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  • 發布時間:2019-11-12 08:18 原文鏈接: 酸性磷酸酶的顯示實驗

    • 基本方案

               

    實驗方法原理 Gomori硝酸鉛改良法是根據:以磷酸酯為底物,其被磷酸酶水解后釋放出磷酸基,在pH5左右和鉛鹽結合成磷酸鉛鹽,但磷酸鉛無色,須經硫化銨作用使其變成棕黃色至棕黑色的硫化鉛沉淀。
    實驗材料

    427細胞

    試劑、試劑盒

    丙酮 乙醇 Gomori硝酸鉛作用液 甲基綠 硫化銨

    儀器、耗材

    溫箱 冰箱 顯微鏡 乳頭吸管

    實驗步驟

    1.  將培養的427細胞在冷丙酮或95%乙醇中固定15~30分鐘。


    2.  待片干燥。


    3.  移入已預熱(37℃)的作用液中孵育2小時。


    4.  蒸餾水洗。


    5.  移入2%醋酸酸化1分鐘,蒸餾水快速漂洗。


    6.  移入1%硫化銨1分鐘,自來水漂洗數次。


    7.  必要時用甲基綠復染。


    8.  酸性磷酸酶活性結構呈棕黃色至棕黑色。對照:在處理過程中,在作用液中不加入甘油磷酸鈉而加入蒸餾水,則呈陰性。

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