SDSPAGE常見問題分析
1. 配膠緩沖液系統對電泳的影響？ 在SDS－PAGE不連續電泳中，制膠緩沖液使用的是Tris－HCL緩沖系統，濃縮膠是pH6.7，分離膠pH8.9；而電泳緩沖液使用的Tris－甘氨酸緩沖系統。在濃縮膠中，其pH環境呈弱酸性，因此甘氨酸解離很少，其在電場的作用下，泳動效率低；而CL離子卻很高，兩者之間形成導電性較低的區帶，蛋白分子就介于二者之間泳動。由于導電性與電場強度成反比，這一區帶便形成了較高的電壓剃度，壓著蛋白質分子聚集到一起，濃縮為一狹窄的區帶。當樣品進入分離膠后，由于膠中pH的增加，呈堿性，甘氨酸大量解離，泳動速率增加，直接緊隨氯離子之后，同時由于分離膠孔徑的縮小，在電場的作用下，蛋白分子根據其固有的帶電性和分子大小進行分離。 所以，pH對整個反應體系的影響是至關重要的，實驗中在排除其他因素之后仍不能很好解決問題的情況，應首要考慮該因素。 2. 樣品如何處理？ 根據樣品分離目的不同，主要有三......閱讀全文
SDSPAGE常見問題分析
1. 配膠緩沖液系統對電泳的影響？ 在SDS－PAGE不連續電泳中，制膠緩沖液使用的是Tris－HCL緩沖系統，濃縮膠是pH6.7，分離膠pH8.9；而電泳緩沖液使用的Tris－甘氨酸緩沖系統。在濃縮膠中，其pH環境呈弱酸性，因此甘氨酸解離很少，其在電場的作用下，泳動效率低；而CL離子卻很
SDS－PAGE電泳色譜儀常見問題分析
SDS－PAGE電泳色譜儀常見問題分析：一、微笑形區帶（兩邊翹起，中間凹下）：?形成原因：主要是由凝膠中間部分凝固不均勻引起的，多出現于較厚的凝膠中。處理辦法：待其充分凝固再做實驗。二、皺眉形區帶（兩邊向下，中間鼓起）：形成原因：主要出現在蛋白質垂直電泳槽中，一般是由兩板之間的底部間隙氣泡未排除干凈
SDSPAGE蛋白質電泳常見問題分析
Q：SDS-PAGE電泳的基本原理? A：SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，是在聚丙烯酰胺凝膠系統中引進SDS(十二烷基硫酸鈉)，SDS會與變性的多肽，并使蛋白帶負電荷，由于多肽結合SDS的量幾乎總是與多肽的分子量成正比而與其序列無關，因此SDS多肽復合物在丙稀酰胺凝膠電泳中的遷移率只與多肽的大小有
SDSPAGE電泳常見問題及解決方案
SDS-PAGE電泳常見問題及解決方案問題原因解決方案①出現“微笑”形帶（兩邊翹起中間凹下）由于凝膠的中間部分凝固不均勻所致，多出現于較厚的凝膠中待其充分凝固再作后續實驗②出現“皺眉”形帶（兩邊向下中間鼓起）主要出現在蛋白質垂直電泳槽中，一般是兩板之間的底部間隙氣泡未排除干凈可在兩板間加入適量緩沖液
SDSPAGE電泳常見問題及解決方案
SDS-PAGE電泳常見問題及解決方案問題原因解決方案①出現“微笑”形帶（兩邊翹起中間凹下）由于凝膠的中間部分凝固不均勻所致，多出現于較厚的凝膠中待其充分凝固再作后續實驗②出現“皺眉”形帶（兩邊向下中間鼓起）主要出現在蛋白質垂直電泳槽中，一般是兩板之間的底部間隙氣泡未排除干凈可在兩板間加入適量緩沖液
SDSPAGE電泳常見問題及解決方案
SDS-PAGE電泳常見問題及解決方案問題原因解決方案①出現“微笑”形帶（兩邊翹起中間凹下）由于凝膠的中間部分凝固不均勻所致，多出現于較厚的凝膠中待其充分凝固再作后續實驗②出現“皺眉”形帶（兩邊向下中間鼓起）主要出現在蛋白質垂直電泳槽中，一般是兩板之間的底部間隙氣泡未排除干凈可在兩板間加入適量緩沖液
SDSPAGE凝膠電泳常見問題及其解決方案
SDS-PAGE凝膠電泳常見問題及其解決方案
SDS－PAGE電泳過程的常見問題及解決方法
幾乎所有蛋白質電泳分析都在聚丙烯酰胺凝膠上進行，而所有條件總要確保蛋白質解離成單個多肽亞基并進可能減少其相互間的聚集，最常用的就是SDS-PAGE電泳技術，關于大家在此過程中經常遇到的問題進行一些討論： Q：SDS-PAGE電泳的基本原理? A：SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，是在聚丙烯酰胺凝膠
