熒光染色觀察藥物誘導細胞凋亡
【原理】 Hoechst 33258 為特異性 DNA 染料，與 A-T 鍵結合，這種染料對死細胞或經 70% 冷乙醇固定的細胞可立即染色。而活細胞的著色是漸進性的，在 10min 內可達飽和。在熒光顯微鏡下，活細胞核呈彌散均勻熒光，出現細胞凋亡時，細胞核或細胞質內可見濃染致密的顆粒塊狀熒光。 【試劑與器材】 1. Hoechst 33258 貯存液： 稱取 Hoechst 33258 試劑 1mg ，用 20ml 蒸餾水溶解后，濾過， 4℃ 避光保存。用時蒸餾水 10 倍稀釋成染色液。 2. 封片液（ pH5.5 ）： 20mmol/L 檸檬酸； 50mmol/L 磷酸氫二鈉； 50% 甘油， 長春新堿 3. 細胞固定液 甲醇、冰乙醇（ 3∶1 ），現配。 【操作步驟】 1. 將細胞以 4 .0×10 8 /L 密度接種于用 12 孔培養板中，每孔 3 mL ， 37......閱讀全文
角膜熒光素染色的相關疾病有哪些
流行性出血性結膜炎，小兒干燥綜合征，角膜病，眼瞼帶狀皰疹，角膜擦傷，干燥綜合征，干燥性角結膜炎，匐行性角膜潰瘍，新生兒淚囊炎，溢淚癥
支原體的檢測實驗_熒光染色法
實驗方法原理熒光顯微鏡檢查法，熒光染料用 Hoechst 33258，它是一種能與DNA 特異結合的熒光染料。支原體內含有DNA，能著色，是現有檢測法中最方便和最有效的一種。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks醋酸甲醇蒸餾水儀器、耗材蓋片顯微鏡實驗步驟1. ?標本蓋片培養細胞匯合前從瓶中取出（如細胞已
熒光原位雜交染色體分析技術
FISH是上世紀80年代中期發展起來并直到現在仍在不斷改進、完善的技術。其基本過程是：首先制成染色體標本，和與所感興趣的目的基因（或染色體片段）互補的探針，并在探針上標記熒光色素，當探針與染色體標本上的靶序列雜交后，利用熒光顯微鏡觀察熒光信號從而獲得染色體核型的信息。此技術具有靈敏度強、背景低、
染色體熒光原位雜交技術簡介
一、定義：在細胞遺傳學，分子生物學和免疫學相結合基礎上發展的一種新科學，他利用已知的核酸序列作為探針，以熒光素直接標記或以非放射性物質標記后與靶DNA結合，在通過熒光素標記，最后在熒光顯微鏡下觀察雜交信號，從而對標本中的待測核苷酸進行定性，定位和定量分析。二、原理：利用DNA變性后雙鏈解開變成單鏈，
與做熒光染色的同學共享些經驗
Hoechst 33258染色固定液 50 ml?Hoechst 33258染色液 50 ml?抗熒光淬滅封片液 5 ml?說明書 1 份?保存條件：?4℃保存，Hoechst 33258染色液需4℃避光保存。本試劑盒自訂購之日起六個月內有效。?注意事項：?? 需熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡。??
DNA熒光組織化學染色的方法
一步雙染色法先將兩種熒光標{己抗體按適當比例混合(A+B)，按直接法進行染色。二步雙染色法先用TRITC標記的A抗體進行免疫熒光染色，再用FITC標記的B抗體染色，根據兩種抗體的動物種屬不同，可用直接法也可用間接法，結果A抗原呈現橘紅色熒光，而B抗原呈現黃綠色熒光。在應用中，常用的方法是免疫熒光組織
熒光抗體染色結果的判讀包括哪些方法？
（一）直接法：用特異熒光抗體直接滴加于標本上。本法操作簡便，特異性高，非特異熒光染色因素少；缺點是敏感度偏低，需制備特異性的熒光抗體。（二）間接法：可用于檢測抗原和抗體，普通一抗＋熒光二抗。靈敏度高，僅需一種熒光抗體。（三）雙標記法：FITC及羅丹明分別標記不同的抗體，而對同一標本做熒光染色。（四）
熒光原位雜交染色體分析技術
FISH是上世紀80年代中期發展起來并直到現在仍在不斷改進、完善的技術。其基本過程是：首先制成染色體標本，和與所感興趣的目的基因（或染色體片段）互補的探針，并在探針上標記熒光色素，當探針與染色體標本上的靶序列雜交后，利用熒光顯微鏡觀察熒光信號從而獲得染色體核型的信息。此技術具有靈敏度強、背景低、
流式抗體（熒光抗體）細胞染色步驟與注意
