PNAS：利用循環腫瘤細胞提高對肝癌的診斷和監測

　　利用一種高級PCR技術分析循環腫瘤細胞或可大大提高對早期階段癌癥的診斷能力。在這篇發表在國際學術期刊PNAS上的文章中，來自麻省總醫院癌癥中心的研究人員詳細描述了如何將他們開發的CTC-iChip技術與基于RNA的數字PCR技術結合在一起提高對肝細胞癌（HCC）病人血液中循環腫瘤細胞的檢測。

　　“我們開發的方法能夠在組成血液的幾百億個細胞中檢測到單個癌細胞，這種方法能夠為HCC病人提供非常特異性的癌癥檢測。這為HCC的早期檢測以及治療后的監測帶來了新的希望。”文章作者Mark Kalinich這樣說道。

　　目前基于血液檢測HCC的策略，比如血清AFP水平，得到的結果都不理想。能夠確保對循環腫瘤細胞進行分離和分析的新技術是有重要價值的研究工具，可以幫助追蹤治療應答情況，但是利用顯微鏡發現和分析循環腫瘤細胞需要針對特定的癌癥類型開發操作流程，并且一般都需要花費很多時間。標準PCR技術能夠獲得特定核酸片段的許多拷貝，而數字PCR可以對循環腫瘤細胞樣本中給定的核酸片段進行更加精確的定量檢測。

　　研究人員首先在HCC細胞中發現10個特異性表達的RNA轉錄本，這些轉錄本在血液其他成分中并不存在。利用麻省總醫院開發的CTC-iChip，研究人員在6組人群中檢測了他們的血液樣本：

　　新診斷的HCC病人；

　　接受治療仍存在疾病的病人；

　　手術治療后得到治愈的HCC病人；

　　因為其他慢性肝病可能發展為HCC的病人；

　　患其它類型癌癥的病人，包括肝轉移的病人；

　　健康志愿者。

　　分析結果表明HCC病人血液樣本中HCC 相關RNA轉錄本表達水平更高，未接受治療的HCC病人中有超過一半表現為CTC指數陽性結果，而健康對照、患其他肝病和接受治療的HCC病人其陽性結果比例分別為8%，3%和28%，接受治療得到治愈的病人其陽性結果比例與健康對照接近。

　　通過對一小組病人進行跟蹤觀察，研究人員發現CTC指數可以用來監測治療應答情況。為了確定CTC指數是否可以改善AFP篩選結果的不足，研究人員利用這兩種方法對15名新診斷病人的血液樣本進行了分析，結果表明CTC指數，AFP以及兩種方法結合可以對67%的病人進行陽性診斷，只有三分之一的病人沒有被診斷出來。

　　研究人員表示，將基于CTC的數字PCR技術應用于HCC篩選還存在一些障礙，但是他們相信這些困難都可以克服。他們也指出還需要在大規模試驗中進一步研究證實這種方法的檢測效果，增加HCC相關RNA轉錄本的數量以提高診斷準確性。