非洲粟酒裂殖酵母的轉化實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 腺嘌呤亮氨酸LiAc儀器、耗材 YEA 平板實驗步驟 1. 在 YEA 平板上培養細胞直到長成可見單菌落。2. 接種單菌落到添加有 150 mg/L 腺嘌呤、亮氨酸和/或尿嘧啶等營養缺陷互補物的 YEA 或 PM 培養基中,于允許溫度以 200 r/min 振蕩培養防止酵母菌沉積,使細胞滴度達到每毫升 5X106 到 1X107 個細胞。3. 1000~2000 g 離心 5 分鐘,用滅菌蒸餾水洗一遍。4. 用過濾除菌的 0.1 mol/L CH3COOLi,pH 4.9 洗一遍。5. 重懸于 0.1 mol/L 的 LiAc 使細胞滴度為每毫升 109 個細胞,取 100 μl 等份轉移到微量離心管中,在允許溫度孵育 60 分鐘。6. 加 1 μg 溶于 15 μl TE 中的質粒 DNA,輕輕旋轉混勻,于允許溫度孵育 60 分鐘。7. 加 290 μl 預熱到允許溫度的 50% PEG3350,輕......閱讀全文
非洲粟酒裂殖酵母的轉化實驗
非洲粟酒裂殖酵母的LiAc轉化法 非洲粟酒裂殖酵母的電穿孔轉化法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
非洲粟酒裂殖酵母的轉化實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 腺嘌呤亮氨酸LiAc儀器、耗材 YEA 平板實驗步驟 1. 在 YEA 平板上培養細胞直到長成可見單菌落。2. 接種單菌落到添加有 150 mg/L 腺嘌呤、亮氨酸和/或尿嘧啶等營養缺陷互補物的 YEA 或 PM 培養基中,于允許溫度以 200 r/min 振蕩培養防止酵
非洲粟酒裂殖酵母的轉化實驗
非洲粟酒裂殖酵母的LiAc轉化法非洲粟酒裂殖酵母的電穿孔轉化法實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒腺嘌呤 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
非洲粟酒裂殖酵母的轉化實驗_LiAc轉化法
實驗材料細胞試劑、試劑盒腺嘌呤亮氨酸LiAc儀器、耗材YEA 平板實驗步驟1. 在 YEA 平板上培養細胞直到長成可見單菌落。2. 接種單菌落到添加有 150 mg/L 腺嘌呤、亮氨酸和/或尿嘧啶等營養缺陷互補物的 YEA 或 PM 培養基中,于允許溫度以 200 r/min 振蕩培養防止酵母菌沉積
非洲粟酒裂殖酵母的轉化實驗_電穿孔轉化法
實驗材料細胞試劑、試劑盒三梨糖醇儀器、耗材PM 或 YE 培養基實驗步驟1. 用 PM 或 YE 培養基培養細胞,至滴度到每毫升 1X107?個細胞。2. 用冰冷的過濾除菌的 1.2 mol/L 三梨糖醇洗細胞 3 遍,以降低細胞的導電性。3. 用冰冷的 1.2 mol/L 三梨糖醇重懸細胞,使滴度
非洲粟酒裂殖酵母的培養基實驗
PM基本培養基的制備豐富培養基YE和YEA的制備試劑、試劑盒維生素 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?礦物質 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
非洲粟酒裂殖酵母的培養基實驗
基本培養基的制備 豐富培養基YE和YEA的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 維生素 礦物質 鹽類儲存液
釀酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母細胞的培養
實驗概要本實驗主要進行了了釀酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母的培養,目的是掌握酵母細胞的培養方法及學會使用相差和微分干涉顯微鏡。實驗原理釀酒(芽殖)酵母的培養在許多方面可以與大腸桿菌相比較。這種酵母可以用標準的微生物學技術在液體和固體培養基中進行培養。大多數酵母菌株在復合液體培養基中的倍增時間為90
非洲粟酒裂殖酵母的培養基實驗——PM基本培養基的制備
試劑、試劑盒維生素礦物質鹽類儲存液實驗步驟1. 將下述試劑用水溶解,制備高濃度的維生素、礦物質和鹽類儲存液,調整終體積到 1 L,過濾除菌。2. 將下述組分溶解于 800 ml 水中以制備 PM,按要求加入維生素、礦物質、鹽溶液,用 NaOH 調節 pH 到 5.6,定容到 1 L,高壓滅菌。展開
非洲粟酒裂殖酵母的培養基實驗—豐富培養基YE和YEA的制備
