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  • 發布時間:2018-06-25 16:29 原文鏈接: 試論轉基因食品檢測技術研究進展

      【摘 要】隨著科學技術的迅猛發展,轉基因食品大量出現,并且大量涌入市場。轉基因食品到底對人們的健康有沒有影響,至今還沒有一個定論,因此,對轉基因食品的檢測受到了世界各國衛生組織機構的廣泛關注。 
       隨著現代科技的快速發展,以基因工程為代表的現代生物技術也取得了令人注目的成績,特別是與人們生活密切相關的轉基因食品,更是得到受到世界范圍的廣泛關注。自1996年至2005年,全球范圍內轉基因作物的種植面積在10年內,均以2位數速度,逐年遞增。轉基因技術的快速發展,一方面推動了生產力的快速發展;另一方面就轉基因食品的安全問題,也一直存在著爭議。轉基因技術是否會對人體產生不良反應,以及它對生態環境是否會產生負面影響,科學界一直都爭論不休。 
       一、外源蛋白質檢測法 
       (1)蛋白質印跡法。這種檢測法主要是依據抗體抗原的差異性與特異性,并且與檢測多樣化復雜樣品中某種蛋白的方法相結合的一種檢測方法。蛋白質印跡法是將靶蛋白特異性的非標記性抗體與靶蛋白中的抗原決定簇結合,然后再將蛋白質125I-蛋白A的免疫球蛋白抗體檢測已結合上去的抗體。但是蛋白質印跡法并不適用于定量分析,因為考慮到成本問題,以及操作難度問題,也不適用于高通量篩選檢測。(2)ELISA。ELISA檢測是把抗體與抗原的反應特異性與酶對底物的高效催化作用有機的結合在一起,依據酶作用于底物之后所產生的顯色反應來對轉基因成分進行鑒別。這種檢測方法具有方便、快捷、成本低的特點,存在的問題有:一是所導入的蛋白質并不是在植物的所有組織中均有表達;二是復雜基質對檢測結果構成干擾;三是轉基因食品在加工的過程中,部分蛋白質可能會發生降解反應,所以ELISA檢測,僅適用于沒有加工過的原材料。(3)免疫試紙條法。與蛋白質印跡法的主要區別是,免疫試紙條法是以硝化纖維來代替聚苯乙烯反應板為固相載體來進行的。檢測結果在較短的時間內就能夠得出,通常只需要5~10分鐘,主要問題是檢測的靈敏度不高,且一種免疫試紙條僅能為一種目的蛋白質提高檢測,不能對食品具體的轉基因品系加以區分。 
       二、核酸水平檢驗法 
       (1)核酸印記法。具體操作是將被檢測樣品的DNA固定在尼龍膜上,再用帶有標記的核酸探針進行雜交,最后通過對標記探針的信號進行檢驗來確定樣品中是否含有轉基因DNA片段,這種檢驗方法的靈敏度是比較低的。(2)PCR檢測法。這一檢測方法主要是對目標序列進行擴增,再采取特殊方法對擴增產物進行檢驗。常見的PCR檢測法有定性PCR、復合定性PCR、PCR-ELISA、競爭定量PCR。一是定性PCR。這種檢測方法主要是對特異的DNA片段實施PCR擴增,然后將得到的擴增產物用瓊脂糖凝膠電泳進行分離,再運用凝膠成像系統對分離狀況進行觀測,定性PCR的靈敏度非常高。二是復合定性PCR。把兩對及其以上的引物放入PCR檢測系統之中進行擴增。三是PCR-ELISA。將帶有地高辛、生物素標記的引物放入PCR反應系統之中,對目標DNA的序列加以擴增,并且把PCR產生物與固相板上特異性探針相結合,同時放入抗地高辛,使底物產生變色反應,利用酶標儀測出相應的吸光值,再加入標樣,描繪出標準曲線,最后利用這一曲線進行半定量分析。四是競爭定量PCR。濃度未知的待測DNA與已知濃度的內標DNA在同一個反應管內進行PCR擴增,并將產物進行瓊脂糖凝膠電泳分離,再對電泳所產生的分離產物中的待測DNA與內標DNA的產物條帶密度進行相關的線性回歸分析,從而得出兩種DNA的濃度等值點,以此對待測的DNA濃度進行定量分析。 
       三、其他檢測方法 
       隨著國內外對食品安全問題的持續關注,轉基因食品的檢測技術在持續不斷的更新與發展,檢測的水平也不斷提高。這里面的近紅外波譜技術原本是對谷物進行溫度、脂肪含量、淀粉含量以及蛋白質含量進行分析的一種常規辦法,而近幾年來,這一技術主要應用于對轉基因作物的檢測領域,它的優勢在于檢測過程中,不需要對被檢測物進行處理,操作簡便快捷,且能夠實現自動化處理,主要問題是不能夠對食品的混合物進行檢測。食品企業更是為了使產品走出國門,打入國際市場,站在全球戰略的層面上進行考慮,必須加大檢測轉基因食品的投入與研究。除了要在檢測技術上不斷更新,不斷應用之外,還必須逐步健全我國的轉基因食品安全監督運行機制,完善相關的法律制度,才能保證轉基因食品檢測向著高靈敏度、高品質、低成本的方向發展,進入一個良性環境的狀態。 

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