小鼠胞內細胞因子檢測刺激方案
小鼠細胞因子細胞來源活化-極化培養培養時間再次刺激胞內阻斷劑GM-CSFmouse spleenConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/mL immobilized) + anti-CD28 (2ug/mL soluble) 5hrBrefeldin AIFN-gammamouse spleenConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/mL immobilized) + anti-CD28 (2ug/mL soluble) 5hrBrefeldin AIL-1 alphamouse PECmIFNγ (100ng/mL) (2hr)/LPS (100ng/mL)(22hr)2hr/22hr-Brefeldin AIL-1 ......閱讀全文
小鼠胞內細胞因子檢測刺激方案
小鼠細胞因子細胞來源活化-極化培養培養時間再次刺激胞內阻斷劑GM-CSFmouse spleenConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/mL immobilized) + anti-CD28 (
人胞內細胞因子檢測刺激方案
人細胞因子細胞來源活化-極化培養培養時間再次刺激胞內阻斷劑G-CSFPBMCLPS (1 ug/mL)24hr-MonensinGM-CSFPBMCPMA (30-50ng/mL)/Iono (1ug/mL)5hr-MonensinGIFN gammaPBMCPMA (30-50ng/mL)/Ion
細胞內細胞因子的檢測
實驗步驟展開
細胞內細胞因子的檢測
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? 展開
細胞內細胞因子的檢測
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? 展開
亮點推薦細胞代謝胞內氧檢測技術
細胞內氧含量水平對細胞的生理狀態，信號傳導以及細胞對藥物處理的應激反應有顯著的影響。由于技術原因，之前的研究更多集中在，通過檢測細胞胞外氧含量變化情況，進而間接評估細胞代謝速率的差異以及相應的胞內氧含量相對水平。然而，影響胞內氧含量的因素不僅包括細胞代謝速率差異，同時也包括細胞組織類型，環境氧濃度，
酶分子的胞內高效遞送、催化和檢測
Nature Communications:高內涵助力納米材料新劑型研究--酶分子的胞內高效遞送、催化和檢測近日，中國科學院過程工程所(IPE)生化工程國家重點實驗室生物劑型與生物材料課題組與清華大學(THU)及天津大學(TJU)合作，基于無定形金屬有機框架開發出一種新劑型，可實現酶分子的細胞內高效
流式檢測胞內抗原時打孔液的配方
打孔液有很多種，方法也有很多。與你的實驗方法相關。我用過酒精固定或Triton X-100（我做的都是培養的細胞）：（1）70%的酒精固定24小時即可，不再需要再打孔。如在PI染色測細胞周期或凋亡。（2）Triton X-100是比較強烈的穿孔劑。0.1% Triton X-100/PBS（再加0.
什么是胞內運輸？
胞內運輸(intracellular transport)是真核生物細胞內膜結合細胞器與細胞內環境進行的物質交換。包括細胞核、線粒體、葉綠體、溶酶體、過氧化物酶體、高爾基體和內質網等與細胞內的物質交換。
流式胞內染色protocol
一、surface marker染色1、收獲細胞，0.5-1x10e6/tube，用FACS Buffer 2ml洗滌一次，傾倒后濾紙吸干管口液體。2、加入預先配置好的你需要染的surface marker的抗體混合液（即CD3，CD4，CD8抗體mixture），充分混勻，室溫下孵育20分鐘。3、
激活的淋巴細胞內細胞因子的檢測