試劑、試劑盒酵母提取物葡萄糖Bacto 瓊脂實驗步驟1. YE酵母提取物 5 g,葡萄糖 30 g,Bacto 瓊脂 20 g,蒸餾水溶解至體積為 1 L。2. YEAYEA 配方中含有 150 mg/L 的腺嘌呤。3. YEA+Megdala Red 平板向 1 L 冷卻后的 YEA 中加 4 m
酵母細胞的培養與觀察操作指南
一、實驗目的1.掌握酵母細胞的培養 方法2.學會使用相差和微分干涉顯微鏡二、異源互補技術概述釀酒(芽殖)酵母的培養在許多方面可以與大腸桿菌相比較。這種酵母可以用標準的微生物學技術在液體和固體培養基中進行培養。大多數酵母菌 株在復合液體培養基中的倍增時間為90~120min,到靜止期時細胞滴度為3
德發現能“永葆青春”的微生物
目前,衰老仍是不可避免的生命現象。但德國科研人員近日發現了一種通過分裂繁殖而使自己“永葆青春”的微生物。研究人員認為,這一發現可以為研究衰老的病理機制提供更多線索。 馬克斯—普朗克分子細胞生物學與遺傳學研究所日前發表公報說,這種名為“亞硝酸對粟酒裂殖酵母”的酵母菌,可以在不利環境下通過特殊
eLife解答達爾文的“謎中之謎”
Fred Hutchinson癌癥研究中心的研究人員將發酵茶葉和啤酒的兩種酵母進行雜交,為人們揭示了雜交不育背后的分子機制。研究顯示,酵母雜交之后迅速出現了多種生殖屏障,幫助劃清種屬之間的界限。這項研究使用了非洲人釀造啤酒的粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe),及其
Nat-Commun:科學家們揭示細胞性狀對于成功繁殖的作用
弗朗西斯克里克研究所和倫敦國王學院的新研究發現,細胞必須保持其形狀和比例,才能進行細胞分裂并成功繁殖。 該研究發表在Nature Communications上,揭示了基本生物學機制,即細胞在生長或縮小時會保持其比例。這一原則在整個生命中都可以看到,從單細胞到復雜的生物,但它的生物起源仍然是一
酒劑、酊劑的制備實驗
浸漬法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 谷類酒 試劑、試劑盒
酒劑、酊劑的制備實驗
實驗材料 谷類酒試劑、試劑盒 當歸黃芪蜜炙牛膝防風白酒黃酒蔗糖儀器、耗材 天平燒杯玻璃棒實驗步驟 1. ?將當歸,黃芪(蜜炙),牛膝,防風4味,粉碎或粗粉。2. ?按滲漉法,用白酒2400 ml與黃酒8000 ml的混合液作溶劑,浸漬48小時后,緩緩滲漉。3. ?在滲漉液中加入蔗糖840 g攪拌溶解
關于肌苷發酵的基本信息介紹
肌苷發酵,用微生物發酵法大量生產肌苷的工藝和技術。肌苷的化學名為次黃嘌呤核苷或次黃苷,分子式為C10H12N4O5,相對分子質量為268.28。是次黃嘌呤和核糖的縮合物,其磷酸酯即肌苷酸。白色結晶或無水粉末狀,易溶于水,pH近中性無臭,味微苦。 白色結晶或無水粉末狀,易溶于水,pH近中性無臭,
DNA的轉化實驗
體外通過基因工程手段所構建的含目的基因的重組質粒,選用轉化和篩選技術, 可獲得含重組的陽性克隆。在此陽性克隆中,DNA可在生物體系中大量擴增,繁殖, 保存以及表達目的基因的產物,這是PCR體外擴增DNA所不能替代的。配合DNA重組技術,所獲得的,不同目的需要的陽性菌株已廣泛應用于科研,醫藥生產和生物
山萆粟的介紹
多年生纏繞藤本。根莖橫生,近于地面,竹節狀。葉互生,三角狀心形,或卵狀披針形,頂端漸尖,邊緣波狀,葉片干后近乎黑色,下面常蓋有白色粉狀物。花單性,雌雄異株。蒴果成熟后反曲下垂,翅寬超過長度或近于等長,表面栗褐色,成熟后頂端開裂。種子四周圍以薄膜狀的翅,通常兩兩迭生,著生于每室的中央。花期5~8月
酵母轉化實驗_乙酸鋰轉化
實驗材料酵母試劑、試劑盒YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸鋰儀器、耗材搖床水浴鍋轉子離心機培養箱實驗步驟1. ?在開始實驗前2天,接種待轉化的酵母菌株的單菌落于5 ml YPD培養基中,于30℃恒溫搖床,培養過夜。?2. ?轉化的前一天晚上,往1 L 無菌燒瓶中加入300 ml YPAD培養基,然后
酵母轉化實驗_電穿孔轉化
實驗材料酵母試劑、試劑盒二硫蘇糖醇山梨醇儀器、耗材電穿孔儀器電擊池水浴鍋實驗步驟1. ?實驗前兩天,將轉化用酵母菌株的單菌落接種于5 ml YPD培養基中,30℃過夜培養至飽和。?2. ?轉化前一天晚上,在裝有500 ml YPD培養基的2 L 無菌燒瓶中接種適量的過夜培養液,于30℃劇烈搖動培養過
質粒的轉化及轉化子的鑒定實驗——電轉化法
