花粉管的生長及其向化性實驗

實驗方法原理：成熟的花粉落到柱頭上就會萌發，長出花粉管，人為地給以適當條件（溫度、pH、介質滲透壓）也能使花粉萌發。花粉萌發和花粉管的生長需要一定的營養（包括有機物質和無機物質）。各個花粉粒之間有密切的相互關系，當花粉密度大時，萌發較快，生長也較好，這就是所謂"集體效應"；同時，雌蕊組織能影響花粉管的生長方向，即所謂花粉管的向化性，這對受精過程有重要意義。

實驗步驟：

一、材料和設備

1. 植物材料：龍頭花（Antirrhinu M   M ajus）。早晨采摘帶剛開放花的花序，插入盛有水的容器中。

2. 設備：顯微鏡；恒溫箱；毛筆；鑷子；刀片；煤氣燈；玻璃小杯；蓋玻片；載玻片；4cm 培養皿；9cm 培養皿；8  ml 燒杯；50  ml 燒杯；吸量管；滴管。

3. 試劑：4%瓊脂；40%蔗糖溶液；0.04%H3BO4溶液；4%酵母提取物溶液

二、實驗步驟

1. 花粉的培養

（1）在直徑5 M  M ，高5 M  M 玻璃小杯口上涂上凡士林或羊毛脂，使固定于一干燥的載玻片上，環內放2滴水。共做4個這樣的裝置。

（2）于8  ml 的小2燒杯中配制培養基1（見表7－1），用滴管將1滴培養基滴于一干凈的載玻片上，冷卻后，用毛筆將少許龍頭花的花粉撒于培養基上，然后將蓋玻片帶有花粉的一面反蓋在上面的小環內。

（3）于另一個8  ml 的燒杯中配制培養基2，其操作同步驟2。

（4）于另一個8  ml 的燒杯中配缺點培養基4，其操作同。

（5）用50  ml 燒杯配制培養基3，取1滴于蓋玻片上，操作同上。

（6）把剩余的培養基3分別倒于二個4cm 培養皿中。將其中一個培養皿放入盛有冷水的9cm 培養皿中（水不可溢入小培養皿中），使其底部培養基先冷卻，凝固，上層培養基仍處于溶膠狀態。將已準備好的龍頭花柱頭及其他雌蕊組織小心地埋于溶膠中，待溶膠冷卻后撒上少許花粉。在另一培養皿中不均勻地撒上洗少許龍頭花的花粉。

將以上（2，3，4，5，6）花粉培養物置25℃恒溫箱中。

2. 營養條件的觀察：10 M in后，將各小環中培養物取出，顯微鏡下觀察比較花粉萌發情況。

3. 集體效應的觀察：1h后，取花粉不均勻分布的培養皿，比較花粉密處和稀處的花粉萌發情況。

4. 向化性的觀察：1h后，取出埋有雌蕊組織的培養皿，觀察雌蕊組織周圍花粉管生長情況。

三、結果

1．選擇不同營養條件下有代表性的花粉萌發視野觀察結果并繪圖，比較萌發情況。

2．分別選取培養皿中花粉密處和稀處各3個視野計算花粉萌發的百分率。

3．觀察并繪出埋有雌蕊組織的培養皿中龍頭花的花粉管生長向化性圖。