sdspage蛋白條帶怎么分析
bandscan比較專業哦，可以用的。1.因為其他地方也有一定的灰度，所以條帶所在區域灰度之和會小于100%。歸一化嘛，就是把這四個值乘以一個系數，使它們之和等于100%就是了。2.這四個條帶是斜的，分析起來很麻煩，要作較正的。普通的分析軟件不知有沒有這個校正功能。即使有，作起來也麻煩。
sdspage蛋白條帶怎么分析
bandscan比較專業哦，可以用的。1.因為其他地方也有一定的灰度，所以條帶所在區域灰度之和會小于100%。歸一化嘛，就是把這四個值乘以一個系數，使它們之和等于100%就是了。2.這四個條帶是斜的，分析起來很麻煩，要作較正的。普通的分析軟件不知有沒有這個校正功能。即使有，作起來也麻煩。
怎樣分析蛋白質sdspage電泳圖
根據你目的蛋白大小，比對蛋白marker，吻合或者附近則可以判定蛋白大小正確，至于活性或者特定蛋白還需要其他鑒定方法。
水質分析常見問題
15、測總磷，洗衣液稀釋100倍，加熱后水樣變黃色，對測量結果有沒有影響?答：消解后如果水樣沒有顏色，則不干擾實驗結果。水中有顏色的物質會在消解時被消解成無色的，不影響測量結果。16、連華5B-3F水質測定儀如何恢復出廠設置?答：儀器在關閉的狀態，一手按住“校正”鍵，一手打開開關，待屏幕上顯示“99
水質分析常見問題
24、測定cod用密封管消解行不行?答：可以的，但是建議使用敞口管消解。密封消解時如果密封蓋沒有擰緊，在顛倒搖勻的時候，可能會讓溶液灑出，導致測值結果不準，甚至可能會造成人身傷害;部分水樣在消解時會釋放大量的氣體，此種水樣不可密封消解，如水里的次氯酸根太高，消解時會釋放出大量氯氣，密封消解會導致消解
水質分析常見問題
26、配總磷過硫酸鉀，由于不好溶，加塞子水浴加熱到了10秒左右，塞子不是很緊，過硫酸鉀還能使用嗎?答：如果進水不建議使用，可以做標準溶液試一試。過硫酸鉀不好溶可以多攪拌或超聲，不建議加熱，控制不好溫度過高后會導致過硫酸鉀失效。另過硫酸鉀最佳保存溫度25-30℃，冷藏容易結晶。27、用3B做甲醛之前做
水質分析常見問題
水質分析常見問題水質分析又稱水化學分析。即用化學和物理方法測定水中各種化學成分的含量。水質分析過程中常見的問題有哪些呢？01、BOD緩沖劑液化了還能用嗎?答：BOD緩沖劑時間稍長后會出現液化的現象，這是正常情況，不影響使用。02、我們測氨氮，是以氮元素計還是以銨根離子計?答:氨氮是指水中以游離氨和銨
水質分析常見問題
11、請問定量器為什么吸不起來?答：定量器內有兩個玻璃柱，吸液時彎頭附近玻璃柱會將底部封死，溶液會吸上來;排液時下面玻璃柱會將底部封死讓溶液從彎頭排出。兩個玻璃柱相當于兩個單向閥。新定量器使用時吸不上來就是彎頭附近玻璃柱底部沒完全密封，可用手指輕彈幾下或用洗耳球將溶液吸到彎頭玻璃柱處就可以了。12、
水質分析常見問題
13、請問做氨氮實驗時，為什么加入N3試劑出現大量白色渾濁，加入N2試劑后下層紅色上層青色不斷有小氣泡上升?答：鈣鎂離子高，應做絮凝沉淀預處理。水樣帶色或渾濁以及含其他一些干擾物質，影響氨氮的測定。因此，在分析時需做適當的處理。對較清潔的水，可采用絮凝沉淀發;對污染嚴重的水或工業廢水，則用蒸餾法消除
水質分析常見問題
08、請問BOD營養鹽有黃色不溶物正常嗎?答：正常，營養鹽配好是淡黃色不完全溶解的溶液，用前需搖勻。09、請問N2試劑前一天配出來沒什么問題，為什么放一天后變棕黃色變渾?答：N2試劑配好后應轉移到聚乙烯瓶中密封、避光、低溫儲存。如果放到礦泉水瓶內，時間稍長會出現變質。如果未密封保存，空氣中的有機氣體
水質分析常見問題
24、測定cod用密封管消解行不行?答：可以的，但是建議使用敞口管消解。密封消解時如果密封蓋沒有擰緊，在顛倒搖勻的時候，可能會讓溶液灑出，導致測值結果不準，甚至可能會造成人身傷害;部分水樣在消解時會釋放大量的氣體，此種水樣不可密封消解，如水里的次氯酸根太高，消解時會釋放出大量氯氣，密封消解會導致消解
水質分析常見問題