簡介細胞因子是可溶性蛋白，在淋巴細胞應答中有重要的免疫調節作用。細胞因子可以調節細胞生長、分化以及一系列功能，并且介導正常與病理性免疫應答。細胞因子是具有效應及調節雙重作用的獨特蛋白。近來研究顯示，細胞因子可以具有多重功能，作用于多個細胞亞群并可在不同亞群細胞表達。早期細胞因子表達與T細胞功能相關性
流式細胞儀實驗方法1
流式細胞儀實驗方法?一、?實驗準備1．?? 標本制備：2．?? zui小化非特異性結合：?二、凋亡1．凋亡的檢測方法：和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法?三、細胞因子1．激活的細胞因子2．CBA?四、血小板1．活化2．活化檢測3．網織血小板?五、紅細胞1．網織紅細胞2．
流式細胞儀實驗方法
一、?實驗準備1．?? 標本制備：2．?? zui小化非特異性結合：?二、凋亡1．凋亡的檢測方法：網站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法?三、細胞因子1．激活的細胞因子2．CBA?四、血小板1．活化2．活化檢測3．網織血小板?五、紅細胞1．網織紅細胞2．PNH3．胎兒紅
T－細－胞－克－隆－的－建－立
實驗步驟基本方案 1 產生和維持同種反應性 T h 和 CTL 克隆盡管同種反應性 T 細胞可以從未刺激的脾細胞或淋巴結細胞中產生，但如果細胞在初次混合淋巴細胞（M L C ) 中第一次被同種抗原刺激，反應細胞的得率會更高。見以下介紹。材 料同種反應性小鼠脾臟 T 細胞V H B S S (可選使用
T細胞克隆的建立
基本方案 1 產生和維持同種反應性 T h 和 CTL 克隆盡管同種反應性 T 細胞可以從未刺激的脾細胞或淋巴結細胞中產生，但如果細胞在初次混合淋巴細胞（M L C ) 中第一次被同種抗原刺激，反應細胞的得率會更高。見以下介紹。材 料同種反應性小鼠脾臟 T 細胞V H B S S (可選使用）V D
細胞內細胞因子的流式細胞儀檢測
簡介隨著研究的進展，僅僅對細胞進行定量和活性的檢測已不能滿足需要。在單細胞水平研究細胞因子的表達能力對研究細胞因子在疾病中的作用越來越顯的重要無比。目前檢測單個細胞特定細胞因子的表達手段包括：ELIspot、原位雜交、免疫細胞化學、限制性稀釋分析（limiting dilution analysis
細胞內細胞因子的流式細胞儀檢測
簡介?隨著研究的進展，僅僅對細胞進行定量和活性的檢測已不能滿足需要。在單細胞水平研究細胞因子的表達能力對研究細胞因子在疾病中的作用越來越顯的重要無比。目前檢測單個細胞特定細胞因子的表達手段包括：?ELIspot?、原位雜交、免疫細胞化學、限制性稀釋分析（?limiting dilution anal
基本方案5－直接注射重組體病毒載體至小鼠腦內
實驗材料成年鼠重組體病毒懸液儀器、耗材消毒紙巾小鼠腦圖譜手術用具漢密爾頓注射器術后恢復籠實驗步驟1.麻醉成年鼠，準備手術。在頭蓋骨上鉆洞。注射的病毒可以在腦中擴散3~4 mm。2.4 min后用5ul 漢密爾頓注射器緩慢注射 2~4ul 重組體病毒懸液至目標區域。當注射. 元成后，將針頭抬起1 mm
新研究實現酶分子胞內高效遞送、催化和檢測
近日，中國科學院過程工程研究所與清華大學、天津大學合作，基于無定形金屬有機框架開發出一種新劑型，可實現酶分子的細胞內高效遞送和催化，在單細胞水平上實現細胞代謝產物的原位檢測。該工作發表于《自然-通訊》（Nature Communications）。 納微顆粒為生物劑型工程的發展做出了重要貢獻。
細胞內細胞因子染色步驟
1.樣本準備：1） 收集細胞。經刺激和阻斷處理的細胞（具體處理方案請參考文獻進行），加細胞染色Buffer（或含0.1%BSA的PBS）制成單細胞懸液，調整細胞濃度約為1×107/ml。2） 取100μl細胞/管（約1×106細胞），分別加到做好標記的流式管底部。2.固定：1） 如需要表面染色，選用
