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  • 發布時間:2019-09-30 16:57 原文鏈接: 靶向EGFR基因siRNA表達載體的構建

    實驗材料

    靶向EGFR基因siRNA

    試劑、試劑盒

    pSilencer2.1-U6載體EcoR IBamH IT4 DNA連接酶鼠抗人anti-EGFRFITC標記兔抗小鼠IgGCy3標記兔抗小鼠IgG甘油多聚甲醛二甲基亞砜

    儀器、耗材

    流式細胞儀熒光顯微鏡二氧化碳細胞培養箱酶標儀培養板蓋玻片載玻片

    利用Lipofeetamine2000將構建的psj-EGFR載體轉入A549細胞中,應用實時定量熒光PCR、免疫熒光和流式細胞儀檢測EGFR基因mRNA和蛋白水平的表達,并采用四甲基偶氮唑藍顯色法(MTT)、集落形成實驗觀察細胞生長變化。

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