HBsAg假陽性和假陰性原因分析之ELISA法和金標法
ELISA法ELISA法假陰性原因1、標本用肝素或EDTA等抗凝處理易造成HBsAg檢測結果假陰性,肝素抗凝血漿會增加OD值,可能與高濃度肝素具有強大的負電荷,能吸附酶標記物不易洗脫有關;EDTA、酶抑制劑可抑制ELISA系統中的辣根過氧化物酶活性,造成假陰性。2、標本保存不當,在冰箱內保存過久的標本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體。標本放置時間延長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,便出現假陰性。因此若采血后不能及時檢測,5天內檢測標本分離血清置于4℃冰箱內;超過5天不能檢測的,應放在-20℃低溫冰箱中。3、低濃度HBsAg標本(弱陽性HBsAg)易受加樣時間(特別是大批量標本)、試劑平衡時間、溶血程度的影響,出現假陰性。如加樣時間在30分鐘內的差異是最大的。4、高濃度HBsAg在ELISA一步法檢測中易出現假陰性,即HBsAg的鉤狀效應。從原理來講,一步法中HBsAg與包被板上的HBsAb及酶結合的H......閱讀全文
血清HBsAg-定量檢測及探討從檢驗者角度看HBsAg定量
趙秀英首都醫科大學附屬北京佑安醫院臨床檢驗中心(北京,100069)?[摘要]?隨著乙肝病毒表面抗原(HBsAg)檢測技術的突破,以血清HBsAg 定量作為慢性乙肝抗病毒療效觀察及治療終點預測逐漸得到國際認可。研究表明血清HBsAg 定量:1) 分別與HBV DNA定量及肝內cccDNA定量存在一定
ELISA(雙抗體夾心法)—檢測HBsAg
以已知抗體(抗HBs)包被載體,然后將含有抗原的待檢標本加入,共同孵育后,抗原結合于包被抗體上,再加入酶標記特異抗體(酶標抗HBs),酶標抗體連接到抗原上,最后加入底物溶液,根據顏色反應來判定抗原含量。 【材料】HBsAg試劑盒,本試劑盒含: 1、包被抗-HBs反應條 1瓶
ELISA(雙抗體夾心法)—檢測HBsAg
以已知抗體(抗HBs)包被載體,然后將含有抗原的待檢標本加入,共同孵育后,抗原結合于包被抗體上,再加入酶標記特異抗體(酶標抗HBs),酶標抗體連接到抗原上,最后加入底物溶液,根據顏色反應來判定抗原含量。 【材料】HBsAg試劑盒,本試劑盒含: 1、包被抗-HBs反應條 1瓶
hbsag免疫復合物的概述
免疫復合物是抗原-抗體反應產物,可分為兩大類,及特異性免疫復合體形成的免疫復合物;非特異性免疫復合物(如在腎小球腎炎、系統性紅斑狼瘡中形成等)。乙型肝炎表面抗原免疫復合物測定對了解乙型肝炎慢性病變有一定意義。
ELISA(雙抗體夾心法)—檢測HBsAg
以已知抗體(抗HBs)包被載體,然后將含有抗原的待檢標本加入,共同孵育后,抗原結合于包被抗體上,再加入酶標記特異抗體(酶標抗HBs),酶標抗體連接到抗原上,最后加入底物溶液,根據顏色反應來判定抗原含量。【材料】HBsAg試劑盒,本試劑盒含:? 1、包被抗-HBs反應條1瓶2、酶結合物1瓶3、HBsA
HBsAg定量檢測及其臨床意義
???HBsAg的定量檢測是目前監測和預測抗乙肝病毒治療后應答的新工具,結合HBV DNA及乙肝病毒e抗原(HBeAg)的陰轉和血清轉換,我們能更準確地預測患者的近期和遠期抗病毒治療的療效。因此,該檢測已在臨床上得以廣泛開展,特別是被用于判定抗病毒治療療效,以及根據早期下降的速度和幅度來預測遠期療
血清HBsAg免疫復合物檢查作用
乙型肝炎表面抗原免疫復合物測定對了解乙型肝炎慢性病變有一定意義。陽性提示機體對乙型肝炎病毒的反應。但在某些情況下可造成免疫性肝細胞病理損傷,HBsAg免疫復合物大量沉積于血管、腎臟等組織,可引起炎癥反應,發生乙肝的肝外表現。
【華西檢驗案例】HBsAg轉陰=HBV根除?
