MDCK細胞培養
本人具有數年的細胞培養經驗，期間經歷了無數次的失敗和成功，回想起來有苦也有甜，現在把中國疾病預防控制中心和我自己的經驗結合起來，制作成MDCK細胞培養SOP，歡迎大家參閱：一、目的MDCK細胞培養是分離流感病毒及相關研究實驗的基本技術。疾控中心的所有技術人員，必須按照本文件相關的操作規程進行操作。二、適用范圍適用于疾控中心所有技術人員 。三、程序（一）生物安全要求實驗室生物安全級別：BSL-1所有操作必須在BSL-1實驗室的生物安全柜里進行。（二）材料1. 生長成片的MDCK細胞2. 無菌的T25細胞培養瓶3. D-MEM培養液（含有L-谷氨酰胺）4. 青、鏈霉素母液（10000 U/mL青霉素G；10000μg/mL硫酸鏈霉素），分裝后保存于-20℃5. HEPES緩沖液，1M母液6. 胎牛血清7. EDTA-胰酶（0.05%胰酶，0.53mM EDTA-4Na），分裝后保存于-20℃8. 7.5%牛血清白蛋白組分V......閱讀全文
大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術
大鼠肝星狀細胞原代培養可以：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM
特殊細胞培養實驗_球體細胞培養實驗
實驗方法原理大多數培養細胞都具有貼附在底物上生長成單層細胞的性質，如細胞長成片之后，讓細胞片與底物脫離，更換到使細胞不易貼附的底物上繼續生長時，則細胞片能卷聚成球體形，成為球體培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?瓊脂鋪底的培養瓶30 ml無菌培養瓶，每
細胞培養板如何選？考慮哪些因素？
1. 孔的數量?大多數用戶在組織培養瓶上開始組織培養。不過，許多應用也需要多孔板。理想的數量嘛，取決于你所需的通量水平，以及是否有機器人的協助。完全手動地向96孔板中添加試劑，這并非不可行，但有電動移液器或機器人的幫助當然更好。擴展到384孔板，就更加需要機器人，而1536孔板更是需要。當然，高密度
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
細胞培養方法
一、準備工作 準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試，具體內容可參閱有關文獻。 二、取材
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞
LSCM細胞培養
細胞培養上述生化介導的質粒轉染方法是瞬時導入。這種方法使細胞能暫時但高水平表達目的蛋白。一般在轉染后?1 ~ 4d?內可獲得大量的表達蛋白。此外還有物理方法(電轉方法和顯微注射)和病毒介導的方法。當細胞用常規方法很難轉染(如原代細胞)，或轉染試劑的毒性較大，這時可使用顯微注射?(microinjec
細胞培養FAQ
1 冷凍管應如何解凍？?取出冷凍管后， 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？?除少數特別
細胞培養方法
一、準備工作? 準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試，具體內容可參閱有關文獻。?二、取
細胞培養實驗
實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞試劑、試劑盒 70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟 1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起
細胞培養資料
第一章 細胞培養的基本原理與技術現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術，而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系，特別是在醫藥領域的發展，細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以
巨噬細胞培養
巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得，便于培養，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2－3周，多用做原代培養，難以長期生存。巨噬細胞也建有無限細胞系，大多來自小鼠，如P331、S774A.1、RAW309Cr.l等，均獲
細胞培養方法
細胞培養方法：1.玻璃吸管和玻璃培養瓶的消毒:高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;2.無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養板照射3小時以上;3.培養基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養基內,用無菌的玻璃離心管或玻
腫瘤細胞培養
食管癌細胞株表達MMP－2：1.細胞種類：食管癌細胞株；2.培養的天數：2d;細胞倍增時間--24h左右；3.放大倍速：倒置熒光顯微鏡，100倍；4.培養基種類：1640+10%胎牛血清；5.細胞狀態與特征簡述:細胞貼壁生長；6.圖片目的：鑒定食管癌細胞表達MMP-2，胞漿中綠色熒光為MMP-2，細
細胞培養方法
1、收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。2、收到細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。因路途耽擱等因素，細胞會有部分脫落。請在超凈臺中將培養瓶里的培養基吸出一部分，保留大約5-6ml左右在培養瓶里。將培養瓶置于37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以
細胞培養用途
