高效液相色譜儀的清洗與保養

高效液相色譜儀色譜柱在色譜分析系統中主要起著分離檢測物質的作用，如同色譜系統的心臟，同時也是易損耗品。什么情況下會導致液相色譜柱柱效降低甚至“失效”。

    1、篩板堵塞

    色譜柱入口篩板堵塞是最常見的問題之一，會導致柱壓升高、色譜峰拖尾、塔板數降低等問題。通常分析樣品中微粒雜質最右可能堵塞色譜柱入口，因此分析時，需要先過濾或者離心，乳濁或渾濁樣品應以0.25?m濾膜處理，也可用針頭過濾器過濾。進樣器與泵密封墊的磨損也會帶入微粒，在進樣閥與色譜柱之間使用0.25?m或0.45?m的在線過濾器，通常可以避免這類問題

    2、強保留樣品組分

    強吸附性的樣品組分吸附在柱頭填料上，能嚴重地影響色譜柱壽命。像生物組織或體液的提取物、天然產物等復雜樣品，極易造成柱頭的污染。相對較純的樣品，一般不會出現這一問題。色譜柱應用中，色譜峰嚴重拖尾或分裂往往是強保留污染物在柱頭吸附的體現。

    3、色譜柱裝填不良

    裝填不良的色譜柱，在短時間應用后，填充床的壓縮通常使柱頭處產生塌陷，導致柱效突然降低。色譜柱的初始評價指標，如塔板數、不對稱因子等往往不能很好地表征色譜柱床層的穩定性，這種情緒只能在實際應用中發現。

    4、壓力因素

    液相色譜儀色譜柱使用過程中的驟然壓力波動、機械撞擊或溫度驟然變化都會對色譜柱床層產生影響，導致峰形變差和柱效降低。進樣過程中，進樣閥轉動太慢可引起壓力波動，使色譜柱床產生裂隙，在柱切換時也存在同樣的問題。使用填充良好的色譜柱，在較低柱壓下操作，可大大減少由壓力波動造成的色譜柱損壞。

    有些色譜柱廠家建議在使用液相色譜柱時加入保護柱，保護柱是收集、阻斷來自進樣器的機械和化學雜質，以保護和延長分析柱的使用壽命。

    柱子的再生

    色譜柱屬于色譜分析的常用消耗品，它是有壽命的；但它壽命的長短與我們的樣品處理程度、有無加保護柱以及清洗是否恰當和徹底緊密相關！當柱子在使用一段時間以后，它的柱壓可能升高，柱效可能降低，這時如果我們對柱子進行再生，它的壽命也許會得到一定的延長。

    柱子使用

    1、首先要確認您所要分析的樣品流動相的pH范圍是否在您的柱子的pH范圍之內，以免損壞柱子硅膠！

    2、接下來就是用你做樣品的流動相去平衡柱子，如果您的流動相中含有緩沖鹽溶液，在平衡柱子之前務必要先用5％的甲醇(乙腈)/水去過渡10倍柱體積(150x4.6mm柱子約為30ml，250x4.6mm柱子約為45ml；下同)以上，再用帶鹽的流動相去平衡柱子足夠的時間(直到基線非常平穩為止)，之后方可進樣分析。

    3、無論您分析何種樣品，都會由于各種原因樣品中總有部分雜質，因此建議您在進樣前在柱子前端加接保護柱以保護您那昂貴的分析柱，或者用0.2um或 0.45um針頭過濾器過濾樣品后方進樣分析！