病例?患者,男,61歲,因“腹痛9+月,確診為彌漫大B淋巴瘤7+月,擬化療入院”。入院后查體:一般情況可,心肺腹(-),雙下肢無水腫。?患者開始化療前的實驗室檢查結果:乙肝表面抗原(HBsAg)陰性、乙肝e抗體(HBeAb)陽性、乙肝核心抗體(HBcAb)陽性,血清HBV-DNA陰性(<100
ELISA方法檢測HBSAg標準操作規程
一.目的本SOP規定了HBSAg酶聯免疫吸附實驗的程序和相應的操作.二.范圍HBSAg檢測三.責任實驗室操作人員嚴格按要求執行。四.定義無五.背景為使實驗結果準確無誤,需要技術員從第一步開始就按標準操作進行。六.程序本程序適用于乙型肝炎病毒抗原(HBSAg)診斷試劑盒。(一).設備和材料???? 酶
hbsag免疫復合物的正常值
HBsAg免疫復合物:陰性。(酶聯免疫吸附測定) HBsAg免疫復合物:
hbsag免疫復合物的臨床意義
陽性: 提示機體對乙型肝炎病毒的反應。但在某些情況下可造成免疫性肝細胞病理損傷,HBsAg免疫復合物大量沉積于血管、腎臟等組織,可引起炎癥反應,發生乙肝的肝外表現。
血清HBsAg免疫復合物檢查過程
1 取已包被固相載體反應板條安放在框架上,并編號。每孔加待測血清50μl,每板均做陽性、陰性及空白對照。 2 然后每孔加入酶標記抗HBs 1滴,置微型振蕩器上振蕩1~2min,放37℃水浴30min。 3 取出反應板,甩去孔內液體,用洗液洗5次,每次洗滌靜置1min,風干后加底物溶液(A
血清HBsAg免疫復合物指標解讀結果
陰性: 正常:HBsAg免疫復合物:陰性。(酶聯免疫吸附測定) HBsAg免疫復合物:;1:16.(聚乙二醇沉淀胃蛋白解離法測定) 陽性: 陽性: 提示機體對乙型肝炎病毒的反應。但在某些情況下可造成免疫性肝細胞病理損傷,HBsAg免疫復合物大量沉積于血管、腎臟等組織,可引起炎癥反應,發
血清HBsAg免疫復合物注意事項
一、抽血前的注意事項 1.抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 2.體檢前一天的晚八時以后,應開始禁食12小時,以免影響檢測結果。 3.抽血時應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮,增加采血的困難。 二、抽血后應注意 1.抽血后,需在針孔
HBsAg膠體金診斷試劑漏檢原因分析
目前,為避免血液浪費,保證血液質量,越來越多的血站采用膠體金試紙條進行獻血員HBsAg篩查,該方法簡單快捷,不需要特殊儀器,特異性高,但在工作中筆者發現該方法存在漏檢,對漏檢原因進行分析,現報告如下。1? 材料與方法1.1? 標本來源? 街頭無償獻血者血樣共計13937份。1.2? 材料? HBsA
重視HBsAg突變隱患應對乙肝防治新挑戰
乙肝是危害人類健康的全球性疾病。世界衛生組織(WHO)公布的數據顯示,據估計全球有20億人感染過乙肝病毒(HBV);2.57億人是慢性HBV攜帶者,其中75%的慢性病例來自亞洲。2015年,乙肝導致了全球88.7萬人死亡,其中大多數死于乙肝并發癥(包括肝硬化和肝細胞癌)。 HBV感染檢測常用的
關于HBsAg攜帶者具備的條件介紹
所謂非活動性HBsag攜帶狀態,就是我們所說的無癥狀HBv攜帶者,但它這個概念可能更清晰—些,它的實質是:在肝內存在持續性HBv感染,但肝內沒有明顯的進行性壞死炎癥性疾病。非活動性HBsAg攜帶狀態應當具備5個條件: (1)HBsAg陽性在6個月以上; (2)HBeAg陰性,抗—HBe陽性;
hbsag免疫復合物有哪些注意事項
一、抽血前的注意事項 (1) 抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 (2) 體檢前一天的晚八時以后,應開始禁食12小時,以免影響檢測結果。 (3)抽血時應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮,增加采血的困難。 二、抽血后應注意 (1)抽血
hbsag免疫復合物抽血后注意事項
(1)抽血后,需在針孔處進行局部按壓3-5分鐘,進行止血。注意:不要揉,以免造成皮下血腫。 (2)按壓時間應充分。各人的凝血時間有差異,有的人需要稍長的時間方可凝血。所以當皮膚表層看似未出血就馬上停止壓迫,可能會因未完全止血,而使血液滲至皮下造成青淤。因此按壓時間長些,才能完全止血。如有出血傾
哪些原因可致HBsAg檢測出現假陽性?
