FusionandCloning
ReagentsMedium A - Pre-fusion Medium and Hybridoma Expansion MediumMedium B - Fusion Medium Medium C - Hybridoma Recovery MediumMedium D - Hybridoma Selection Medium Medium E - Hybridoma Growth Medium PEG SolutionMaterials 50 ml Sterile conical tubes15 ml Sterile conical tubes 10 ml sterile pipets 1 ml sterile pipets Pasteur Pipets, sterile100 mm sterile Petri Dishes 96-well culture dishes24-well culture dishesF......閱讀全文
單克隆抗體的細胞融合(cell－fusion)過程
融合的方法很多，常用的有轉動法和離心法。?融合時脾細胞和骨髓瘤細胞的比例為1:1至10:1不等。3:1或5:1最為常用。?1．試劑與材料?(1) 供融合用的脾細胞及骨髓瘤細胞。?(2) 1640培養液100ml。?(3) 完全1640液100ml。?(4) 2.5％FCS－1640液50ml。?(5
PEG介導的動物細胞融合（cell－fusion）技術
細胞融合（cell fusion）或細胞雜交（cell hybridization）是指真核細胞通過介導和培養，兩個或多個細胞合并成一個雙核或多核細胞的過程。人工的細胞融合開始于20世紀50年代, 60年代到70代作為一門新興的技術, 發展非常快, 應用范圍也極為廣泛, 除了同種類細胞間可以融合,
賽默飛推出新型Orbitrap－Fusion－Lumos－Tribrid質譜儀
分析測試百科網訊 在2017年6月4日-8日舉行的ASMS 2017上，賽默飛世爾發布了新型 Orbitrap Fusion Lumos Tribrid質譜儀。這款新型三重質譜儀擴展其功率，性能和多功能性，可以幫助科學家們更深入地分析樣品。 “當我們兩年前在ASMS推出Orbitrap Fus
GST融合蛋白（GST－fusion－protein－purification）的表達與純化
原理GST 純化系統是利用GST （glutathione-S-transferase ）融合蛋白與固定的谷胱甘肽（GSH）通過硫鍵共價親和，通過GSH交換洗脫的原理來進行純化 。1ml樹脂大約可結合5-8 mg融合蛋白，并可反復使用數次。試劑u IPTG（異丙基硫代-β-D-半乳糖苷） 2
應用Orbitrap－Fusion對TMT標記樣本進行MS2定量方法...（一）
應用Orbitrap Fusion對TMT標記樣本進行MS2定量方法以及SPS MS3定量方法的比較1. 前言目前，蛋白質組學研究已經由傳統的大規模鑒定逐步轉向了靶向蛋白質組學，研究內容已經由蛋白質鑒定擴展到了蛋白質相對和絕對定量，蛋白質相對定量方法中應用最普遍的為標記定量，包括：ICAT，DIAR
應用Orbitrap－Fusion對TMT標記樣本進行MS2定量方法...（二）
3．數據分析3.1 MS2 定量方法原始文件（raw file）使用Proteome Discoverer 1.4 軟件搜索Uniprot_mouse.fasta 數據庫( 數據庫編號10090)，檢索結果通過嚴格標準進行篩選（1% FDR）。?3.1.1 鑒定結果匯總??Distribution
應用Orbitrap－Fusion對TMT標記樣本進行MS2定量方法...（三）
Peptide and Unique Peptide Identified Using SPS MS3 Quantitation Method among 16 Samples??Distribution of Protein Group Identified and Quantified Usin
賽默飛慶祝Orbitrap十周年并推出Fusion－Lumos－Tribrid
分析測試百科網訊 在 ASMS2015，賽默飛就 Orbitrap 推出十周年進行慶祝。 “十年前的 ASMS，賽默飛將 Orbitrap 推向市場，為蛋白質組學提供了新的機遇。”賽默飛色譜和質譜總裁 Dan Sh
升性能、降功耗－A10－Fusion芯片的圖形處理器為何如此神奇？
在上周的 iPhone 7 發布會上，蘋果公司特別介紹了新設備中運行的 A10 Fusion 處理器。根據蘋果公司的介紹，與上一代處理器相比，A10 的 CPU 和 GPU 性能都有了很大的提升。特別是芯片的圖形性能，相比 A9 處理器，A10 Fusion 的圖形性能提升了 5
基因編輯進展梳理－Part－II－基于CRISPRCas9的技術應用篇(二)
5.?優化堿基編輯器實現細胞、類器官和小鼠中的高效編輯2018年7月，Nature biotechnology刊登了一篇新的研究，通過密碼子優化和加入額外的核定位序列，重新設計BE3、BE4Gam和xBE3的序列。優化篩選的組成型和誘導型堿基編輯系統極大地提高了C to T的突變效率，重
DNA克隆
DNA克隆（主要內容如下）·?????????General Procedure·?????????PCR Cloning·?????????Subcloning·?????????ET Cloning·?????????Vector Preparation·?????????Ligation Re
T載體的制作和應用
Also see?DNA Cloning§?????????Making TA Vector?(Crawford Lab)T-vectors are linear-blunt-ended plasmids with a few dT's added on by Taq polymerase.
