Folin—酚試劑法(Lowry法)
實驗概要本文介紹了Folin—酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質的實驗原理、操作步驟及注意事項等。實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難,近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深藍色的原因是:在堿性條件下,蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物。 Folin—酚試劑中的磷鉬酸鹽—磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原,產生深藍色(鉬蘭和鎢蘭的混合物)。在一定的條件下,藍色深度與蛋白的量成正比。Folin—酚試劑法最早由Lowry確定了蛋白質濃度測定的基本步驟。以后在生物化學領域得到廣泛的應用。這個測定法的優點是靈敏度高,比雙縮脲法靈敏得多,缺點是費時間較長,要精確控制操作時間,標準曲線也不是嚴格的直線形式,且專一性較差......閱讀全文
Folin—酚試劑法(Lowry法)
實驗概要本文介紹了Folin—酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質的實驗原理、操作步驟及注意事項等。實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難,近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Fol
Folin酚法的實驗原理
這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(可訂購),逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深藍色的原因是:在堿性條件
有哪些因素可以干擾folin
1.干擾物質 此法是在Folin-酚法的基礎上引入雙縮脲試劑,因此凡干擾雙縮脲反應的基團,如-CO-NH2,-CH2-NH2,-CS-NH2以及在性質上是氨基酸或肽的緩沖劑,如Tris緩沖劑以及蔗糖,硫酸銨,巰基化合物均可干擾Folin-酚反應。此外,所測的蛋白質樣品中,若含有酚類及檸檬酸,均
概述Folin酚法的實驗原理
這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(可訂購),逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。 此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深藍色的原因是:在
Folin酚法的用途和功效
Folin-酚法(Lowry法)最靈敏的蛋白質測定方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難,近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。最早由Lowry確定了蛋白質濃度測定的基本步驟。以后在生物化學領域得到廣泛的應用。
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Folin-酚法(Lowry法)最靈敏的蛋白質測定方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難,近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。最早由Lowry確定了蛋白質濃度測定的基本步驟。以后在生物化學領域得到廣泛的應用。
folin酚法測定蛋白質的原理
這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(可訂購),逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深藍色的原因是:在堿性條件
關于Folin酚法應用試劑的介紹
試劑 (1)試劑甲(A,B): (A) 10克 Na2CO3,2克 NaOH和0.25克酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸餾水中。 (B) 0.5克硫酸銅(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸餾水中,每次使用前,將50份(A)與1份(B)混合,即為試劑甲。
Folin酚法的實驗操作方法
標準曲線測定取16支大試管,1支作空白,3支留作未知樣品,其余試管分成兩組,分別加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升標準蛋白質溶液(濃度為250mg/L)。用水補足到1.0毫升,然后每支試管加入5毫升試劑甲,在旋渦混合器上迅速混合,于室溫(20~25℃)放置10分鐘。再逐管加入
概述Folin酚法的樣品的測定內容
取1毫升樣品溶液(其中約含蛋白質20~250微克),按上述方法進行操作,取1毫升蒸餾水代替樣品作為空白對照。通常樣品的測定也可與標準曲線的測定放在一起,同時進行。即在標準曲線測定的各試管后面,再增加3個試管。如上表中的8、9、10試管。 根據所測樣品的吸光度值,在標準曲線上查出相應的蛋白質量,
蛋白測定方法之Folin—酚試劑法(Lowry法)
(一)實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(現在已可以訂購),近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產
蛋白測定方法介紹Folin—酚試劑法實驗原理
蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(現在已可以訂購),近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深蘭色的原因是:
蛋白質含量測定實驗——folin—酚試劑法
蛋白質含量測定實驗可以用于:(1)測定蛋白質濃度;(2)檢測所提取的蛋白質含量。實驗方法原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(現在已可以訂購),近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即f
Folin酚試劑法的優缺點有哪些
優點:靈敏度高,比雙縮脲法靈敏得多。缺點:費時間較長,要精確控制操作時間,標準曲線也不是嚴格的直線形式,且專一性較差,干擾物質較多。對雙縮脲反應發生干擾的離子,同樣容易干擾folin-酚反應(Lowry反應)。而且對后者的影響還要大得多。
