MDCK細胞培養
本人具有數年的細胞培養經驗，期間經歷了無數次的失敗和成功，回想起來有苦也有甜，現在把中國疾病預防控制中心和我自己的經驗結合起來，制作成MDCK細胞培養SOP，歡迎大家參閱：一、目的MDCK細胞培養是分離流感病毒及相關研究實驗的基本技術。疾控中心的所有技術人員，必須按照本文件相關的操作規程進行操作。二、適用范圍適用于疾控中心所有技術人員 。三、程序（一）生物安全要求實驗室生物安全級別：BSL-1所有操作必須在BSL-1實驗室的生物安全柜里進行。（二）材料1. 生長成片的MDCK細胞2. 無菌的T25細胞培養瓶3. D-MEM培養液（含有L-谷氨酰胺）4. 青、鏈霉素母液（10000 U/mL青霉素G；10000μg/mL硫酸鏈霉素），分裝后保存于-20℃5. HEPES緩沖液，1M母液6. 胎牛血清7. EDTA-胰酶（0.05%胰酶，0.53mM EDTA-4Na），分裝后保存于-20℃8. 7.5%牛血清白蛋白組分V......閱讀全文
MDCK細胞培養
本人具有數年的細胞培養經驗，期間經歷了無數次的失敗和成功，回想起來有苦也有甜，現在把中國疾病預防控制中心和我自己的經驗結合起來，制作成MDCK細胞培養SOP，歡迎大家參閱：一、目的MDCK細胞培養是分離流感病毒及相關研究實驗的基本技術。疾控中心的所有技術人員，必須按照本文件相關的操作規程進行操作。二
MDCK細胞培養所需材料和操作步驟
MDCK細胞培養是分離流感病毒及相關研究實驗的基本技術。疾控中心的所有技術人員，必須按照本文件相關的操作規程進行操作。二、適用范圍適用于疾控中心所有技術人員 。三、程序（一）生物安全要求實驗室生物安全級別：BSL-1所有操作必須在BSL-1實驗室的生物安全柜里進行。（二）材料1. 生長成片的MDCK
MDCK（NBL2）細胞，正常，狗腎細胞
MDCK(NBL-2)細胞，正常，狗腎細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。2.如果細胞發生微生物污染時，應如何處理？直接
WAVETM－生物反應器中的－Cytodex?－微載體細胞培養工藝（二）
用于MDCK和 Vero細胞的生物反應器? WAVE? Bioreactor 系統由一個帶有一次性塑料細胞培養袋的搖動平臺組成，配備CO2 氣體混合器 (CO2MIX20) 或WAVEPOD?控制塔用于控制pH、溫度、氧氣和混合。MDCK細胞在Cellbag-10 L和Cellbag-50?
WAVETM－生物反應器中的－Cytodex?－微載體細胞培養工藝（一）
摘要 ??? WAVE? Bioreactor 系統多用于懸浮細胞的培養。然而，用于細胞治療和疫苗生產的多種細胞為貼壁依賴型的，需要一個可貼附的生長表面。在本研究中，Cytodex 微載體被應用在 CellbagTM 生物反應器中以擴增 Madine-Darby Canine Kidney
動物病毒毒力測定
實驗方法原理 溶細胞性病毒的毒力與其致細胞病變的能力直接相關，固可用不同含量的病毒液接種敏感的宿主細胞培養物測定毒力。實驗中病毒的毒力以其致細胞病變效應（cytopathic effect CPE）的程度確定，即觀察病毒致細胞病變的最高和最低量，以半數細胞病變為病毒感染劑量。然而，實驗中所能
WAVETM－生物反應器中的－Cytodex?－微載體細胞培養工藝（五）
MDCK細胞的生長和放大（2% FBS）???? 為了研究在 Cellbag 生物反應器中 MDCK細胞擴增的可放大性，在兩種不同大小的袋子之間比較最大細胞密度和細胞生長速率 Cellbag-10 L和 Cellbag-50 L。 袋子的工作培養體積采用最大工作體積的40%（即Cellbag-1
動物病毒毒力測定實驗——TCID50－的測定方法
病毒感染能力測定是評估其毒力的常用方法之一，通常采用測定實驗動物的半數致死量（50％ lethel dose，LD50）和測定細胞培養物的半數組織（細胞）培養物感染量（50％ tissue culture infectious dose，TCID50）來評估病毒的感染能力（毒力）。用細胞培養物測定病
生物工程中的無血清細胞培養
