酵母菌基因組DNA的提取實驗

酵母菌

SE緩沖液 山梨醇 EDTA 溶菌酶 PVP 蛋白酶K緩沖液 Tris

高速冷凍離心機 臺式離心機 恒溫水浴 低溫冰箱 冷凍真空干燥器 取液器 電泳儀 水平電泳槽 紫外觀測儀

1.  1.5 ml  對數生長期細菌細胞。

2.  離心，12 000 rpm，1-2 min。

3.  沉淀。

4.  溶于590 ul SE緩沖液中混勻+10 ul 溶菌酶37℃，1 hr。

5.  離心，12 000 rpm，8~10 min。

6.  沉淀。

7.  溶于100 μL，0.5 μl 蛋白酶K，混勻，37℃，1 hr。

8.  加入1.2 ml 的CTAB/NaCL，200 μl 2 0%PVP 混勻  65℃，30 min。

9.  等體積酚/氯仿/異戊醇混合液，混勻。

10.  離心，12 000 rpm，4~5 min。