如何成為細胞培養大神？
問世間誰人無憂，唯神仙逍遙自在。 作為一名終日泡在實驗室的實驗君， 如何在細胞實驗中無所不能，超脫輪回 做到一個人人羨慕的細胞大神呢？ 且看向這里，成為細胞大神的六個細節。 1. 過濾體系 自從出現瓶裝培養基之后，培養基過濾的需求就減少了。有些時候，一些特定細胞培養支持物的添加可能會引入一些新的污染。另外，一般認為，當液體長時間接觸瓶口外的空氣后最好重新過濾；所以一般不建議 管/瓶 對 管/瓶 的傾倒。這時，很多人會選擇Millipore的濾嘴配合針筒進行再過濾。結果發現，完成500 ml培養基過濾后，手疼腰酸！過濾杯的出現完美的解決了這個問題，所以，大體積盡量使用過濾杯吧，可靠且輕松，快捷。 默克第二代超濾杯 2. 培養基的選擇 關于血清質量，業界流行的澳洲來源 > 北美來源 >南美來源的說法。這一點從價格上也可見一斑。實際情況是優質血清的市場現實是供不應求，所以很多時候大家就將就了之。如果......閱讀全文
細胞培養技術
實驗概要細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境，在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下，使期生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物為單個細胞或細胞群。主要設備細胞培養設施和基本條件 1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染
腫瘤細胞培養
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置，首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。一、組織培養腫瘤細胞生物學特性腫瘤細胞與體內正
細胞培養方法
一、準備工作 準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試，具體內容可參閱有關文獻。 二、取材
細胞培養實驗
實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞試劑、試劑盒 70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟 1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起
特殊細胞培養實驗_微載體細胞培養法
實驗方法原理微載體細胞培養開始于60年代末期，最早使用離子交換凝膠作為載體，輕微攪動即可懸液在培養基中，因而可增加細胞附著的面積，達到大量培養細胞的目的。后來，根據細胞附著生長的特點，對微載體進行了改良，使其帶有電荷或其它介質，更利于細胞附著和生長。這一方法亦可用于常規量的培養，也可用于大規模的培養
細胞培養的概念及細胞培養的技術特點
細胞培養（cell culture）是指在體外模擬體內環境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養都是一個必不可少的
細胞培養之如何將細胞培養的更漂亮？
細胞培養之如何將細胞培養的更漂亮？ 1、收到細胞，先要鏡檢：觀察細胞形態是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸的時間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養基的瓶子里生長的狀態和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如2
細胞培養基本概念和細胞培養的環境
一、細胞培養基本概念細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境，在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下，使期生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。 細胞培養 的培養物為單個細胞或細胞群。在醫學遺傳學研究中應用最廣泛的是外周血淋巴細胞、皮膚或纖維細胞和各種能在體外長期生長的細胞系。外周血淋
結締組織類細胞培養實驗——巨噬細胞培養實驗
實驗方法原理巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得，便于培養，并可進行純化。但屬不繁殖型細胞群，難以長期生存，好的條件下僅能生活2~3 周，因之多用作初代培養。巨噬細胞也能建成無限細胞系；大多來自小鼠，如P388D-1、J774A.1、RAW
細胞培養實驗中細胞培養液的相關介紹
現代生物技術均通過細胞作為載體來進行，無論是基因治療、干細胞、克隆技術都在細胞內進行的。細胞的生長需要一定的營養環境，用于維持細胞生長的營養基質稱為培養基，即指所有用于各種目的的體外培養、保存細胞用的物質，就其本意上講為人工模擬體內生長的營養環境，使細胞在此環境中有生長和繁殖的能力。它是提供細胞
細胞培養中支原體污染對細胞培養的危害
1.???支原體污染的普遍性支原體污染是細胞培養領域遇到的性問題，據文獻報道，綜合美國食品藥品監督管理局（FDA）、美國模式菌種收集中心(ATCC)等機構收到的相關數據，世界各國細胞系支原體污染的平均比例為30-60%。該數據未統計中國大陸的數據，但可以確定，大陸地區的支原體污染比例與此相當，或更嚴
細胞培養之如何將細胞培養的更漂亮？
細胞培養之如何將細胞培養的更漂亮？ 1、收到細胞，先要鏡檢：觀察細胞形態是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸的時間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養基的瓶子里生長的狀態和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢
細胞培養細胞培養的操作步驟及注意事項
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中，加入10ml預熱的DMEM完全培養基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗，棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基，輕輕吹打，接種于10cm盤中，在含5
常規細胞培養方法
