BCEIA2015——液相色譜大盤點
高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。 高效液相色譜方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術。現在幾乎每個醫藥、食品、化工等企業都會配備一到幾臺高效液相色譜,高效液相色譜法也已經成為了分析測試領域的標配了。 BCEIA2015已經過去一周,但是期間精彩紛呈的報告和各廠商展出令人眼花繚亂的儀器去還是讓人久久回味。尤其是液相色譜,液相色譜廠商特點是國內與國外百花齊放,國外的廠商是幾家知名的大廠商,安捷倫、賽默飛......閱讀全文
BCEIA2015——液相色譜大盤點
高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單
液相色譜(HPLC)入門(四)
高效液相色譜分離模式總的來說,化合物的三種主要的性質可以用來產生高效液相色譜分離。它們是:· 極性· 電荷· 分子大小首先,讓我們考慮極性和根據這一特性的兩種主要分離模式:正相和反相色譜。基于極性的分離一個分子的結構、活性和物化性質由組成它的原子和化學鍵決定。在一個分子內部,決定了其特殊性質和可預測
液相色譜(HPLC)入門(三)
高效液相色譜量級 [分析,制備和工程]我們已經討論了高效液相色譜如何提供分析數據,用于定性和定量樣品中的化合物。然而,高效液相色譜也可以用來純化和收集所需的每一個化合物,在流通池下游使用組分收集器。這個過程被稱為制備液相[如圖 K].在制備液相中,科學家可以收集每個流出色譜柱的組分[例如:在本例中,
液相色譜(HPLC)入門(二)
什么是色譜圖?色譜圖表示發生在高效液相色譜系統中的化學[色譜]分離。一系列從基線出現的峰以時間為坐標。每個峰代表對不同化合物的檢測器反應。色譜圖由計算機數據站描繪。[如圖 H].Figure H: How Peaks Are Created圖H中,黃色譜帶完全通過了檢測器流通池;產生的電信號被送到計
液相色譜(HPLC)入門(五)
正相高效液相色譜在植物提取物的分離過程中,茨維特成功運用極性固定相[玻璃柱中的粉筆末; 如圖A]和弱極性[非極性]流動相。這種經典的色譜模式被稱為正相。圖 S -1: 正相色譜法圖 S -1 代表三個染料混合物的正相色譜分離。極性的固定相最強地保留了極性的黃色染料。相對非極性的藍色染料在非極
液相色譜(HPLC)入門(一)
什么是液相色譜?歷史概述和定義液相色譜的定義是二十世紀早期由俄羅斯植物學家 Mikhail S. 茨維特提出的。他最先嘗試在裝滿顆粒的柱子上使用溶劑來分離從植物中提取的化合物[樹葉色素]。茨維特用顆粒填滿開口的玻璃柱。他發現兩種特殊的材料,粉筆末(碳酸鈣)和氧化鋁很有用。他將樣品[混勻植物葉
液相色譜(HPLC)漏液怎么辦
通常可以通過擰緊或更換管路接頭來解決漏液的問題。但值得注意的是過份擰緊會導致金屬接頭的漏液和塑料接頭的磨損。如果通過稍微擰緊接頭不能解決漏液的問題,就必須將接頭取下,檢查是否損壞(例如,卡套損壞、密封表面有雜質);損壞的接頭應該更換掉。 1. 接頭處漏液。 一般通過擰緊、清洗、更
Thermo-Scientific-Syncronis-HPLC-液相色譜柱
開發新方法時,色譜工作者最重要的目標之一就是實現一致的、可重現的分離。為此,就需要選擇重現性高的HPLC 色譜柱。 新一代Thermo Scientific Syncronis HPLC 色譜柱通過選用超純硅膠、自動裝填工藝、嚴格的檢測和控制程序幫助色譜工作者達到滿意的
高效液相色譜(HPLC)常見問題
1、HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法樣品量不足:解決辦法為增加樣品量樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器檢測器衰減太多:調整衰減即可。檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數檢測器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。檢測池
高壓液相色譜(HPLC)系統組成(二)
四、檢測器?? ??檢測器是HPLC儀的三大關鍵部件之一。其作用是把洗脫液中組分的量轉變為電信號。HPLC的檢測器要求靈敏度高、噪音低(即對溫度、流量等外界變化不敏感)、線性范圍寬、重復性好和適用范圍廣。?1.分類?1)按原理可分為光學檢測器(如紫外、熒光、示差折光、蒸發光散射)、熱學檢測器(如吸附
高壓液相色譜(HPLC)系統組成(一)
?HPLC系統一般由??輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、數據記錄及處理裝置?等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、預柱或保護柱、柱溫控制器等,現代HPLC儀還有微機控制系統,進行自動化儀器控制和數據處理。制備型HPLC儀還備有自動餾分收集裝置
高效液相色譜(HPLC)常見問題
