液相色譜常見問題及處理方法
HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法 1、樣品量不足，解決辦法為增加樣品量 2、樣品未從柱子中流出。可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子 3、樣品與檢測器不匹配。根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器 4、檢測器衰減太多。調整衰減即可。 5、檢測器時間常數太大。解決辦法為降低時間參數 6、檢測器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。 7、檢測池中有氣泡。解決辦法為排氣。 8、流動相流量不合適。調整流速即可。為什么HPLC柱柱壓過高 柱壓過高是HPLC柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問題，您可按下面步驟檢查問題的起因。 1、拆去保護預柱，看柱壓是否還高，否則是保護柱的問題，若柱壓仍高，再檢查（在安裝了保護預柱的情況下）； 2、把色譜柱從儀器上取下，看壓力是否下降，若壓力仍高則是管路堵塞，需清洗，若壓力下降，再檢查； 3、將柱子的進出口反過來接在儀器上，用10倍柱體積的流動......閱讀全文
液相色譜樣品和流動相的處理
樣品和流動相的處理溶解的樣品進樣前用濾膜過濾,以除去不溶物。如果必要,需進行樣品的預處理。流動相中如有不純物質將影響柱效,所以溶劑盡量使用色譜級別的,至少是分析純級別,流動相使用前用微孔薄膜過濾。在流動相的輸液管前安裝過濾器。過濾器定期用甲醇超聲清洗,如果效果不好,可用10%的稀硝酸浸泡清洗。對于堵
高效液相色譜色譜法檢測樣品大概多少體積的流動相
不同的樣品洗脫體積是不同的，以保留時間計算，大概在7min-15min出峰為宜，當然這是對單一樣品來說的，如果目標峰或干擾峰較多，則首先要考慮的是分離度。這樣計算的話（1ml/min的流速），一個樣品大概需要10-20ml的流動相，另外色譜柱的平衡也需要消耗流動相。
液相色譜流動相脫氣
流動相的脫氣HPLC所用流動相必須預先脫氣，否則容易在系統內逸出氣泡，影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率，影響檢測器的靈敏度、基線穩定性，甚至使無法檢測。（噪聲增大，基線不穩，突然跳動）。此外，溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應。溶解氣體還會引起溶劑PH的變化，對分
液相色譜流動相小議
一、液相色譜流動相的性質要求一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。選好填料（固定相）后，強溶劑使溶質在填料表面的吸附減少，相應的容量因子k降低；而較弱的溶劑使溶質在填料表面吸附增加，相應的容量因子k升高。因此，k值是流動相組成的函數。塔板數N一般與流
色譜柱的流動相
1、在進行樣品檢測前，至少使用20倍柱體積流動相使色譜柱充分平衡。流動相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩沖液應當天配制以保持新鮮避免細菌產生。2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應重新過濾避免溶解度變化造成產生新的沉淀。不應使用
色譜流動相如何調整？
色譜流動相如何調整？還在模棱兩可的看過來 開發方法或方法驗證時最重要的一步就是流動相的選擇和比例的調整。我想大家肯定都遇到過分離度不好或峰形不好的情況，大部分原因就是流動相沒調好，那到底該怎么調，怎么選擇呢？看完下文可能你就知道答案了。 秘訣1：由強到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水
流動相為含緩沖鹽流動相，走完樣品應該怎么沖柱子
要看色譜柱C18接的是什么鍵，不同的鍵對水的耐受性不同，有的柱子是不怕純水做流動相的含緩沖鹽肯定先用10%甲醇水沖洗，含有蛋白如果是能耐純水的色譜柱一般是用甲酸或者乙酸調PH大于2的水清洗
液相色譜流動相的特征
流動相要求液相色譜的流動相必須符合下列要求：（1）能溶解樣品，但不能與樣品發生反應。（2）與固定相不互溶，也不發生不可逆反應。（3）粘度要盡可能小，這樣才能有較高的滲透性和柱效。（4）應與所用檢測器相匹配。例如利用紫外檢測器時，溶劑要不吸收紫外光。（5）容易精制、純化、毒性小，不易著火，價格盡量低等
液相色譜流動相的貯存
流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內，不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉，應
液相色譜流動相走空
泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完，否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環，最終產生漏液。
高效液相色譜流動相選擇
流動相選擇1）由強到弱：一般先用90％的乙腈（或甲醇）／水（或緩沖溶液）進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況調整有機溶劑（乙腈或甲醇）的比例。2）三倍規則：每減少10％的有機溶劑（甲醇或乙腈）的量，保留因子約增加３倍，此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中，注意觀察
液相色譜流動相不過濾
因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥，因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾過，可采用Millipore濾膜（0.2μm或0.45μm）等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒（或片）。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
液相色譜流動相的濾過
流動相的濾過所有溶劑使用前都必須經0.45μｍ（或0.22μｍ）濾過，以除去雜質微粒，色譜純試劑也不例外（除非在標簽上標明“已濾過”）。用濾膜過濾時，特別要注意分清有機相（脂溶性）濾膜和水相（水溶性）濾膜。有機相濾膜一般用于過濾有機溶劑，過濾水溶液時流速低或濾不動。水相濾膜只能用于過濾水溶液，嚴禁用
