TubulinPreparat
Materials3 - 5 Fresh Pig Brains1 M GTP1 M Magnesium SulfatePM buffer =100 mM Pipes, pH 6.9 2 mM EGTA 1 mM Magnesium Sulfate2 mM DTTPM-4M Buffer =100 mM Pipes, pH 6.92 mM EGTA1 mM Magnesium Sulfate2 mM DTT4 M GlycerolPM-8M Buffer =100 mM Pipes, pH 6.92 mM EGTA1 mM Magnesium Sulfate2 mM DTT8 M Glycerol0.1 mM GTPPC Column (20 mL phosphocellulose resin in 2.5 cm diameter column) equilibrated in PM bufferSpecial......閱讀全文
Tubulin-Preparat
Materials3 - 5 Fresh Pig Brains1 M GTP1 M Magnesium SulfatePM buffer =100 mM Pipes, pH 6.9?2 mM EGTA?1 mM Magnesium Sulfate2 mM DTTPM-4M Buffer =100 m
Preparation-of-tubulin
Although many protocols for tubulin preparation are available, the procedure described below is the simplest and highest yielding preparation I have d
Tubulin-Basics
I. Useful Values1 mg/ml tubulin = 10 μM (assuming MW of ab-tubulin heterodimer is 100,000; in reality it is ~110,000 but almost all tubulin labs use t
Recycling-Tubulin
Recycling TubulinWe "recycle" tubulin fractions stored at -80?C after the PC column and store the recycled tubulin in small aliquots for day-to-day us
Tubulin-Basics
I. Useful Values1 mg/ml tubulin = 10 μM (assuming MW of ab-tubulin heterodimer is 100,000; in reality it is ~110,000 but almost all tubulin labs use t
Immunofluorescent-Localization-of-Tubulin
LEVEL IIMaterialsCoverslip cultures of an appropriate monolayer cell linePhosphate buffered saline (PBS)Acetone/Methanol (absolute) in a 50:50 volume
Preparation-of-tubulin2
DAY 2: Cycling preparation of MT protein.Keep the brains in an evacuated plastic ziplock bag buried in ice from the time of slaughter during transport
porcine-brain-tubulin-prep
Although many protocols for tubulin preparation are available, the procedure described below is the simplest and highest yielding preparation I have d
Large-Scale-Tubulin-Preparation
Tubulin is purified from bovine/porcine brain by two cycles of polymerization/depolymerization followed by removal of copurifying proteins on a phosph
Labeling-Tubulin-and-Quantifying-Labeling-Stoichiometry
Labeling Tubulin and Quantifying Labeling StoichiometryThis is a general procedure for coupling moieties with reactive succinimidyl esters to tubulin.
Large-Scale-Tubulin-Preparation——2
III. Pouring a 1L Phosphocellulose (PC) ColumnResin: Whatman P11 Cellulose Phosphate -- fibrous cation exchanger(1 gram of PC swells to about 4 ml pac
Tubulin-Polymerization-with-GTP/GMPCPP/Taxol
I. Solutions & SuppliesII. Prepolymerization ClarificationIII. GTP PolymerizationIV. Taxol PolymerizationV. GMPCPP PolymerizationVI. Determining Conce
SDS-Gel-Electrophoresis-of-Tubulin\MAPs
MaterialsStock Acrylamide: (30%T:0.8%C)30% by weight of acrylamide0.8% by weight of N,N'-bis-methylene acrylamideSeparation Gel (Final Concentrati
Labeling-Tubulin-and-Quantifying-Labeling-Stoichiometry2