1、HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法?樣品量不足:解決辦法為增加樣品量樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器檢測器衰減太多:調整衰減即可。檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數檢測器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。檢測
高效液相色譜(HPLC)流動相的性質要求
高效液相色譜(HPLC)流動相溶劑具有粘度低、與檢測器相容性好、產品易得、毒性低等特點。選擇填料(固定相)后,強溶劑對填料表面溶質的吸附降低,相應的容量因子K降低。然而,較弱的溶劑增加了溶質在填料表面的吸附,相應的容量因子k也增加了? 因此,k值是流動相組成的函數? 塔板數n通常與流動相的粘度成反比
高效液相色譜技術(HPLC)的技術原理
盡管二維凝膠電泳(2-DE)是常用的對全蛋白組的分析方法,但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong等使用HPLC/質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC分離蛋白質,并用MALDI-
高效液相色譜技術(HPLC)的技術原理
盡管二維凝膠電泳(2-DE)是常用的對全蛋白組的分析方法,但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong 等使用HPLC/ 質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC 分離蛋白質,并用MAL
離子色譜與高效液相色譜(HPLC)有什么不同
離子色譜和HPLC本質上是一樣的,結構幾乎一樣,只是離子色譜用于測試陰陽離子,液相色譜用于測試有機物,色譜分離系統有些差異,IC用離子交換柱,LC用吸附柱。
離子色譜與高效液相色譜(HPLC)有什么不同
離子色譜和HPLC本質上是一樣的,結構幾乎一樣,只是離子色譜用于測試陰陽離子,液相色譜用于測試有機物,色譜分離系統有些差異,IC用離子交換柱,LC用吸附柱。
簡介高效液相色譜(HPLC)流動相的性質要求
(1)流動不會相應地改變填料的任何性質 低交聯度離子交換樹脂和排斥色譜填料有時會遇到一些有機相的膨脹或收縮,從而改變色譜柱填料床的性能。堿性流動相不能用于硅膠柱體系中,酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附柱體系中。 (3)必須與探測器配套。當使用紫外檢測器時,所用的流動相在檢測波長上不應吸收
高效液相色譜(HPLC)柱子的清洗和再生
1. 柱子的清洗 即使樣品和流動相已做過前處理,也仍難以完成避免柱子受到污染,因此必須對柱子行清洗。清洗應定期進行,如果在短期內分析許多樣品,則以每日清洗一次為宜,至少也應一周一次,防止有太多的雜質在柱上堆積。 反相柱的常規洗滌辦法是:分別取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱體積(既對于一根4
高壓液相色譜HPLC發展概況、特點及分類
一、液相色譜理論發展簡況色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobilephase)中的各組分經過固定相時,由于與固定相(stationaryphase)發生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。色譜法最早是由俄國
土霉素的高效液相色譜HPLC檢測方案
簡介:高效液相色譜HPLC檢測土霉素的方法,首頁要了解土霉素是什么和分子式等,然后通過制定高效液相色譜檢測方案,最后通過儀器與試劑等硬性條件進行土霉素檢測。【土霉素】土霉素:抗菌譜和應用與四環素相同。本品對腸道感染,立克次體病,包括流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、落基山熱、恙蟲病和Q熱,支原體屬感染
HPLC液相色譜柱柱壓升高原因
HPLC液相色譜柱柱壓升高原因? ? 色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透性,延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱壓升高一般是由于柱床內產生了雜質,造成流體阻力加大所致。格萊普多年從事色譜行業,積累了一些經驗,您可按照以下建議,逐項排除原因:1、流動相的前處理?。
液相色譜HPLC檢測器及檢測限
在定義檢測器靈敏度時,只考慮了樣品響應信號的大小,并沒有考慮檢測器的噪聲。當檢測器噪聲與響應信號大小相近時,兩者就無法區分。而且對于某些檢測器,其輸出信號要經過放大后才能輸出到記錄儀。電子放大器幾乎可以把一個信號放大到任意倍數,這樣似乎可以任意提高檢測器的靈敏度。其實不然,因為在放大信號時也同時放大
Alliance-HPLC高效液相色譜溶劑管理是如何的?