無血清培養基的出現是培養基發展歷程上的一個里程碑，其一般是在合成培養基的基礎上，引入成分完全明確的或部分明確的血清替代成分，使培養基能滿足動物細胞培養的要求，又可有效的克服因使用血清所引發的問題。進入20世紀80年代后，新的無血清培養基不斷問世，人們經過研究發現，只要在培養基中增加某些適于細胞生長的
WAVETM－生物反應器中的－Cytodex?－微載體細胞培養工藝（四）
微載體用量為3 g/l的 Cytodex3，接種細胞密度為0.3×106細胞/ml。培養條件為37℃，pH 7.3，5% CO2，采用光纖溶氧電極監測溶氧水平。培養基含有 2%? FBS。每小時取樣并用結晶紫染色測定總細胞密度，上清中的懸浮細胞和死細胞用臺盼藍染色。MDCK細胞在接種后1 h
培養流行性感冒病毒的特性
常用雞胚接種培養，初次分離接種羊膜腔為最佳，傳代適應后可移種尿囊腔。細胞培養一般用原代猴腎細胞（PMK）或犬腎傳代細胞（MDCK）。利用紅細胞凝集試驗確定病毒的存在。
關于Vero細胞的基本信息介紹
非洲綠猴腎細胞(Vero細胞）是非洲綠猴腎細胞，是一種異倍體細胞，經獼猴腎細胞培養衍化后產生的，和著名的Hela細胞系、犬腎細胞(MDCK細胞)一樣是常用的細胞系。
流感病毒實驗室檢查技術
一、標本的采集與處理（一）標本的采集1、病毒分離標本的采集病毒分離成功與否很大程度上取決于采集標本的質量，及其保存、運輸等環節。多數標本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物，有時也采用肺活檢材料等。標本采集后應立即放入適當的采樣液中低溫保存，常用的采樣液為：普通肉湯，pH7.4-7.6的
兩款重磅大單品疫苗獲臨床批件－戈美疫苗搶占創新高點
艾美疫苗作為國產疫苗身體力行的創新先行者，在密集申報大年的歲尾，再傳捷報。據公司12月19日公告，公司的兩個大單品疫苗新技術路線懸浮培養MDCK細胞流感疫苗、第二代高效價吸附破傷風疫苗，均已獲得國家藥品監督管理局《藥物臨床試驗批準通知書》。這兩款產品，均具有創新技術優勢，彰顯了艾美疫苗領跑創新疫
WAVETM－生物反應器中的－Cytodex?－微載體細胞培養工藝（三）
結果和討論 ??? 微載體培養的最佳工作體積和混合速度的確定當我們使用 20%到 80%的Cellbag最大工作體積時，微載體培養可以產生均勻的微載體混合分布（圖 2）。圖 2. 微載體培養的最佳工作體積???? 在工作體積小于 20%的 Cellbag 最大工作體積時，部分微載體有可能粘在 Cel
細胞培養知識（二）
4. 配制培養基之生長測試 4.1. 材料： 4.1.1. MDCK cell (ATCC CCL-34 或CCRC 60004) 4.1.2. 6-well TC plate (or 35 mm TC dish) 4.1.3. methanol 4.1.4. glacial acetic acid
細胞培養實驗——懸浮細胞培養
實驗材料凍存 HeLa S3 細胞試劑、試劑盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶／EDTA儀器、耗材旋轉瓶完全培養基-525 cm2 組織培養瓶C02 培養箱Sorvall H-6000A 轉子100 ml 或 200 ml 通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗步驟1. 將含有凍存 HeLa S3 細胞的安
無血清細胞培養基是怎么出現的？
無血清細胞培養基，顧名思義，就是培養基中沒有添加血清，在使用時也不需要添加血清或血清替代物就可直接用于細胞培養的培養基。有人說，DMEM、MEM、DMEM/F12、1640、，難道不是無血清培養基嗎？它們里面也沒有添加血清啊？這就有點抬杠了。盡管它們沒有添加血清，但它們不加血清細胞也不長啊！那無血清
細胞培養實驗——貼壁細胞培養
實驗材料凍存細胞試劑、試劑盒70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起始培養基的 25 cm
細胞培養技術的細胞培養方式
