正常成熟破骨細胞原代培養
實驗材料:1. 細胞來源:新生大鼠或兔,妊娠6個月以內的引產胎兒等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 細胞支持物:薄骨片、蓋玻片;4. 培養液:199培養基、MEM或DMEM培養基均可,須補加15%—20%小牛血清、25mmol/L HEPES及青霉素100IU/ml、鏈霉素100μg/ml;實驗方法:1. 薄骨片的制備:取新鮮牛股骨干的密質部分,沿骨縱軸用骨鋸切割成大小約0.5cm×0.5CM、厚為0.1cm的小塊,再用金剛砂輪磨成厚約10—50μm(以便在相差顯微鏡下觀察)的薄骨片。使用前用超聲波清洗儀超聲洗滌3次,每次約10min。然后依次浸泡在3個盛有含青霉素(1000IU/ml)、鏈霉素(1000μg/ml)、兩性霉素B(3μg/ml)的抗生素溶液的小容器中,每次10—20min。最后可浸于盛有含抗生素的培養液的容器內,置4℃(短期)或......閱讀全文
正常成熟破骨細胞原代培養
實驗材料:1. 細胞來源:新生大鼠或兔,妊娠6個月以內的引產胎兒等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 細胞支持物:薄骨片、蓋玻片;4. 培養液:199培養基、MEM或DMEM培養基均可,須補加15%—20%小牛血清、25
正常成熟破骨細胞原代培養
實驗材料:1.?細胞來源:新生大鼠或兔,妊娠6個月以內的引產胎兒等;2.?清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.?細胞支持物:薄骨片、蓋玻片;4.?培養液:199培養基、MEM或DMEM培養基均可,須補加15%—20%小牛血清
正常骨內成骨細胞原代培養
實驗材料:1. 骨組織來源:新生或胚胎大鼠、兔、人類胚胎或手術切除之骨組織;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅡ型膠原酶溶液;4. 培養液:RPMI 1640培養基,配制培養液
正常人骨膜內成骨細胞原代培養
正常人骨膜內成骨細胞原代培養實驗材料:1.?骨組織來源:手術切除之骨組織;2.?清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.?消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅠ型膠原酶溶液;4.?培養液:RPMI?1640培養基,配制培
正常人骨膜內成骨細胞原代培養
實驗材料:骨組織來源:手術切除之骨組織;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅠ型膠原酶溶液;4. 培養液:RPMI 1640培養基,配制培養液時加入15%的小牛血清,并用
成骨細胞原代培養
實驗方法原理 采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時,將松質骨切成 2~5 mm 大小,用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶,用 F12 培養液培養。試劑、試劑盒 Hams F12 培養液用于細胞傳代
原代軟骨細胞分離培養
1、一般根據實驗要求,選取不同年齡組的兔子,實際上兔子的年齡越小越好,畢竟幼體組織的活力要高于成體組織的活力,耳靜脈空氣注射法處死后,無菌條件下分離后肢關節軟骨和肋軟骨,剝離包裹軟骨組織的筋膜和軟骨膜,放入盛有PBS液的培養皿中。2、將分離得到的軟骨組織剁碎成0.3-0.5mm的組織塊,移入25cm
成骨細胞原代培養實驗
實驗方法原理采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時,將松質骨切成 2~5 mm 大小,用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶,用 F12 培養液培養。?實驗材料骨標本試劑、試劑盒Hams F12 培養液
成骨細胞原代培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時,將松質骨切成 2~5 mm 大小,用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶,用 F12 培養
成骨細胞原代培養實驗
成骨細胞原代培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時
軟骨細胞的原代培養和傳代培養
軟骨細胞的原代培養齡新西蘭乳兔(雌雄不限,共18只,分6次處理),溺死,置于75%酒精溶液中10分鐘,拿入超凈工作臺,自眼外眥至耳屏前剪開皮膚暴露皮下組織,再次嚴格消毒,自外眥外將顴弓由根部剪斷,暴露髁狀突,去凈髁狀突表面軟組織及軟骨膜,以眼科剪剪取髁狀突表面的透明軟骨,以磷酸緩沖液(PBS含青霉素
正常小梁細胞原代培養
實驗材料:1.??? 材料來源:人眼、兔眼或者豬眼等;2.??? 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.??? 器械:小梁剪與無齒鑷等;4.??? 消毒液:200IU/ml的慶大霉素生理鹽水;5.??? 培養液:基礎液由DME
正常關節軟骨細胞的短期培養
實驗材料:1. 軟骨細胞來源:動物材料可選用未成年兔的膝關節、雞胚胸軟骨。人體材料可取自引產胎兒或成年人手術切除的軟骨標本;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 消化液:0.2%膠原酶Ⅱ溶液,用液配制,過濾除菌;4. 培養液
正常關節軟骨細胞的短期培養
實驗材料:1.??? 軟骨細胞來源:動物材料可選用未成年兔的膝關節、雞胚胸軟骨。人體材料可取自引產胎兒或成年人手術切除的軟骨標本;2.??? 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.??? 消化液:0.2%膠原酶Ⅱ溶液,用PBS
正常滑膜細胞原代培養
正常滑膜細胞原代培養實驗材料:1.?實驗動物:大鼠、兔,人手術切除的關節等;2.?清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.?培養液:RPMI1640培養基,補加15%小牛血清;實驗方法:1.?將大鼠處死后,用75%酒精消毒;2.
