26 3采用高聚物芯片,在等電聚焦電泳模式下優化了,分離長度及電壓條件,最終在長1.9 cm的通道內于1.5 min內分離了綠熒光蛋白和R藻紅蛋白,分離電壓為500 V。Cui等在PDMS芯片上采用等電聚焦分離模式成功分離了組綠熒光蛋白、異藻青蛋白和藻紅蛋白。該作者還報道,通過改變樣品和分離介質中添加劑甲基纖維素的濃度,可以改變完成蛋白質分離所需要的通道距離,Tsai等通過采用六甲基二硅氧烷等離子聚合膜修飾玻璃芯片通道的方法抑制蛋白質吸附,在等電聚焦的分離模式下分離了藻青蛋白(pI:4·65)、血紅蛋白(pI: 7.0)和細胞色素C(pI:9·6)3種蛋白質混合物,分離在3 min內完成,分離效率為19 600塔板/m。Huang等在進行芯片等電聚焦分離蛋白質時,采用在兩性電解質溶液中加入羥甲基纖維素作為添加劑的方法來抑制蛋白質的吸附。
毛細管等電聚焦電泳(以下簡稱:CIEF)是一種簡便、快速、高效的分離分析方法,特別適用于氨基酸、多肽、蛋白質、酶類和抗體等的分離分析,能夠滿足組分定量、雜質檢出、質量控制、臨床診斷等方面的要求。CIE......
芯片等電聚焦分離蛋白質的原理與常規毛細管等電聚焦基本相同,都是依據蛋白質的等電點(pI)不同而進行分離。Hofmann等首次將毛細管等應用于蛋白質分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采......
【導語】用液相色譜法分離分析多肽或一些小蛋白的方法已經很成熟,但若要分析較大的蛋白質分子,科學和工業界都會選擇電泳技術,比如在生物制藥行業中做提純后蛋白質的分析表征。不過,不管是凝膠電泳還是傳統的毛細......
摘要:以徐稻3號水稻苗期幼嫩根尖為材料,利用葡聚糖/聚乙二醇兩相分配法純化得到純度達90%的質膜組分,使用優化的雙向電泳水化液溶解質膜蛋白,通過等電聚焦/十二烷基磺酸鈉2聚丙烯酰胺凝膠雙向電泳(IEF......
摘要采用甲基丙烯酸縮水甘油酯、丙稀酰胺為單體,N,N-亞甲基雙丙稀酰胺為交聯劑,十二醇、1,4-丁二醇和DMSO為制孔劑在毛細管中合成含有環氧基的整體柱,通過化學鍵合的方法將兩性電解質(Ampholi......
摘要:目的通過對半夏及其近緣植物的蛋白質電泳圖譜比較,研究半夏藥材的電泳鑒別方法。方法應用等電聚焦(isoelectrofocusing,IEF)技術,對不同產地半夏及其近緣植物塊莖進行比較。結果半夏......
方法:平板等電聚焦 原理:蛋白質分子在含有載體兩性電介質形成的連續而穩定的線性pH梯度中進行電泳。但不自是按照等電點不同被分離。 儀器:Bio-RadModel111MiniIEF......