05、做總磷實驗時，過硫酸鉀結晶了，影響檢測結果嗎，該怎么解決?答：過硫酸鉀配制時較難溶解，使用超聲波幫助其溶解。如果沒有超聲波，尤其是冬季室溫較低，可以加熱使其溶解(溫度不能超過60℃，否則過硫酸鉀會分解)，放冷后會有析出，因為溶液為過飽和，再加熱溶解是可以使用的，不影響總磷的測定。06、請問在做
芯片常見問題分析
1 芯片實驗和定量PCR的優劣比較? 基因表達譜芯片實驗可以對大量基因一次性進行定量研究,定量PCR則對大量基因需逐一進行定量研究。 2 在芯片制作過程中的PCR原液是否可以為客戶保存? 可以抽干冷凍保存一年。 3 可否用DNA和芯片雜交? 不可以，因為芯片上的樣品是cDNA而真核基因D
水質分析常見問題
19、含氯酸鈉廢水COD如何檢測?答：含氯酸鈉廢水的COD檢測水樣的原水COD很高，用戶使用了氯酸鈉來處理，氯酸鈉具有氧化性，能降低COD，但這種廢水，使用正常方法無法檢測，經過查找資料及連華技術人員的建議，我們進行了方法測試，找到解決方案。1)取2.5ml水樣，加入4.8ml的E試劑，注意速度不要
水質分析常見問題
21、BOD緩沖劑液化還能用嗎?答：BOD緩沖劑時間稍長后會出現液化的現象，這是正常情況，不影響使用。22、儀器測總氮時空白和標液正常，測水樣顯示(9999)什么原因?答：儀器測標樣沒問題，儀器一般不會有問題，可能是水樣濃度太高需要稀釋，總氮直測范圍0.05-10mg/L，275nm波長下的吸光度盡
eds分析常見問題
Q1:能譜的縮寫是EDS還是EDX？ 開始的時候能譜的縮寫有很多，比如EDS，EDX，EDAX等。ED就是Energy Dispersive，后面因為X-ray Analysis和Spectrum這幾個詞的不同用法，導致了縮寫的不同。而且相應的漢譯也有很多，比如能量色散譜，能量散射譜等等。不過
SDSPAGE常用參數
聚丙烯酰胺的特性，包括機械性能，彈性，透明度，孔徑大小取決于T，C，T是兩個單體(單體丙烯酰胺和N-N’-甲叉雙丙烯酰胺)的總百分濃度，C 是與總濃度有關的交聯百分比濃度。T=(a+b)/mC=b/(a+b)（a為單體丙烯酰胺的克數，b為N-N’-甲叉雙丙烯酰胺的克數，m為緩沖液終體積）a，b的比例
SDSPAGE膠制備
一. 實驗原理： SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子量不同來進行分離的。 SDS是一種去垢劑，可與蛋白質的疏水部分相結合，破壞其折疊結構，并使其廣泛存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS蛋白質復合物的長度與其分子量成正比。在樣
測序常見問題及其分析
1、PCR 產物測序時出現重疊峰 問題圖1（模板中有堿基缺失，往往是單一位點（1-1）或兩個位點（1-2）堿基缺失導致測序 結果移碼） 解決方法：將PCR 產物克隆到質粒（如T 載體）中挑單克隆測序，或將PCR 產物進行PAGE 純化（至少瓊脂糖充分電泳后切膠純化）后再進
測序常見問題及其分析
1、PCR 產物測序時出現重疊峰 問題圖1（模板中有堿基缺失，往往是單一位點（1-1）或兩個位點（1-2）堿基缺失導致測序 結果移碼） 解決方法：將PCR 產物克隆到質粒（如T 載體）中挑單克隆測序，或將PCR 產物進行PAGE 純化（至少瓊脂糖充分電泳后切膠純化）后再進
QPCR常見問題及其分析
一般來講，進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高，所以每個樣品至少要做3個平行孔，以防在后面的數據分析中，由于Ct相差較多或者SD太大，無法進行統計分析。通常來講，反應體系的引物終濃
PH計常見問題分析
常見問題及解決方案1.同一樣品，兩次測量的 pH值不一樣？溫度變化或樣品本身發生了化學反應，都會引起 pH值的變化。所以，應盡量保持溫度一致，并且避免化學反應。2.同一樣品，同時在兩臺 pH計上測量，讀數不一致？由于兩臺 pH計的校正條件不一樣（如，不同時間做的校正），造成測量值有差異。所以要用同一