高等生物是由多細胞構成的整體，在整體條件下要研究單個細胞或某一群細胞在體內（in vivo）的功能活動是十分困難的。但是如果把活細胞拿到體外（in vitro）培養進行觀察和研究，則要方便得多。活細胞離體后要在一定的生理條件下才能存活和進行生理活動，特別是高等動植物細胞要求的生存條件極其嚴格，稍有不
動物細胞培養——細胞培養介紹
實驗方法原理目的細胞培養的評判性檢查。應用檢查常規維持的一致性；在復蘇、傳代、凍存前培養狀況的評估；對新的或實驗性情形反應的評估；確認明顯的污染物。訓練目標熟悉不同類型和不同密度的細胞培養的外觀；數碼或膠片相機的使用；滅菌物品和污染物間的區別，健康的和不健康的培養物間的區別；培養物生長階段的評估。監
細胞營養產品在制備無血清/低血清培養基中的應用
基礎培養基?+?超濾植物源營養物?=?個性化低成本無血清/低血清培養基??如此簡單高效！CHO細胞專用復合添加物Sheff-CHO系列專為CHO細胞優化研發；全球獨家非動物源復合添加物系統；獨家超濾系統過濾；有添加微量元素、無蛋白等多種產品，滿足不同工藝需求；全面改善細胞表現，增強細胞活力，提高蛋白
細胞培養
細胞培養是一種常用的實驗室技術，其中原核或真核細胞在受控條件下生長。大規模哺乳動物細胞培養被廣泛用于生物技術中，特別是用于生產疫苗，蛋白質，酶，抗體和激素。細胞培養還用于許多研究**域，特別是在制藥**域，其中將細胞用作研究許多疾病（例如癌癥或心臟病）的模型。細胞用于靶標鑒定和驗證，基于細胞的測定法
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步，是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
巨噬細胞培養常用細胞培養器皿介紹
常用細胞培養器皿有培養瓶、培養板、培養皿等。常準備量是使用量的三倍。器皿應選擇透明度好，無毒，利于細胞粘附和生長的材料，常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面幾種。巨噬細胞1、液體儲存瓶：用于儲存各種配制好的培養液、血清等液體，常用規格有500ml、250ml、100ml等幾
細胞培養細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中，加入10ml預熱的DMEM完全培養基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗，棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基，輕輕吹打，接種于10cm盤中，在含5
細胞培養基本技術概述（二）
培養基 ?1. 液體培養基貯存于4 oC 冰箱，避免光照，實驗進行前放在37 oC 水槽中溫熱。 2. 液體培養基(加血清) 存放期為六個月，期間glutamine 可能會分解，若細胞生長不佳，可以再添加適量glutamine。 ?3. 粉末培養基配制(以1 升為例)： ?3.1. 細胞培
骨骼肌細胞培養和肌細胞培養
骨骼肌細胞培養 1．殺死動物，無菌取大腿肌組織，切成0.3～0.5厘米小塊。 2．用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25％胰蛋白酶消化，無菌紗網或紗布濾過，合成培養基加10％小牛血清培養，為促進分化可加1％的胎汁。 3．細胞接種量為2×106/皿，接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化
細胞培養細胞培養的一般過程
一、準備工作準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，準備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試，具體內容可參閱有關文獻。二、取材在無菌
特殊細胞培養實驗_球體細胞培養實驗
實驗方法原理大多數培養細胞都具有貼附在底物上生長成單層細胞的性質，如細胞長成片之后，讓細胞片與底物脫離，更換到使細胞不易貼附的底物上繼續生長時，則細胞片能卷聚成球體形，成為球體培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?瓊脂鋪底的培養瓶30 ml無菌培養瓶，每