正常滑膜細胞原代培養
實驗材料:實驗動物:大鼠、兔,人手術切除的關節等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 培養液:RPMI1640培養基,補加15%小牛血清;實驗方法:將大鼠處死后,用75%酒精消毒;2. 用手術剪剖開其四肢皮膚與肌肉
破骨細胞的演變
破骨細胞由多核巨細胞(multi nuclear giant cell,MNGC)組成,直徑100μm,含有2~50個緊密堆積的核,主要分布在骨質表面、骨內血管通道周圍。由多個單核細胞融合而成的,胞漿嗜堿性但隨著細胞的老化,漸變為嗜酸性。 破骨細胞的分離培養始于20世紀80年代,到2018年7
破骨細胞的形態
破骨細胞由多核巨細胞(multinuclear giant cell, MNGC)組成,直徑100μm,含有2~50個緊密堆積的核,主要分布在骨質表面、骨內血管通道周圍。由多個單核細胞融合而成的,胞漿嗜堿性但隨著細胞的老化,漸變為嗜酸性。
破骨細胞的作用
破骨細胞以其骨質吸收功能為人所知曉。而且作為骨組織成分的一種,行使骨吸收(bone resorption)的功能。破骨細胞與成骨細胞(osteoblast,亦稱bone-forming cells)在功能上相對應。二者協同,在骨骼的發育和形成過程中發揮重要作用。高表達的抗酒石酸酸性磷酸酶(tar
破骨細胞的來源
破骨細胞是由骨髓中的髓系祖細胞分化而成的單核巨噬細胞相互融合,所形成的多核巨細胞。早期未成熟的增殖性單核吞噬細胞被稱為破骨細胞前體,在化學因子的作用下進入血液循環,再在基底多細胞單位所釋放的信號因子的作用下進入骨結構腔體,在各種化學因子、轉錄因子、細胞因子等信號因子的刺激下融合為多核細胞并最終活
破骨細胞的結構
破骨細胞是一個大的多核細胞,骨上的人類破骨細胞通常有五個細胞核,直徑為150–200μm。當使用破骨細胞誘導細胞因子將巨噬細胞轉化為破骨細胞時,會出現直徑可能達到100μm的非常大的細胞。它們可能有幾十個細胞核,通常表達主要的破骨細胞蛋白,但由于非天然基質,它們與活骨中的細胞有顯著差異。多核組裝破骨
破骨細胞的功能
一旦被激活,破骨細胞就會通過趨化性移動到骨骼中的微骨折區域。破骨細胞位于稱為Howship\'s腔的小腔中,由底層骨骼的消化形成。密封區是破骨細胞質膜與下方骨骼的連接。密封區由稱為足體的特殊粘附結構帶界定。整合素受體(例如αvβ3)通過骨基質蛋白(例如骨橋蛋白)中的特定氨基酸基序Arg-Gl
什么是破骨細胞
破骨細胞(osteoclast,亦稱bone-resorbingcells)是骨細胞的一種,行使骨吸收(boneresorption)的功能。破骨細胞與成骨細胞(osteoblast,亦稱bone-formingcells)在功能上相對應。二者協同,在骨骼的發育和形成過程中發揮重要作用。 破骨細胞
什么是破骨細胞?
破骨細胞是一種骨細胞,破骨細胞打破了骨組織。此功能在維護、修復是關鍵和重塑的骨頭的的脊椎骨骼。破骨細胞通過分泌酸和膠原酶在分子水平上分解和消化水合蛋白質和礦物質的復合物,這一過程稱為骨吸收。這個過程也有助于調節血鈣水平.在進行再吸收的那些骨表面上發現了破骨細胞。在這樣的表面上,破骨細胞被認為位于稱為
正常視網膜米勒細胞原代培養
實驗材料:1. 材料來源:人眼、兔眼或者豬眼等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶-100IU/ml透明質酸酶混合消化液;4. 消毒無菌的手術器械若干;實驗方法:1. 取材(1)取自人的供體眼球
破骨細胞的研究發展
自從它們于1873年被發現以來,關于它們的起源一直存在相當大的爭論。三種理論占主導地位:1949年至1970年流行結締組織起源,認為破骨細胞和成骨細胞屬于同一譜系,成骨細胞融合在一起形成破骨細胞。經過多年的爭論,現在很清楚這些細胞是從巨噬細胞的自我融合發展而來的。1980年初,單核細胞吞噬系統被認為
簡述破骨細胞的作用
破骨細胞以其骨質吸收功能為人所知曉。而且作為骨組織成分的一種,行使骨吸收(bone resorption)的功能。破骨細胞與成骨細胞(osteoblast,亦稱bone-forming cells)在功能上相對應。二者協同,在骨骼的發育和形成過程中發揮重要作用。高表達的抗酒石酸酸性磷酸酶(tar
小鼠破骨細胞分化方案
破骨細胞是高度分化的多核巨細胞,主要來源于單核/巨噬細胞造血干細胞系,是一種具有骨吸收功能,在骨代謝方面起著關鍵性作用的細胞,因而機體對于破骨細胞的調控非常嚴格,在破骨細胞分化成熟的過程中,RANK /RANKL/OPG系統起著分化調控樞紐的作用,是調節破骨細胞分化成熟的關鍵信號途徑。核因子κB
正常人關節軟骨細胞的長期培養
實驗材料:1.??? 軟骨細胞來源:20—24周自然流產胎兒的股骨和脛骨;2.??? 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.??? 消化液Ⅰ:2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml膠原酶混合消化液,用PBS液配制;4.??? 消化
正常人關節軟骨細胞的長期培養
實驗材料:1. 軟骨細胞來源:20—24周自然流產胎兒的股骨和脛骨;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 消化液Ⅰ:2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml膠原酶混合消化液,用液配制;4. 消化液Ⅱ:0.5mg/ml膠原酶