高水平炎性細胞因子表達檢測解決方案
警惕新冠肺炎下的“細胞因子風暴”，這些整理或許可以幫到你近期在頂級的醫學雜志《柳葉刀》上，我國的研究人員發表了關于新型冠狀病毒（以下簡稱新冠病毒）患者感染的臨床表現、實驗室數據等方面分析的文章“Clinical features of patients infected with 2019 no
流式細胞儀實驗方法（三）
四、所需試劑1、細胞表面染色的熒光標記的單抗試劑依據實驗需要選擇特殊表面標志CD45圈定所有淋巴細胞CD3 圈定T淋巴細胞CD4 圈定T輔助淋巴細胞亞群CD8 圈定T抑制淋巴細胞亞群CD19/或CD20圈定B淋巴細胞CD56圈定NK淋巴細胞CD14圈定單核細胞2、熒光標記的細胞因子抗體：R&D提供F
流式細胞儀實驗方法2
六、流式檢測細胞染色基本過程（以全血為例）1、???收獲細胞：肝素鈉抗凝的靜脈血，按1：1與培養基混勻，加刺激劑，同時加蛋白轉運抑制劑（參照說明書）， 混勻后，37℃，5%二氧化碳培養4-6小時2、???阻斷Fc受體：用于消除非特異性的結合染色①??????在小鼠，可使用純化的FcII/III受體的
peprotech細胞因子注意事項（四）
六、流式檢測細胞染色基本過程（以全血為例）1、收獲細胞肝素鈉抗凝的靜脈血，按1：1與培養基混勻，加刺激劑，同時加蛋白轉運抑制劑（參照說明書）， 混勻后，37℃，5%二氧化碳培養4-6小時2、阻斷Fc受體用于消除非特異性的結合染色① 在小鼠，可使用純化的FcII/III受體的抗體（CD16/32），按
基本方案2－植入基因修正的細胞到新生的小鼠腦內
實驗材料基因修正的細胞新生小鼠試劑、試劑盒乙醇抗菌素外科膠水儀器、耗材漢密爾頓注射器顯微操作儀手術用具幼鼠腦圖譜加熱板實驗步驟1.為移植開始培養基因修正的細胞，收獲 80%~90% 的匯合度的細胞。手術時，當麻醉和準備動物的時候準備好懸浮細胞（支持方案）。手術期間，每 30~60 min 重懸細胞。
基本方案1－在成年小鼠腦內植入遺傳修飾過的細胞
實驗材料遺傳修飾細胞的培養成年宿主小鼠聚烯吡酮磺溶液試劑、試劑盒麻醉劑儀器、耗材小鼠大腦圖片集耳打孔器帶有電極操作的腦定位支架以及漢密爾頓注射夾外科用具bulldog 磁夾海綿中號鑷子傷口夾26G針漢密爾頓注射器實驗步驟1.為移植開始培養基因修正的細胞，收獲 80%~90% 的匯合度的細胞。手術時，
胞內運輸的具體形態
胞內運輸是指細胞內、細胞器間的物質交換。有分子擴散、微絲推動原生質的環流、細胞器膜內外的物質交換，以及囊泡的形成與囊泡內含物的釋放等。如光呼吸途徑中，磷酸乙醇酸、甘氨酸、絲氨酸、甘油酸分別進出葉綠體、過氧化體、線粒體；葉綠體中的丙糖磷酸經Pi轉運器從葉綠體轉移至細胞質，并在細胞質中合成蔗糖進入液泡貯
胞內受體的分化類型介紹
胞內受體又可分為核內受體和胞漿受體，如雄激素、雌激素、孕激素及甲狀腺素受體位于核內，而糖皮質激素受體位于胞漿中。類固醇激素與胞內受體結合后，可使受體的構象發生改變，暴露出DNA結合區。在胞漿中形成的類固醇激素-受體復合物以二聚體形式穿過核孔進入核內。在核內，激素-受體復合物作為轉錄因子與DNA特異基
胞內運輸的轉運方式介紹
營養物質的轉運方式有兩種：1、被動轉運：被動轉運過程主要包括被動擴散、易化擴散、濾過、滲透等作用。 被動擴散：營養物質透過細胞膜，不借助載體，不消耗能量，物質從濃度高的一側向濃度低的側透過稱為被動擴散。 易化擴散：指非脂溶性物質或親水物質如鈉、鉀、葡萄糖和氨基酸等，不能透過細胞膜的雙層脂類，需在細胞
胞內受體的種類和分化
胞內受體又可分為核內受體和胞漿受體，如雄激素、雌激素、孕激素及甲狀腺素受體位于核內，而糖皮質激素受體位于胞漿中。類固醇激素與胞內受體結合后，可使受體的構象發生改變，暴露出DNA結合區。在胞漿中形成的類固醇激素-受體復合物以二聚體形式穿過核孔進入核內。在核內，激素-受體復合物作為轉錄因子與DNA特異基