正常人骨膜內成骨細胞原代培養
實驗材料：骨組織來源：手術切除之骨組織；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1&time，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅠ型膠原酶溶液；4. 培養液：RPMI 1640培養基，配制培養液時加入15%的小牛血清，并用5.6% NaHCO3調節至pH 7.2；實驗方法：取人手術切除之骨膜，放入盛有緩沖液的培養皿中，去除附于骨膜上的結締組織；2. 將骨膜剪碎成1—2mm2大小的組織塊（膜片）；3. 加入0.1%EDTA與0.25%胰蛋白酶（1：1，V/V）混合消化液，在37℃下消化20—30min。以1000r/min離心1—2min，沉淀骨膜組織塊，除去上清液；4. 用緩沖液洗沉淀骨膜組織塊2—3次，重復上述離心過程；5. 在37℃下再用1mg/mlⅠ型膠原酶消化骨膜組織塊約90min。離心（1000r/min，5—10min）以沉淀細胞，......閱讀全文
原代細胞的培養方法
原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基本性質，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。但實際上，通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。??最常用的原代細胞的培養有組織塊培養和分散細胞培養。組織塊培
原代神經元培養
Protocol for the Primary Culture of Cortical and Hippocampal neurons?Solutions and media required:Poly D-lysine/laminin solution?-?pdfDM/KY?-?pdfOptim
原代細胞的培養方法
原代細胞接近和最能反映體內生長特性，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。 原代細胞的培養，也叫初代培養，是從供體取得組織細胞在體外進行的*培養，是建立細胞系的首步，是一項基本技術。? 原代細胞的培養方法一般有以下4種： ① 組織塊培養法 組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培
原代細胞分離與培養
對于大部分科研人員來說，研究中一般用到均是現成的細胞系/株，我們只需要：進行細胞傳代和保種。然而，這些細胞系常常由于體外長期培養，而丟失原有生物學特性，對藥物處理的反應差距越來越大。因此，原代細胞的地位日漸凸顯，Paper中若有了原代細胞的數據都會添色不少。然而，就小編親生經歷，原代細胞分離著實是個
新生大鼠心肌細胞原代培養實驗——原代培養技術
新生大鼠心肌細胞原代培養可應用于：（1）細胞保種；（2）用于細胞形態研究；（3）應用于臨床研究。實驗方法原理將大鼠的心肌細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD 乳鼠試劑、試劑盒低糖 DMEM、胰酶EDTA青鏈
兔成骨細胞與骨髓基質干細胞混合培養的實驗研究
對骨髓基質干細胞進行改造,使其在保持快速生長的同時向成骨細胞方向分化是目前國內外研究的熱點。實驗發現,成熟的成骨細胞可以通過細胞間的直接接觸作用促進骨髓基質干細胞增殖[ 1 ] ,此外成骨細胞可產生多種生長因子促進其骨髓基質干細胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基質干細胞通過誘導向成骨細胞分化后,
細胞培養原代培養的原理
將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。細胞培養是生物學和醫學研究最常用的手段之一，可分為原代培養和傳代培養兩種。原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養。由于
細胞原代培養的分類
最常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上，加入培養基后進行培養。分散細胞培養則是將組織塊用機械法或化學法使細胞分散。如欲從胎兒或新生兒的組織分離到活性最好的游離細胞，經典的方法是用蛋白水解酶（如胰蛋白酶和膠原酶）消化細胞間的結合物，或用金屬離子螯合劑
原代培養的常用分類
最常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上，加入培養基后進行培養。分散細胞培養則是將組織塊用機械法或化學法使細胞分散。如欲從胎兒或新生兒的組織分離到活性最好的游離細胞，經典的方法是用蛋白水解酶（如胰蛋白酶和膠原酶）消化細胞間的結合物，或用金屬離子螯合劑
原代培養的實驗原理
將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。細胞培養是生物學和醫學研究最常用的手段之一，可分為原代培養和傳代培養兩種。原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養。由于
原代細胞培養技術分類
一、組織塊直接培養法1、取材，用Hank's液洗滌三次，并剔除脂肪，結締組織，血液等雜物。2、用手術剪將組織剪切成1mm3左右的小塊，再用Hank's液洗三次。3、將組織塊轉移至培養瓶，并貼附于瓶底面。4、輕輕將培養瓶翻轉，瓶底朝上，向瓶內注入適量的培養液，將培養瓶放置在37℃恒溫箱
細胞的原代培養實驗
實驗方法原理 細胞培養(Cell culture)是模擬機體內生理條件，將細胞從機體中取出，在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代，進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。近年來，廣泛地應用于分子生物學、遺傳學、免疫學、腫瘤學、細胞工程等領域，發展成一種重要生物技術，并取得顯著成就
正常小梁細胞原代培養
實驗材料：1.??? 材料來源：人眼、兔眼或者豬眼等；2.??? 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素，pH7.2；3.??? 器械：小梁剪與無齒鑷等；4.??? 消毒液：200IU/ml的慶大霉素生理鹽水；5.??? 培養液：基礎液由DME
原代細胞培養的應用
1、為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段； 2、為傳代培養創造條件； 3、服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。
