蛋白質純化技術—親和色譜法的基本信息介紹

　　許多生物大分子物質具有與其結構相對應的專一分子發生可逆性結合的特征，如酶與底物及輔助因子、酶與抑制劑、抗原與抗體、激素與受體、核酸片段與其互補的核酸序列、生物素與親合素等，分子間的這種結合能力叫作親和力。

　　親和色譜（affinity chromatography）是利用生物大分子間所具有的特異性親和能力進行分離的方法。該方法常把可親和的一對分子中的一方固定在不溶于水的化合物上作為色譜的支持體即載體，使之固相化，作為固定相；另一方隨流動相流經固定相，雙方即可發生特異性結合；用流動相經過一段時間的洗滌，可將雜質去除，而后再利用親和吸附的可逆特性，改用特殊的流動相使所需分離的物質被解離下來，從而得到純化的物質。親和色譜法中的載體種類很多，最常用的是瓊脂糖凝膠（sepharose），其分子上有較多的羥基，活化后可與親和分子相耦聯，另外其理化性質穩定，不會影響色譜的分離過程。

　　親和色譜法可在溫和條件下操作，純化過程簡單、快速、分辨率高，對分離含量極少且性質不穩定的生物活性物質極為有效。但由于不是任何生物大分子之間均有特異的親和力，而針對于某一種親和分子就需要制備專一的親和色譜柱，因此親和色譜的應用具有一定的局限性，主要由于蛋白質尤其是酶、抗原、抗體的分離與純化。