Folin酚試劑法測定蛋白質含量
一、 目的 掌握Folin-酚法測定蛋白質含量的原理和方法,熟悉分光光度計的操作。 二、原理 Folin-酚試劑法包括兩步反應:第一步是在堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質-銅絡合物;第二步是此絡合物將磷鉬酸-磷鎢酸試劑(Folin 試劑)還原,產生深藍色(磷鉬藍和磷鎢
蛋白測定方法介紹Folin—酚試劑法(Lowry法)
(一)實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(現在已可以訂購),近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產
Folin酚法的實驗所需試劑與器材
試劑(1)試劑甲(A,B):(A) 10克 Na2CO3,2克 NaOH和0.25克酒石酸鉀鈉?(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸餾水中。(B) 0.5克硫酸銅(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸餾水中,每次使用前,將50份(A)與1份(B)混合,即為試劑甲。(2)試劑乙:在
Lowry–Folin法測定液體樣品中蛋白質含量
一、 實驗目的1、 了解測定蛋白質的常用方法2、 掌握蛋白質含量測定的經典Lowry – Folin法。二、 實驗原理在堿性溶液中,蛋白質中的肽鍵與銅鹽可產生雙縮脲反應,產生絡合物,此絡合物會將磷鉬酸-磷鎢酸試劑還原,產生深藍色復合物。在一定的條件下,藍色深淺與蛋白質的量成正比。在波長540nm處測
Folin酚法的標準曲線測定法概述
取16支大試管,1支作空白,3支留作未知樣品,其余試管分成兩組,分別加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升標準蛋白質溶液(濃度為250mg/ml)。用水補足到1.0毫升,然后每支試管加入5毫升試劑甲,在旋渦混合器上迅速混合,于室溫(20~25℃)放置10分鐘。再逐管加入0.5
folin酚試劑法測定蛋白質含量的原理
此法的顯色原理與雙縮脲法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深藍色的原因是:在堿性條件下,蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物。 Folin—酚試劑中的磷鉬酸鹽—磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原,產生深藍色(
Lowry–Folin法測定液體樣品中蛋白質含量
一、 實驗目的1、 了解測定蛋白質的常用方法2、 掌握蛋白質含量測定的經典Lowry – Folin法。二、 實驗原理在堿性溶液中,蛋白質中的肽鍵與銅鹽可產生雙縮脲反應,產生絡合物,此絡合物會將磷鉬酸-磷鎢酸試劑還原,產生深藍色復合物。在一定的條件下,藍色深淺與蛋白質的量成正比。在波長540nm處測
Lowry–Folin法測定液體樣品中蛋白質含量
一、 實驗目的 1、 了解測定蛋白質的常用方法 2、 掌握蛋白質含量測定的經典Lowry – Folin法。 二、 實驗原理 在堿性溶液中,蛋白質中的肽鍵與銅鹽可產生雙縮脲反應,產生絡合物,此絡合物會將磷鉬酸-磷鎢酸試劑還原,產生深藍色復合物。在一定的條件下,藍色深淺與蛋
Lowry–Folin法測定液體樣品中蛋白質含量
一、 實驗目的1、 了解測定蛋白質的常用方法2、 掌握蛋白質含量測定的經典Lowry – Folin法。二、 實驗原理在堿性溶液中,蛋白質中的肽鍵與銅鹽可產生雙縮脲反應,產生絡合物,此絡合物會將磷鉬酸-磷鎢酸試劑還原,產生深藍色復合物。在一定的條件下,藍色深淺與蛋白質的量成正比。在波長540nm處測
蛋白測定方法介紹Folin—酚試劑法所需試劑與器材
1.試劑(1)試劑甲:(A)10克Na2CO3,2克NaOH和0.25克酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸餾水中。(B)0.5克硫酸銅(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸餾水中,每次使用前,將50份(A)與1份(B)混合,即為試劑甲。(2)試劑乙:在2升磨口回流瓶中
蛋白質濃度測定-FolinPhenol-(Lowry)測定法
目的要求(1)學習Folin-phenol法測定蛋白質含量的原理及方法。(2)制備標準曲線,測定未知樣品中蛋白質含量。原理目前蛋白質含量測定有兩類方法,一類是利用蛋白質的物理化學性質,如折射率、比重、紫外吸收等測定得知;另一類是利用化學方法測定蛋白質含量,如微量凱氏定氮、雙縮脈反應、Folin-ph
folin酚試劑法測定蛋白質含量的注意事項
進行測定時,加Folin—酚試劑時要特別小心,因為該試劑僅在酸性pH條件下穩定,但上述還原反應只在pH=10的情況下發生,故當Folin一酚試劑加到堿性的銅—蛋白質溶液中時,必須立即混勻,以便在磷鉬酸—磷鎢酸試劑 被破壞之前,還原反應即能發生。 此法也適用于酪氨酸和色氨酸的定量測定。[1]
蛋白測定方法介紹Folin—酚試劑法(Lowry法)操作方法
1.標準曲線的測定:取16支大試管,1支作空白,3支留作未知樣品,其余試管分成兩組,分別加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升標準蛋白質溶液(濃度為250mg/ml)。用水補足到1.0毫升,然后每支試管加入5毫升試劑甲,在旋渦混合器上迅速混合,于室溫(20~25℃)放置10分鐘。
蛋白質的定量測定——福林酚法(Folin—酚試劑法)
實驗原理 Folin—酚試劑法最早是由Lowry確定的測定蛋白質濃度的基本方法。以后在生物化學領域得到廣泛的應用。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這個方法的優點是靈敏度高,比雙縮脲法靈敏得多,缺點是費時較
有哪些因素可干擾Folin酚測定蛋白質含量
酚類、檸檬酸、硫酸銨、Tris緩沖液、甘氨酸、糖類、甘油等均有干擾作用。濃度較低的尿素(0.5%),硫酸納(1%),硝酸納(1%),三氯乙酸(0.5%),乙醇(5%),乙醚(5%),丙酮(0.5%)等溶液對顯色無影響,但這些物質濃度高時,必須作校正曲線。含硫酸銨的溶液,只須加濃碳酸鈉—氫氧化鈉溶液,
蛋白質含量的測定:Folin酚試劑法(Lowry法)和考馬斯...
蛋白質含量的測定—Folin-酚試劑法(Lowry法)和考馬斯亮藍法 1.學習Folin-酚法測定蛋白質含量的原理和方法。 2. 進一步掌握分光光度法——求標準曲線、準確測定未知樣品、正確使用儀器。 ? 原理 ? 蛋白質濃度可以從它們