哪些原因可致HBsAg檢測出現假陽性?:乙型肝炎病毒HBsAg檢測假陽性原因分析目前國內臨床多采用ELISA 法檢測乙型肝炎血清標志物,它以免疫學反應為基礎,將抗原抗體的特異性反應與www.med126.com酶對底物的高效催化作用相結合,通過洗滌除去多余游離反應物,以保證實驗結果特異性和穩定性,但
關于HBsAg攜帶者的傳染性介紹
HBsAg陽性,包括所謂“大三陽”或“小三陽”,是指感染了乙肝病毒,但肝臟并沒有炎癥,肝功能的各項檢查均正常,而且這種狀況保持1年以上。簡單點說,就是感染了乙肝病毒,但是病情沒有發作。 很多人認為HBsAg攜帶者體內病毒沒有發作,當然也不會傳染給其他人了,其實這種想法是錯誤的。乙肝HBsAg攜
免疫學實驗HBsAg免疫復合物介紹
HBsAg免疫復合物介紹: 免疫復合物是抗原-抗體反應產物,可分為兩大類,及特異性免疫復合體形成的免疫復合物;非特異性免疫復合物(如在腎小球腎炎、系統性紅斑狼瘡中形成等)。乙型肝炎表面抗原免疫復合物測定對了解乙型肝炎慢性病變有一定意義。 HBsAg免疫復合物正常值: HBsAg
乙型肝炎病毒表面抗原(HBSAg)的簡介
乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)指乙型肝炎病毒外殼部分所含的小球形顆粒與管型顆粒,現分為八種不同亞型和兩種混合亞型。乙型肝炎病毒表面抗原在乙型肝炎病毒感染早期出現于病人血循環中,可持續數月、數年乃至終身,是診斷乙型肝炎病毒感染最常用的指標。但在所謂乙型肝炎病毒感染的窗口期,乙型肝炎病毒表面抗原
hbsag免疫復合物抽血前注意事項
(1) 抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 (2) 體檢前一天的晚八時以后,應開始禁食12小時,以免影響檢測結果。 (3)抽血時應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮,增加采血的困難。
造成HBsAg檢測出現假陽性的幾種原因
造成HBsAg檢測出現假陽性的原因可能會有以下幾種:? 1. 待測標本溶血或含有血細胞。? 2. 待測標本長菌或其它原因混濁。? 3. 洗板時洗滌液溢出,污染其它孔。? 4. 洗板機內部管道有真菌生長。? 5. 洗板機設置不當。? 6. 手工洗板時,拍干用紙未更換。? 7. 實驗中,實際孵育時間過長
HBsAg陰性孕婦乙型肝炎病毒宮內感染檢測分析
作者:馮慧芳,王永莉,伍業星 [摘 要] 目的:探討使用熒光定量PCR方法檢測乙型肝炎表面抗原(HBsAg)陰性孕婦乙型肝炎病毒(HBV)宮內感染情況。方法:選擇住院分娩的HBsAg陰性孕婦,使用熒光定量PCR方法檢測孕婦及其新生兒的血清中HBVDNA。結果:502例HBsAg陰性孕婦血清HBVD
關于乙型肝炎病毒表面抗原(HBSAg)的介紹
乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)指乙型肝炎病毒外殼部分所含的小球形顆粒與管型顆粒,現分為八種不同亞型和兩種混合亞型。乙型肝炎病毒表面抗原在乙型肝炎病毒感染早期出現于病人血循環中,可持續數月、數年乃至終身,是診斷乙型肝炎病毒感染最常用的指標。但在所謂乙型肝炎病毒感染的窗口期,乙型肝炎病毒表面抗原
臨床化學檢查方法介紹HBsAg免疫復合物介紹
HBsAg免疫復合物介紹: 免疫復合物是抗原-抗體反應產物,可分為兩大類,及特異性免疫復合體形成的免疫復合物;非特異性免疫復合物(如在腎小球腎炎、系統性紅斑狼瘡中形成等)。乙型肝炎表面抗原免疫復合物測定對了解乙型肝炎慢性病變有一定意義。HBsAg免疫復合物正常值: HBsAg免疫復合物:陰性。(
酶標儀雙波長與單波長比色測定HBsAg的比較
使用酶標儀對e抗進行檢測,在選擇雙、單波長使用方面進行研究分析,供大家參考。當使用酶標儀判定HBsAg的結果時,我們會相應地發現用單波長比色測定會促進部分弱陽性樣品漏檢,而采用雙波長比色測定則可進一步減少相應現象的發生。? 資料與方法 hBsAg試劑盒為上海某公司。 dRG-3000型酶標儀,
乙肝篩查需重視HBsAg突變體檢測
乙肝表面抗原(HBsAg)是臨床上應用最多的HBV感染血清標志物,它是WHO公認的判斷HBV感染的關鍵指標【1】。HBV復制周期快且聚合酶易錯配,導致HBV復制過程中突變率非常高。在內源性(宿主免疫清除)和外源性(疫苗、HBIG和抗病毒治療)選擇壓力下非常容易選擇出新的逃逸突變株。HBsAg突變會造