II. Labeling ProtocolThe procedure described below can be scaled down if desired. It is essential to perform all steps involving caged dyes under a sa
βTubulin抗體—做出漂亮WB和IHC圖片的內參
Tubulin即微管蛋白,是細胞的一種骨架蛋白。Tubulin分為α、β、γ、δ、ε等多種tubulin,其中α-Tubulin和β-Tubulin可以形成異源二聚體,是形成微管的最主要的兩種Tubulin。α-tubulin和β-tubulin分子量分別為55kDa和50kDa,其實際檢測條帶均在
作用于微管系統的藥物研究(四):tubulin-code與藥物靶點
有位同行曾經對我說:你在紫杉烷與微管作用及腫瘤耐藥方面的研究雖然做得還不錯,但無論是靶點還是藥物分子都太老了。言下之意這樣研究很難繼續走下去。考慮到當今時代促使人們去弄潮(也可稱之為追逐熱點—其利與弊在這里不展開了),而且科研確實也應該不斷探索未知領域,不能滿足于對已有知識體系的修修補補,在這個
Preparation-of-Segmented-and-Polarity-Marked-Microtubules
Segmented and polarity-marked microtubules are very useful for many different types of?in vitro?assays. Segmented microtubules are microtubules with a
Preparation-of-Segmented-and-Polarity-Marked-Microtubules
Preparation of Segmented and Polarity Marked Microtubules?Segmented and polarity-marked microtubules are very useful for many different types of?in vi
TUBA3C基因突變因子與藥物介紹
真核細胞骨架的微管具有多種功能,由α和β微管蛋白的異二聚體組成。編碼這些微管成分的基因是微管蛋白超家族的一部分,該家族由六個不同的家族組成。所有真核生物中都有α、β和γ微管蛋白家族的基因。α和β微管蛋白是微管的主要成分,而γ微管蛋白在微管組裝成核過程中起著關鍵作用有多種α和β-微管蛋白基因,在種間和
TUBA3C基因編碼的功能和結構描述
真核細胞骨架的微管具有多種功能,由α和β微管蛋白的異二聚體組成。編碼這些微管成分的基因是微管蛋白超家族的一部分,該家族由六個不同的家族組成。所有真核生物中都有α、β和γ微管蛋白家族的基因。α和β微管蛋白是微管的主要成分,而γ微管蛋白在微管組裝成核過程中起著關鍵作用有多種α和β-微管蛋白基因,在種間和
PNAS:微管蛋白影響發育的不對稱性
機體發育過程中,內臟器官以一種一致性的不對稱形式排列——心臟和胃在左邊,肝和囊尾在右邊,而這一切是如何發生的呢? 美國Tufts大學的生物學家得到了微管蛋白tubulin在許多物種發育早期形成不對稱模式的第一手證據,包括植物、線蟲、青蛙和人體細胞。文章發表在7月16日Proceedings
TUBA1A基因編碼的功能和結構描述
真核細胞骨架的微管具有重要和多樣的功能,由α和β微管蛋白的異二聚體組成。編碼這些微管成分的基因屬于微管蛋白超家族,由六個不同的家族組成。所有真核生物中都有α、β和γ微管蛋白家族的基因。α和β微管蛋白是微管的主要成分,而γ微管蛋白在微管組裝成核過程中起著關鍵作用。有多種α和β-微管蛋白基因,在物種間高
TUBA1A基因突變因子與藥物介紹
真核細胞骨架的微管具有重要和多樣的功能,由α和β微管蛋白的異二聚體組成。編碼這些微管成分的基因屬于微管蛋白超家族,由六個不同的家族組成。所有真核生物中都有α、β和γ微管蛋白家族的基因。α和β微管蛋白是微管的主要成分,而γ微管蛋白在微管組裝成核過程中起著關鍵作用。有多種α和β-微管蛋白基因,在物種間高
細胞組分和細胞器——細胞骨架
Fixation and Immunofluorescence of the Cytoskeleton?(Mitchison Lab)??Recycling Tubulin?(Mitchison Lab)??Labeling Tubulin and Quantifying Labeling Stoi
TTL基因編碼的功能和結構描述
ttl是一種參與α-微管蛋白翻譯后修飾的胞漿酶(見mim 602529)。聚集微管內的α-微管蛋白隨著時間在C末端被去甲狀腺激素化微管解體后,TTL恢復酪氨酸殘基,從而參與微管蛋白去酪氨酸酶和酪氨酸酶的循環(ERCK等人,2003【PubMed 14571137】。TTL is a cytosoli
TTL基因突變因子與藥物介紹
ttl是一種參與α-微管蛋白翻譯后修飾的胞漿酶(見mim 602529)。聚集微管內的α-微管蛋白隨著時間在C末端被去甲狀腺激素化微管解體后,TTL恢復酪氨酸殘基,從而參與微管蛋白去酪氨酸酶和酪氨酸酶的循環(ERCK等人,2003【PubMed 14571137】。【OMIM提供,2008年3月】T
Nature子刊:微管解聚型驅動蛋白的結構機制
來自同濟大學生命科學與技術學院,法國國家科研中心I2BC研究所的研究人員發表了題為“Insight into microtubule disassembly by kinesin-13s from the structure of Kif2C bound to tubulin”的文章,闡明了中間
什么是微管蛋白?
tubulin組成微管的蛋白質稱為微管蛋白。微管蛋白是球形分子,有兩種類型:α微管蛋白(α-tubulin)和β微管蛋白(β-tubulin),這兩種微管蛋白約占微管蛋白總量的80%~95%,具有相似的三維結構,能夠緊密地結合成二聚體,作為微管組裝的亞基。α亞基由450個氨基酸組成,β亞基是由4
微管蛋白的結構特點
tubulin組成微管的蛋白質稱為微管蛋白。微管蛋白是球形分子,有兩種類型:α微管蛋白(α-tubulin)和β微管蛋白(β-tubulin),這兩種微管蛋白約占微管蛋白總量的80%~95%,具有相似的三維結構,能夠緊密地結合成二聚體,作為微管組裝的亞基。α亞基由450個氨基酸組成,β亞基是由455
生化與細胞所兩項分子機制研究登國際期刊
????? 來自中科院上海生科院生物化學與細胞生物學研究所鮑嵐研究組與王綱研究組近期分別發表文章,揭示了α-tubulin乙酰基轉移酶MEC-17調控神經元遷移的新機制,以及中介體復合物Med23亞基在脂肪和平滑肌發育中的調控機制。 在大腦皮層發育過程中,