實驗方法原理電轉化法:外加于細胞膜上的電場造成細胞膜的不穩定,形成電穿孔,不僅有利于離子和水進入細菌細胞,也有利于孔DNA等大分子進入。同時DNA在電場中形成的極性對于它運輸進細胞也是非常重要的。實驗材料外源片段與載體的連接產物大腸桿菌感受態細胞試劑、試劑盒X-galAmpLA培養基水抗生素儀器、耗
質粒的轉化及轉化子的鑒定實驗
實驗方法原理 熱激法:大腸桿菌在0 ℃ CaCl2低滲溶液中,菌細胞膨脹成球形,轉化混合物中的DNA形成抗DNase的羥基-鈣磷酸復合物粘附于細胞表面,經42 ℃短時間熱沖擊處理,促進細胞吸收DNA復合物,在豐富培養基上生長數小時后,球狀細胞復原并分裂增殖。在被轉化的細胞中,重組子基因得到表
與乳腺癌相關的CDK6基因編碼功能描述
細胞分裂蛋白激酶6(CDK6)是由CDK6基因編碼的酶。它受細胞周期蛋白的調節,更具體地說是細胞周期蛋白D蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白。由該基因編碼的蛋白質是細胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)家族的成員,其包括CDK4。CDK家族成員與釀酒酵母cdc28和粟酒裂殖酵母cdc2的基因產物非常相似
乳腺癌相關的CDK6基因突變類型及臨床解釋
細胞分裂蛋白激酶6(CDK6)是由CDK6基因編碼的酶。它受細胞周期蛋白的調節,更具體地說是細胞周期蛋白D蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白。由該基因編碼的蛋白質是細胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)家族的成員,其包括CDK4。CDK家族成員與釀酒酵母cdc28和粟酒裂殖酵母cdc2的基因產物非常相似
CDK6基因突變與藥物因子介紹
細胞分裂蛋白激酶6(CDK6)是由CDK6基因編碼的酶。它受細胞周期蛋白的調節,更具體地說是細胞周期蛋白D蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白。由該基因編碼的蛋白質是細胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)家族的成員,其包括CDK4。CDK家族成員與釀酒酵母cdc28和粟酒裂殖酵母cdc2的基因產物非常相似
與細胞周期信號通路相關因子介紹CDK6
細胞分裂蛋白激酶6(CDK6)是由CDK6基因編碼的酶。它受細胞周期蛋白的調節,更具體地說是細胞周期蛋白D蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白。由該基因編碼的蛋白質是細胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)家族的成員,其包括CDK4。CDK家族成員與釀酒酵母cdc28和粟酒裂殖酵母cdc2的基因產物非常相似
細胞周期信號通路相關CDK6
細胞分裂蛋白激酶6(CDK6)是由CDK6基因編碼的酶。它受細胞周期蛋白的調節,更具體地說是細胞周期蛋白D蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白。由該基因編碼的蛋白質是細胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)家族的成員,其包括CDK4。CDK家族成員與釀酒酵母cdc28和粟酒裂殖酵母cdc2的基因產物非常相似
CDK6基因編碼功能及結構描述
細胞分裂蛋白激酶6(CDK6)是由CDK6基因編碼的酶。它受細胞周期蛋白的調節,更具體地說是細胞周期蛋白D蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白。由該基因編碼的蛋白質是細胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)家族的成員,其包括CDK4。CDK家族成員與釀酒酵母cdc28和粟酒裂殖酵母cdc2的基因產物非常相似
CDK6基因的結構特點和作用
細胞分裂蛋白激酶6(CDK6)是由CDK6基因編碼的酶。它受細胞周期蛋白的調節,更具體地說是細胞周期蛋白D蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白。由該基因編碼的蛋白質是細胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)家族的成員,其包括CDK4。CDK家族成員與釀酒酵母cdc28和粟酒裂殖酵母cdc2的基因產物非常相似