原理?1? 將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。???儀器、材料及試劑?儀器：培養箱（調整至37℃），培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗
細胞培養常規方法
. 凍存細胞的復蘇應遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調至37-37。5度，取出凍存的細胞迅速放入后將細胞面浸至水面以下不斷搖動至融化。在無菌臺內將完全培養基加入50ml的小培養瓶內，約5ml左右，然后用無菌吸管從凍存管內取出細胞，置培養并內輕輕搖晃，使細胞均勻后置培養箱內培養。2. 傳代:對于貼壁細胞
特殊細胞培養實驗
實驗方法原理 二倍體細胞來源體內二倍體細胞，也即正常細胞的初代培養。初代培養細胞成功后能始終保持二倍體細胞性狀，便成為二倍體細胞培養。二倍體細胞雖不難培養，但欲求長期呈旺盛地增殖生長、并保持二倍體細胞性狀，亦非易事。為此必須采取一些有效的措施，一是低溫凍存，二是妥善的培養方法。用反復傳代的方法以求獲
ATCC細胞培養方法
基本原理?通過在支持物（如蓋玻片）上培養貼壁細胞，可以應用抗體檢測細胞表面抗原的表達或進行酶細胞化學以及免疫細胞化學檢測。該方法的優點是細胞貼壁牢固，能夠維持細胞生長時的狀態。?試劑和設備?細胞懸浮液；?6孔平底組織培養板，或φ60 mm培養皿；?18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于
細胞培養——細胞保藏
Working Cell Bank?(Contributed by?Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establishing a working cell bank????Master Cell Bank?(Contributed by?Na
傳代細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒，如果不及時的減少細胞密度，細胞將逐漸衰老死亡
上皮細胞培養
1、取材：外科植皮或手術殘余皮膚小塊，早產流產兒皮膚更好，取角化層薄者，切成0.5－1平方厘米小塊。2、置0.02%EDTA中，室溫，5分鐘。3、換入0.25%胰蛋白酶中，4℃過夜。4、分離：取出皮塊，用血管鉗或鑷子將表皮與真皮層分開。5、取出表皮，剪成更小的塊后，置0.25%胰酶中，37℃，30—
細胞培養技術1
一.細胞培養的基本原理 細胞培養是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細胞，用培養基制成細胞懸液，在體外適宜條件下，使細胞生長繁殖，并保留其一定的結構和功能特性。細胞培養與組織培養、器官培養主要不同點在于原始培養的對象不同。細胞培養使用的是單個細胞懸液，組織培養使用的是組織塊(0．5～1立方毫米)或薄片
細胞培養知識（一）
無菌操作基本技術 1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70% ethanol 擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或細
ATCC細胞培養方法
基本原理?通過在支持物（如蓋玻片）上培養貼壁細胞，可以應用抗體檢測細胞表面抗原的表達或進行酶細胞化學以及免疫細胞化學檢測。該方法的優點是細胞貼壁牢固，能夠維持細胞生長時的狀態。?試劑和設備?細胞懸浮液；?6孔平底組織培養板，或φ60 mm培養皿；?18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于
植物細胞培養條件
植物細胞培養 ?技術就是為了某種目的而在細胞水平上對離體植物細胞或原生質體進行的一系列生物工藝學操作。它包括分離、培養、再生以及一系列相關的操作。就有用化合物的生產來說，它主要是指在無菌條件下通過懸浮培養植物細胞生產有用化合物的過程。 理論與技術基礎：植物細胞全能性、微生物 ?液體深層發酵系
細胞培養常規操作
常規操作(主要內容如下)·?????????Aseptic Technique·?????????Culture Vessels·?????????Cell Counting·?????????Primary Culture·?????????Maintenance of Cell Line?·??
懸浮細胞培養經驗
6 細胞培養基的選擇 6.1根據細胞特點、蛋白表達及病毒特點和培養方式選擇細胞培養基 商售工業用細胞培養基主要是干粉培養基，常用的培養基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等系列，根據細胞的特性及工業化的生產需求，開發或生產的同一系列的細胞培養基在成份上也有
細胞培養的*設施
一、無菌實驗室無菌實驗室或操作室的設計原則是，有防止微生物污染和有害因素的影響措施，要求工作環境清潔、空氣清新、干燥和無煙塵。無菌實驗室能單獨設置。如果條件有限，只能限制在一個大實驗室內，應劃分不同的功能區或用鋁合金隔板隔開，將無菌操作室與清洗、消毒滅菌區、制備、儲藏和孵育區分開。無菌操作區只限于細
羊水細胞培養簡介
羊水細胞培養是在超聲引導下經腹羊膜腔穿刺抽取羊水后，取出羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞進行培養，抽取其中細胞分析胎兒染色體核型的檢查。 正常值 正常男性的染色體核型為44條常染色體加2條性染色體X和Y，檢查報告中常用46，XY來表示。正常女性的常染色體與男性相同，性染色體為2條XX，常用46，
腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗可用于：（1）研究腫瘤的發生機理；（2）研究生物學行為；（3）研究抗腫瘤藥物。實驗方法原理腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃至繁殖、為研究癌變機理、抗癌藥檢測、腫瘤分子生物學提供大量的實驗材料。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒培養液Hanks胰
IPS細胞培養過程
誘導多能干細胞（induced pluripotent stem cells, iPS cells）最初是日本人山中申彌（Shinya Yamanaka）于2006年利用病毒載體將四個轉錄因子（Oct4, Sox2, Klf4 和c-Myc）的組合轉入分化的體細胞中，使其重編程而得到的類似胚