熒光分光光度計結構

熒光分光光度計與紫外分光光度計屬一類產品，結構均由激發光源、單色器、樣品室、光電倍 增管和讀出（記錄）裝置所組成。但是它們光源是不同的，熒光分光光度計多采用高壓汞燈、氙燈和激光光源。同時，熒光測量多采用激發光和發射光成直角的光路，儀器組件的布置有所不同。
    下圖為某型號熒光分光光度計的光學系統圖，其主要工作原理是：當光源光束經入射單色器色散，提取所需波長單色光照射于樣品上，由樣品發出的熒光經發 射單色器色散后照射于光電倍增管，光電倍增管把熒光強度信號轉化成電信號并經放器放大后記錄或讀出信號。

    熒光分光光度計的光學系統圖

    1.氙燈（150W）；2.透鏡；3.光束分裂器；4.水平狹縫；5.激發單色器光柵；6.參考放電管；7.關閘；8.樣品室關閘；10.發射單色器光柵；12.光電倍增管
    (1)激發光源：要比吸收法中光源強度大。
    汞燈：發射強度大、穩定，不需復雜電源，但譜線不連續，數目少，主要用于濾片熒光計。
    碘鎢燈：提供連續光譜300~700mn。
    氙燈：發出射線的強度大，譜線連續，分布于200~700 nm光域內，且在300~400nm 波段內射線強度幾乎相等，但該燈的電源功率要求大，且電源穩定，因此電源結構復雜。
    激光：發光強度大，能極大地提高熒光分析的靈敏度。
    (2)樣品池：通常由石英池（液體樣品用）或固體樣品架（粉末或片狀樣品）組成。測量液體時，光源與檢測器成直角安排；測量固體時，光源與檢測器成銳角安排。低溫熒光測定時在一樣品池外套一個液氮的透明石英真空瓶。
    (3)單色器：熒光分光計通常具有兩個濾光片：第一濾光片在光源與樣品池之間，濾去不需要的光，讓需要的激發光通過。第二濾光片在樣品池與檢測器之間，濾去溶劑散射 光、容器表面散射光、雜質發出的光等，讓待測物質發射的熒光通過。
    熒光分光光度計通常具有兩個光柵，位置同濾光片，單色性好。
    (4)檢測器：因熒光通常較弱，采用光電倍增管作檢測器，靈敏度高。選擇光電倍增管要考慮：響應波長、靈敏度和嗓聲水平。 藍敏管對蛋白質、核酸的測量適用，而紅敏管則適用于熒光染料檢測。
    (5)顯示系統：光度表、計算機操作系統等。
    補充說明：與紫外分光光度計的結構區別：
    1.熒光分光光度計采用的是垂直的測量方式，以消除透射光的影響。
    2.檢測器前面有無單色器，熒光分光光度計有兩個單色器又上圖可以看出，能夠獲得單色性較好的激發光并消除其他雜散光干擾。