TOPO?－快速克隆技術介紹
Topo TA克隆方法（Topo TA Cloning Kit）???? Topo TA克隆原理與TA克隆一樣，唯一不同的是TA克隆用的是T4連接酶把PCR片斷連接到T載體上，而Topo TA Cloning用的是DNA Topoisomerase。???? Topoisomerase的用途一般使用
PCR產物克隆
PCR克隆主要有TA克隆法, 限制性酶切與連接法，雜交法和近期開發出來的特異性重組法等。但因為TA克隆法操作最簡單，快速和高效的原因，成為Taq聚合酶PCR產物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen發明，并擁有全球TA Cloning商標的ZL權。TA克隆方法（Original TA Cl
PCR基本實驗方法（五）
Cloning?PCR?ProductsT-A Cloning Strategy:?Taq and other polymerases seem to have a terminal transferase activity which results in the non-templated ad
PCR基本實驗方法（五）
Cloning?PCR ProductsT-A Cloning Strategy:?Taq and other polymerases seem to have a terminal transferase activity which results in the non-templated ad
荀魯盈/谷立川合作團隊在常規DNA克隆技術取得重要進展
DNA組裝作為一種方便快捷高效的DNA克隆手段在已經在生物學領域得到廣泛的應用。各種商業化的組裝試劑盒更是層出不窮。其中，著名的Gibson組裝（NEB）是DNA組裝技術的奠基之作，因其最初被用于人造生命構建而聞名遐邇【1】。Gibson方法功能強大，一開始被用于100Kb大片段組裝。后來由于其
體外熒光法檢測核內體早期動力學
A fluorescence-based?in vitro?assay for investigating early endosome dynamicsSina V Barysch1,2, Reinhard Jahn1?& Silvio O Rizzoli2ABSTRACTEarly endoso
PNAS:－融合基因組學揭示橫紋肌肉瘤細胞起源
基因融合一直被認為是腫瘤獨有的特征。基因融合是指染色體上兩個異位的基因嵌合在一起，由于染色體發生易位、缺失或者倒置造成的，通常在癌癥的發生發展扮演著重要的角色，并且可以作為診斷和治療癌癥的靶標。基因融合現象最早在慢性粒細胞白血病中發現 BCR-ABL基因融合（費城染色體）。除血液系統腫瘤外，在實
分子克隆蛋白表達實驗指南（十一）
SDS-PAGE膠樣品排列：??????? MarkerUII 37CUI’I’??????? Marker：低分子量蛋白marker，上樣10ul??????? UI：未誘導菌液，上樣10ul。任取37C和20C中一個??????? I：誘導后對照，上樣10ul??????? UI’, I’代表G
Gateway克隆技術BP反應構建入門載體與LR反應構建表達載...
Gateway克隆技術-BP反應構建入門載體與LR反應構建表達載體的區別? ? ? ?提到克隆、重組載體，就想到5字金言：分、切、連、轉、篩，“分”是指分離制備合格的待操作的DNA；“切”是指用序列特異的限制性內切酶切開載體DNA，或者切出目的基因；“連”是指用DNA連接酶將目的DNA同載體DN
Multiple－studies－with－a－single－experiment:－The－Power－of－...（三）
Ratio Distortion with Isobaric MultiplexingProblem: Quantitation of low-abundance proteins in a complex background is distorted by co-isolated interfe
Agilent支持Aurora－SFC系統公司開發HPLC/SFC復合系統
2009年3月20日，北京—安捷倫科技公司(NYSE:A)和 Aurora SFC系統公司宣布，安捷倫將為Aurora SFC Fusion A5TM 的開發提供技術支持，這是一種將現有的高效液相色譜(HPLC)系統轉換成超臨界流體色譜(SFC)系統的新型分析儀器。SFC Fusion
新穎的融合蛋白表達系統
?研究者們在分離到某一基因后，要對其編碼蛋白質進行研究最理所當然的工作就是表達——即：有目的性地合成外源基因產物。在重組DNA技術的發展早期，人們認為在基因的前面有一個強啟動子和一個起始密碼子就足以在大腸桿菌中獲得很好的表達。隨后，認識到獲得有效的翻譯所需的條件要復雜得多，除了要有強啟動子和起始密碼
基因工程的基本定義
狹義上僅指基因工程。是指將一種生物體（供體）的基因與載體在體外進行拼接重組，然后轉入另一種生物體（受體）內，使之按照人們的意愿穩定遺傳，表達出新產物或新性狀。重組DNA分子需在受體細胞中復制擴增，故還可將基因工程表征為分子克隆（Molecular Cloning）或基因克隆（Gene Cloning
Blockade－of－Neurotransmitter－Relase－by－Botulinum－Toxin
The neuromuscular junction communicates action potentials from motor neurons across a synapse to skeletal muscle. When an action impulse arrives at th
PRCC基因編碼的功能和結構描述
這個基因編碼一種蛋白質，可能在前mrna剪接中起作用。染色體易位（X；1）（p11；q21）導致該基因與TFE3（基因id 7030）融合，與乳頭狀腎細胞癌有關PRCC-TFE3融合蛋白在癌組織中表達，可能與基因反式激活改變有關這種融合蛋白也與細胞周期的破壞有關。This gene encodes
Purification－of－MBP－(maLTosebinding－proteins)－Fused－Proteins
Express fusion proteins as per the?GST-fused protocol?up to Step 7 (Day 3). All steps in protein purification should be done at 4° C unless otherwise
AntiDYKDDDDK－tag－(L5)－Affinity－Gel
實驗概要Anti-DYKDDDDK ?tag (L5) affinity gel is a purified rat IgG2a, κ monoclonal antibody ?covalently attached to agarose by hydrazide linkage. It is us
重組DNA的分離、克隆與測序實驗手冊3
G. Bacterial cell maintenanceFour strains of?E. coli?are used in these studies: JM101 for M13 infection and isolation (4), XL1BMRF' (Stratagene) f