? 基礎細胞培養基通常指基礎合成培養基，主要成分為氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽、輔助物質。據不同細胞和研究目的，選用合適培養基,還可補加新成分。如雜交瘤中常用DMEM加丙酮酸鈉、2-巰基以醇（相當于胎牛血清可透析組分的作用）。細胞培養的用途包括：1、科學研究：藥物研究開發與基礎研究藥物研究與開
膠質細胞培養
取材及膠質細胞的混合培養1、P2 SD大鼠經低溫麻醉后以碘酒和75％乙醇消毒，無菌操作下，斷頭放入預冷的D-Hanks液中，在解剖顯微鏡下取大腦皮層并除去腦膜。2、剪碎組織成1mm3大小，加入胰酶-EDTA消化液并放入37℃孵箱內消化20min，中間搖晃一次。3、隨后用滴管吸出組織轉移到裝有預冷的M
細胞培養技術
實驗概要細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境，在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下，使期生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物為單個細胞或細胞群。主要設備細胞培養設施和基本條件 1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染
細胞培養技巧
細胞復蘇? ? ? ? 細胞復蘇和凍存講究“慢凍快溶”，復蘇時一定要將凍存在液氮或-80℃中凝固的細胞凍存液快速融化至37℃，使胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶，對細胞造成損害。復蘇準備●打開水浴鍋加熱至37℃。● 超凈臺上放好離心管（一般15ml的），細胞培養瓶，移液
細胞培養用水
在組織或細胞培養過程的許多步驟中都使用水。它是緩沖液和介質的主要成分，用于溶解添加劑和藥物，以及沖洗生物反應器，塑料制品和玻璃制品。因此，水質可能在細胞培養實驗結果中起重要作用。細菌，酵母或霉菌對細胞培養物的污染一直是一個令人擔憂的問題，科學家竭盡全力避免它們。這些污染通常是肉眼或通過光學顯微鏡可見
羊水細胞培養
羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞，可在體外培養用以分析胎兒染色體核型。目前國內外大都采用腹腔羊膜穿刺術，妊娠12-30周的羊水細胞均可培養成功。羊膜腔穿刺取羊水行染色體分析，最佳孕周為16周左右。因此時羊水增長快，羊水中細胞較多，細胞培養易于生長，而且不易損傷胎兒。國內多數選擇的穿刺時間在妊娠的第16-
HUVEC細胞培養
1、實驗室設計細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養工作包括：工作液配制、無菌操作(采樣)、溫育、無菌處理，細胞和用品貯存等。細胞培養室的設計實
腫瘤細胞培養
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置，首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。一、組織培養腫瘤細胞生物學特性腫瘤細胞與體內正
細胞培養的概念及細胞培養的技術特點
細胞培養（cell culture）是指在體外模擬體內環境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養都是一個必不可少的
特殊細胞培養實驗_微載體細胞培養法
實驗方法原理微載體細胞培養開始于60年代末期，最早使用離子交換凝膠作為載體，輕微攪動即可懸液在培養基中，因而可增加細胞附著的面積，達到大量培養細胞的目的。后來，根據細胞附著生長的特點，對微載體進行了改良，使其帶有電荷或其它介質，更利于細胞附著和生長。這一方法亦可用于常規量的培養，也可用于大規模的培養
如何選擇合適的細胞培養板？
細胞培養的規模可大可小，你既可以使用生物反應器，也可以使用培養瓶或多孔板。如今，利用多孔板的細胞培養模式正倍受青睞，因為這有助于研究多個動態變量，減少實驗時間，并節約昂貴的試劑。除了標準的高通量微孔板，還有一些特殊的微孔板被開發出來，助力3D和器官型細胞培養。市場上的細胞培養板可不少，如何選擇合適的
細胞培養之如何將細胞培養的更漂亮？
細胞培養之如何將細胞培養的更漂亮？ 1、收到細胞，先要鏡檢：觀察細胞形態是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸的時間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養基的瓶子里生長的狀態和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如2
細胞培養基本概念和細胞培養的環境
一、細胞培養基本概念細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境，在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下，使期生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。 細胞培養 的培養物為單個細胞或細胞群。在醫學遺傳學研究中應用最廣泛的是外周血淋巴細胞、皮膚或纖維細胞和各種能在體外長期生長的細胞系。外周血淋
細胞培養之如何將細胞培養的更漂亮？
細胞培養之如何將細胞培養的更漂亮？ 1、收到細胞，先要鏡檢：觀察細胞形態是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸的時間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養基的瓶子里生長的狀態和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢
細胞培養細胞培養的操作步驟及注意事項
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中，加入10ml預熱的DMEM完全培養基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗，棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基，輕輕吹打，接種于10cm盤中，在含5