液相色譜流動相的脫氣
HPLC所用流動相必須預先脫氣，否則容易在系統內逸出氣泡，影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率，影響檢測器的靈敏度、基線穩定性，甚至使無法檢測。（噪聲增大，基線不穩，突然跳動）。此外，溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應。溶解氣體還會引起溶劑pH的變化，對分離或分析結果
液相色譜流動相的貯存
流動相的貯存流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內，不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液
液相色譜流動相的特點
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點： （1）流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。 （2）流動相與樣品不產生化學反應 （3）流動相的黏度要盡量小，以便得到好的分離效果；降低柱壓降，延長泵的
高效液相色譜流動相選擇
?????? 流動相的性質要求 ?????? 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。?????? 流動相選擇 ?????? 1：由強到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況
液相色譜流動相的貯存
液相色譜流動相的貯存流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內，不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸
液相色譜流動相的選擇
在化學鍵合相色譜法中，溶劑的洗脫能力直接與它的極性相關。在正相色譜中，溶劑的強度隨極性的增強而增加；在反相色譜中，溶劑的強度婕緣腦鑾慷躒酢?BR>正相色譜的流動相通常采用烷烴加適量極性調整劑。反相色譜的流動相通常以水作基礎溶劑，再加入一定量的能與水互溶的極性調整劑，如甲醇、乙腈、四氫呋喃等。極性
高效液相色譜的樣品和流動相在使用前需要注意什么
高效液相色譜儀的流動相選擇時應注意： 1、盡量使用高純度試劑作流動相，防止微量雜質長期積累而損壞色譜柱和使檢測器噪聲增加。 2、避免流動相與固定相發生作用而使柱效下降或損壞柱子，如使固定液溶解流失、酸性溶劑破壞氧化鋁固定相等。 3、樣品在流動相中應有適宜的溶解度，防止產生沉淀沉積在柱中。 4、流動相
液相色譜流動相注意事項
一、流動相溶劑的選擇1.所選用的流動相溶劑要有一定的化學穩定性，不與固定相和樣品組分起反應，其純度和化學特性必須滿足色譜過程的穩定性和重復性的要求。2.溶劑應當不干擾檢測器的工作，溶劑應與檢測器匹配，選擇不影響檢測器正常工作應選擇在測定波長范圍內無吸收的流動相。3.在制備分離中,溶劑應當易于除去,不
高效液相色譜的流動相要點
流動相溶劑的選擇1）所選用的流動相溶劑要有一定的化學穩定性，不與固定相和樣品組分起反應，其純度和化學特性必須滿足色譜過程的穩定性和重復性的要求。2）溶劑應當不干擾檢測器的工作，溶劑應與檢測器匹配，選擇不影響檢測器正常工作應選擇在測定波長范圍內無吸收的流動相。3）在制備分離中，溶劑應當易于除去，不干擾
液相色譜流動相選擇要點
1）流動相應不改變填料的任何性質。低交聯度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機相會溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質。堿性流動相不能用于硅膠柱系統。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統。2）純度。色譜柱的壽命與大量流動相通過有關，特別是當溶劑所含雜質在柱上積累時。3）必須與檢測
液相色譜的流動相的特點
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點：（1）流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。（2）流動相與樣品不產生化學反應（3）流動相的黏度要盡量小，以便得到好的分離效果；降低柱壓降，延長泵的使用壽命(可運用
高效液相色譜流動相如何脫氣
高效液相色譜儀（HPLC）現已成為有機化學分析的重要手段之一。同樣，在食品分析中，無論是殘留分析還是成分分析，HPLC也已成為不可或缺的分析儀器。和其它分析儀器一樣，你若想讓HPLC很好地為你工作、得到可靠的數據，首先你要保養好它，使它處于一個良好的待機狀態，這樣你操作它進行分析時就可以比較順利地獲
液相色譜的流動相的要求
流動相要求液相色譜的流動相必須符合下列要求：（1）能溶解樣品，但不能與樣品發生反應。（2）與固定相不互溶，也不發生不可逆反應。（3）粘度要盡可能小，這樣才能有較高的滲透性和柱效。（4）應與所用檢測器相匹配。例如利用紫外檢測器時，溶劑要不吸收紫外光。（5）容易精制、純化、毒性小，不易著火，價格盡量低等
液相色譜的流動相怎么制備
照著要求制備呀，一般都給了流動相要求，照著配就行了，配置完要用0.45的膜慮過，再脫氣，方可使用。
液相色譜流動相注意事項
一、 流動相溶劑的選擇1.所選用的流動相溶劑要有一定的化學穩定性，不與固定相和樣品組分起反應，其純度和化學特性必須滿足色譜過程的穩定性和重復性的要求。2.溶劑應當不干擾檢測器的工作，溶劑應與檢測器匹配，選擇不影響檢測器正常工作應選擇在測定波長范圍內無吸收的流動相。3.在制備分離中, 溶劑應當易于除去
液相色譜流動相的pH值
流動相的pH值采用反相色譜法分離弱酸（3≤pKa≤7）或弱堿（7≤pKa≤8）樣品時，通過調節流動相的pH值，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留，并改善峰形的技術稱為反相離子抑制技術。對于弱酸，流動相的pH值越小，組分的k值越大，當pH值遠遠小于弱酸的pKa值時，弱酸主要以分子形式存在；
液相色譜質譜儀流動相的要求
流動相的要求??每次開機前，保證超純水和流動相的新鮮，泵的各個管路不應余留上次殘留的溶劑。??流動相需符合HPLC與LC-MS要求等級，流動相中盡量加易揮發的鹽，盡量不使用表面活性劑之類；??否則容易導致離子抑制，表面活性劑產生的加合物和離子簇會干擾質譜數據。??如果遇到離子抑制，可以把樣品峰往后推