染色緩沖液（BSA）的配制：PBS含有1% FBS和0.09% NaN3，置于冰上或4度冰箱備用。準備單細胞懸液：淋巴組織、骨髓、血液或培養的細胞。用冰染色緩沖液洗細胞2次，離心細胞，用冰染色緩沖液重懸細胞，使終濃度為2×107細胞/ml。各取50ul（106細胞）細胞懸液到2個圓底的Ep管中。根據
病毒免疫熒光實驗_病毒染色標本的制備
實驗材料待檢測病毒試劑、試劑盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯儀器、耗材玻片實驗步驟1. 培養細胞小玻片標本的制備 根據所檢測病毒種類，選擇敏感細胞進行培養，如乙型肝炎病毒用乳地鼠腎細胞 (BHK21 細胞）培養，森林腦炎病毒用綠猴腎細胞 (Vero 細胞）培養，登革熱病毒用白紋伊蚊
細胞核蛋白的免疫熒光染色方法
細胞免疫熒光的詳細操作步驟1，取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿里，PBS洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小，因此夾取的時候要小心。2，4%多聚甲醛固定20分鐘，PBS洗三遍。3，0.2%TritonX100通透10分鐘，PBS洗三遍。4，與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘，P
免疫熒光組織化學染色法
一)免疫熒光組織化學原理? ? 將已知抗原或抗體標記上熒光素，制成熒光抗體，再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有標記的熒光素，利用熒光顯微鏡觀察標本，熒光素受到激發光的照射會發出明亮的熒光(黃綠色或橘紅色)，熒光素受激發光照
細胞核蛋白的免疫熒光染色方法
細胞免疫熒光的詳細操作步驟1，取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿里，PBS洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小，因此夾取的時候要小心。2，4%多聚甲醛固定20分鐘，PBS洗三遍。3，0.2%TritonX100通透10分鐘，PBS洗三遍。4，與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘，P
免疫熒光組織（細胞）化學染色方法：間接法
一、原理與意義?免疫熒光組織（細胞）化學染色方法——間接法，是一種熒光抗體染色法。該方法只需制備一種熒光抗體可以檢出多種抗原，敏感性較高，操作方法較易掌握，而且能解決一些不易制備動物免疫血清的病原體（如麻疹）等的研究和檢查，所以已被廣泛應用于自身抗體和感染病人血清的試驗。?二、操作流程?（一）雙層法
染色體熒光原位雜交和染色體核型分析一樣嗎
從定義來看： 熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪制方法，使用熒光素標記探針，以檢測探針和分裂中期的染色體或分裂間期的染色質的雜交。 染色體核型分析是將待測細胞的染色體依照該生物固有的染色體形態結構特征，按照一定的規定，人為的對其進行配對、編號和分組，并進行形態分析的過程。 從運用場景來看：
撫生試劑其它免疫熒光細胞化學染色方法
?? 本法應用直接法或間接法的原理和步驟，可對活細胞在試管內進行染色，常用于T細胞和B細胞、細胞培養物、瘤細胞抗原和受體等的檢查和研究，陽性熒光主要在細胞膜上。膜抗原熒光抗體檢測法(FACS)即采用此原理。???? 雙重染色法?? ?在同一標本上有兩個抗原需要同時顯示(如A抗原和B抗原)，A抗原的抗
自動熒光染色鏡檢法體細胞計數器
產地：保加利亞品牌：Lactoscan型號：SCC特點：·???????? 用戶友好：簡單的操作，維護，校準和安裝·???????? 需要非常少量的牛奶·???????? 低功耗·???????? 不使用危險化學品·???????? 一年全面保修測量精度調整可以由用戶RS 232接口完成Lactos
臨床物理檢查方法介紹角膜熒光素染色介紹
角膜熒光素染色介紹:?角膜熒光染色(熒光素),是隱形眼鏡佩戴過程中的常見并發癥。中度至重度的角膜上皮染色會導致角膜病原體感染、角膜潰瘍、穿孔等一系列嚴重后果!角膜熒光素染色正常值:?與結膜相接觸,淚液呈黃綠色,角膜損傷處染色。角膜熒光素染色臨床意義:?異常結果:角膜、結膜破損處有嫩綠色著色,上皮完整