細胞原代培養的定義
原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首次培養，也叫初代培養。原代培養離體時間短，遺傳性狀和體內細胞相似，適于做細胞形態、功能和分化等研究。較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基本性質，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。但實際上，通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細
原代培養的實驗步驟
以胚胎小鼠為例1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數秒消毒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的消毒器械。最后取出雙角子宮置于無菌平皿內。2．用Hanks液洗滌3次，剪開子宮取出胚胎。除去子宮、血液和筋膜等組織
脂肪細胞的原代培養
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 從脂肪組織中分散的細胞用25txm篩網過濾，可以排除成熟脂肪細胞，過濾下來的基質血管(stromal-vascular，SV)細胞在化學限定性無血清培養液中培養，可使前脂肪細胞得到優勢生長，并逐漸積聚脂肪，發育為成熟脂肪細胞。
原代細胞的培養和維持
一、原代細胞的培養與維持1、靜置貼壁細胞（包括半貼壁細胞的培養）凡經消化液處理實體組織來源的細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性，細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L,培養基可用 Eagle（MEM）或DNEM培養，小牛血清濃度為10%~80%。在起始的2天中盡量減少振蕩，以
小鼠肝細胞原代培養
實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料 小鼠試劑、試劑盒 DMEM無血清DMEM培養基胰酶PBS儀器、耗材 飯盒紗布剪子鑷子燒杯平皿研磨玻片濾網離心管6孔培養板吸管移液管手套微量加樣器實驗
脂肪細胞的原代培養
實驗材料 DMEM-ADMEM-B膠原蛋白酶雄性 Sprague-Dawley 大鼠試劑、試劑盒 KRBH緩沖液KRBH-A緩沖液儀器、耗材 Petri培養皿錐形離心管聚丙烯管低密度聚丙烯瓶尼龍濾網尖解剖剪Perry鑷塑料箱鍘刀移液器實驗步驟 一、切除附睪脂肪墊1. 在充有 70 % CO2 和 3
細胞的原代培養實驗
實驗方法原理原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養，由于細胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段，同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上，加入
細胞的原代培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養，由于細胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段，同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散
細胞的原代培養實驗
原代培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養，由于細胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生
原代培養的基本介紹
原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首次培養，也叫初代培養。原代培養離體時間短，遺傳性狀和體內細胞相似，適于做細胞形態、功能和分化等研究。較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基本性質，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。但實際上，通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細
腫瘤細胞原代培養實驗
組織塊法 酶消化法 脫落細胞法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基，10%血
原代細胞體外培養現狀
原代細胞自然生長有兩種方式，錨定依賴或非錨定依賴，這主要取決于它們在體內的組織來源：外周血（非錨定依賴）或固體組織器官（錨定依賴）。原代細胞一旦分離后，24-48h內需要進行貼壁或起始，開始培養。 廣義地說，所有的哺乳動物細胞，無論其類型或來源，都需要在與人類生理條件（即37°C，5%CO2）
原代培養的基本介紹
細胞培養是生物學和醫學研究最常用的手段之一，可分為原代培養和傳代培養兩種。 原代培養是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進行培養，也稱初代培養。嚴格地說即從體內取出組織接種培養到第一次傳代階段，但實際上，通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。一般持續1一4周。此期細胞呈活躍的移
脂肪細胞的原代培養
實驗方法原理從脂肪組織中分散的細胞用25txm篩網過濾，可以排除成熟脂肪細胞，過濾下來的基質血管(stromal-vascular，SV)細胞在化學限定性無血清培養液中培養，可使前脂肪細胞得到優勢生長，并逐漸積聚脂肪，發育為成熟脂肪細胞。實驗材料雄性 Sprague-Dawley 大鼠試劑、試劑盒K
腫瘤細胞原代培養實驗
組織塊法 酶消化法 脫落細胞法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基，10%血
DPSCs/SHED的原代培養
???????????????????????????????????????????? DPSCs/SHED的原代培養Stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED)Postnatal human dental pulp stem ce