Alliance HPLC高效液相色譜該單元的溶劑管理系統最多對四路色譜溶劑進行脫氣并以精確的比例混合,并無脈動地平穩輸送溶劑; Alliance HPLC高效液相色譜有下述特征: 僅配備兩個入口閥的串行流路可降低復雜性,并大程度縮短故障停機時間 自動化溶劑壓縮性(無錯溶劑
液相色譜HPLC過程中柱壓升高的原因
樓主,把柱子拆下來再走流動相看,如果壓力很小的話就是柱子的問題,如果不接柱子壓力也高的話,則問題出在系統,需要逐步排除,可以從濾頭,單向閥等方面考慮,戴安的液相不是很清楚,你可以找說明書看看啊把柱子卸下來看看壓力大不大?一段一段的檢查.單項閥出毛病一般回引起壓力波動,把溶劑濾頭和再線過濾器卸下來清洗
高效液相色譜(High-Performance-Liauid-Chromatography,HPLC)
Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色譜的設想,然而直到六十年代后期,由于各種技術的發展,高效液相色譜才付諸實現。這種色譜技術曾被稱為高速液相色譜(HighSpeed Liquid Chromatography),高壓液相色譜(High Parss-ure Lipuid
液相色譜(HPLC)熒光檢測器工作原理簡介
液相色譜熒光檢測器是由雙路固定波長熒光檢測器的中壓泵浦燈發出的連續光通過半反射半透鏡分成兩束再經過測量池和參比池特別是大約10%的激發光被反射到參考細胞和相應的光電倍增管上液相色譜參比池有利于消除流動相發射的背景熒光和外界影響,參比光路也有利于消除光源波動的影響約90%的激發光被激發光濾光器分離,并
高效液相色譜HPLC操作流程及注意事項
高效液相色譜HPLC使用前期準備工作:1.????始終保持高效液相色譜儀器包括內在系統的清潔。2.????室內溫度始終保持恒定,因為室溫的變化對高效液相色譜檢測器有影響。3.????所有溶液、試劑、樣品、標準溶液、注射劑等都應事先準備好。4.????最好提前準備好備用電源防止停電。高效液相色譜HPL
高壓液相色譜HPLC常見故障及排除方法
癥狀 (一)保留時間變化 可能的原因:解決方法 1.柱溫變化:柱恒溫 2.等度與梯度間未能充分平衡:至少用10倍柱體積的流動相平衡柱 3.緩沖液容量不夠:用>25mmol/L的緩沖液 4.柱污染:每天沖洗柱 5.柱內條件變化:穩定進樣條件,調節流動相
Alliance-HPLC高效液相色譜溶劑管理是如何的?
Alliance HPLC高效液相色譜該單元的溶劑管理系統最多對四路色譜溶劑進行脫氣并以精確的比例混合,并無脈動地平穩輸送溶劑; Alliance HPLC高效液相色譜有下述特征: 僅配備兩個入口閥的串行流路可降低復雜性,并大程度縮短故障停機時間 自動化溶劑壓縮性(無錯溶劑