角膜熒光素染色的檢查過程及相關疾病
檢查過程 (1) 用玻璃棒蘸少許熒光素液涂于結膜囊內。 (2) 將熒光素液置于眼藥水瓶內直接滴入結膜囊。 (3) 將熒光素液抽入注射器內向結膜囊內滴入。 相關疾病 流行性出血性結膜炎，小兒干燥綜合征，角膜病，眼瞼帶狀皰疹，角膜擦傷，干燥綜合征，干燥性角結膜炎，匐行性角膜潰瘍，新生兒淚囊
細胞活力測定技術(熒光法和染色法)
用途 在熒光顯微鏡下可觀察到產生熒光的細胞。表明是有活力的；相反，不產生熒光的細胞，表明是無力的。本法利用活原生質體有選擇吸收外界的特性，用染料處理時，活原生質體不吸收染料，細胞未染上顏色，而死細胞立即吸附大量染料而染上顏色。(一)熒光法操作步驟熒光法1、制備細胞和原生質體材料。取花藥擠壓花粉，取幼
細胞活力測定技術（熒光法和染色法）
用 途 在熒光顯微鏡下可觀察到產生熒光的細胞。表明是有活力的；相反，不產生熒光的細胞，表明是無力的。本法利用活原生質體有選擇吸收外界的特性，用染料處理時，活原生質體不吸收染料，細胞未染上顏色，而死細胞立即吸附大量染料而染上顏色。操作步驟 (一)熒光法 1． 制備細胞和原生質體材料。取花藥擠
石蠟切片免疫熒光TUNEL和NEUN雙標染色
石蠟切片免疫熒光TUNEL和NEUN雙標染色曾經作過腦組織的TUNEL，也指導過別人做心肌的TUNEL，談談我的意見：蛋白酶K37度30min，好像有點偏長，我是10min。你是NBT/BICP顯色的話，這說明你用的是AP系統，而不是HRP這樣的話就不是用3%H2O2來去除內源性酶的了，（H2O2是
角膜熒光素染色檢查對眼睛有傷害嗎
角膜熒光素染色檢查對眼睛沒有傷害。 熒光素鈉檢測試紙主要是由熒光素鈉溶液經過濾紙浸潤后制成的試紙，是無菌、清潔、整齊、無毛刺的，對人體沒有任何傷害。主要在臨床中是用來檢查眼睛表面角膜等眼表結構中是否損傷。使用中是將無菌的生理鹽水將浸潤的熒光素鈉部分弄濕，然后輕輕將沾濕的部分接觸患者的瞼結膜，患
免疫熒光染色的詳細步驟及應注意的細節
免疫熒光染色方法快捷,靈敏.標本是冰凍切片,還是石蠟切片?切片的厚薄?影響到一抗孵育的時間.選用較佳的一抗的工作濃度.二抗需A液B液在室溫混合15分鐘后再用.標本需保存在-20度.
免疫熒光染色的詳細步驟及應注意的細節
免疫熒光染色方法快捷,靈敏. 標本是冰凍切片,還是石蠟切片?切片的厚薄?影響到一抗孵育的時間. 選用較佳的一抗的工作濃度. 二抗需A液B液在室溫混合15分鐘后再用. 標本需保存在-20度.
活細胞熒光染色后細胞形態變圓是什么原因
不固定直接染色，細胞就會變圓，因為染色液的滲透壓和細胞質不一樣可以選擇用CFSE染色后，鋪板。過夜，等細胞重新貼壁后，再用PI染色，你應該是要看雙染的效果，這個比較合適。用熒光顯微鏡觀察的時候可以先觀測拍照再固定，避免甲醇影響了細胞狀態讓它貼的不牢，或者不固定直接拍照，PI染色效果一個小時影響不大。
角膜熒光素染色的注意事項及檢查過程
注意事項 不合宜人群：角膜上皮沒有損傷或有潰瘍者。 檢查前禁忌：禁忌消毒熒光素濾紙。 檢查時要求：操作時注意勿污染被檢者面部及衣服。 檢查過程 (1) 用玻璃棒蘸少許熒光素液涂于結膜囊內。 (2) 將熒光素液置于眼藥水瓶內直接滴入結膜囊。 (3) 將熒光素液抽入注射器內向結膜囊內滴
全自動熒光染色鏡檢法體細胞計數器
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免疫熒光非特異性染色的消除方法
一、非特異性染色的主要因素 組織的非特異性染色的機理很復雜，其產生的原因主要可分為以下幾點： （1）一部分熒光素未與蛋白質結合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。 （2）抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白，可與組織成分結合。 （3）除去檢查的抗原以外，組織中還可能存在類屬抗
免疫熒光染色的詳細步驟及應注意的細節
免疫熒光染色方法快捷,靈敏.標本是冰凍切片,還是石蠟切片?切片的厚薄?影響到一抗孵育的時間.選用較佳的一抗的工作濃度.二抗需A液B液在室溫混合15分鐘后再用.標本需保存在-20度.