關于HPLC的流動相問題
1)PH值特別重要：一般C18柱PH小于3時，容易損壞色譜柱，但是抗酸性的柱可以使用小的PH值。 2) 注意選擇試劑的截止波長：如乙腈截止波長215nm、丙酮截止波長330nm、正丁烷210nm等等(具體情況請讀者參閱本文的參考文獻)。 3)流速：流速要適當，否則影響峰形、浪費溶劑，一般常規分析工作大多選擇1ml/min。......閱讀全文
HPLC流動相如何選擇
對于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流動相。甲醇/水作流動相時，如果得到的色譜圖出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分離效果又不錯，可加大甲醇的比例，可使峰出的早一些。對于一些難分離的物質，要選用乙腈/水作流動相。由于高效液相色譜中流動相是液體，它對組分有親和力，并參與固定相對
HPLC流動相如何選擇
對于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流動相。甲醇/水作流動相時，如果得到的色譜圖出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分離效果又不錯，可加大甲醇的比例，可使峰出的早一些。對于一些難分離的物質，要選用乙腈/水作流動相。由于高效液相色譜中流動相是液體，它對組分有親和力，并參與固定相對
HPLC流動相如何選擇
對于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流動相。甲醇/水作流動相時，如果得到的色譜圖出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分離效果又不錯，可加大甲醇的比例，可使峰出的早一些。對于一些難分離的物質，要選用乙腈/水作流動相。
HPLC對流動相的要求
① 必須是HPLC級的，不與固定相發生化學反應。② 對樣品有適宜的溶解度，要求k在1～10范圍內（可用范圍）或2～5（最佳范圍）。k值太小，不利于分離；k值太大，可能使樣品在流動相中沉淀。③ 必須與檢測器相適應。如用紫外檢測器時，不能選用截止波長大于檢測波長的溶劑。④ 粘度小。⑤ 必須脫氣：由于流動
HPLC對流動相的要求
① 必須是HPLC級的，不與固定相發生化學反應。② 對樣品有適宜的溶解度，要求k在1～10范圍內（可用范圍）或2～5（最佳范圍）。k值太小，不利于分離；k值太大，可能使樣品在流動相中沉淀。③ 必須與檢測器相適應。如用紫外檢測器時，不能選用截止波長大于檢測波長的溶劑。④ 粘度小。⑤ 必須脫氣：由于流動
關于HPLC的流動相問題
1)PH值特別重要：一般C18柱PH小于3時，容易損壞色譜柱，但是抗酸性的柱可以使用小的PH值。 2) 注意選擇試劑的截止波長：如乙腈截止波長215nm、丙酮截止波長330nm、正丁烷210nm等等(具體情況請讀者參閱本文的參考文獻)。 3)流速：流速要適當，否則影響峰形、浪費溶劑，一般常規
HPLC色譜流動相的脫氣方法
HPLC系統的管路流體如有氣泡生成，會造成色譜圖上出現尖銳的噪聲峰有的甚至影響HPLC的靈敏度.如今在使用HPLC時為防止氣泡生成，主要是對色譜流動相做脫氣處理，其主要的方法如下：1.吹氦脫氣法使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣，在0.1Mpa壓力下，以約60ml/min流速通入流動相10-15min
HPLC的固定相和流動相（一）
在色譜分析中，如何選擇最佳的色譜條件以實現最理想分離，是色譜工作者的重要工作，也是用計算機實現HPLC分析方法建立和優化的任務之一。本章著重討論填料基質、化學鍵合固定相和流動相的性質及其選擇。一、基質（擔體）HPLC填料可以是陶瓷性質的無機物基質，也可以是有機聚合物基質。無機物基質主要是硅膠和氧化鋁
調整HPLC的流動相有哪些原則？
液相色譜儀的流動相調整非常重要，一般來說，應該考慮以下方面。? 一?由強到弱。一般先用90%的乙腈/水進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況調整有機溶劑的比例。? 二?三倍規則。每減少10%的有機溶劑的量，保留因子約增加3倍，此為3倍規則。調整過程中，注意觀察各個峰的分離情況。? 三
HPLC的固定相和流動相（三）
3．流動相的pH值采用反相色譜法分離弱酸（3≤pKa≤7）或弱堿（7≤pKa≤8）樣品時，通過調節流動相的pH值，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留，并改善峰形的技術稱為反相離子抑制技術。對于弱酸，流動相的pH值越小，組分的k值越大，當pH值遠遠小于弱酸的pKa值時，弱酸主要以分子形式存
HPLC的固定相和流動相（二）
2．鍵合相的種類化學鍵合相按鍵合官能團的極性分為極性和非極性鍵合相兩種。常用的極性鍵合相主要有氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二醇基(DIOL)鍵合相。極性鍵合相常用作正相色譜，混合物在極性鍵合相上的分離主要是基于極性鍵合基團與溶質分子間的氫鍵作用，極性強的組分保留值較大。極性鍵合相有時也可作反相
高效液相（HPLC）流動相走干了怎么辦
1.換上足量新的流動相或超純水；2.擰開排氣閥，開大流速進行排氣，如果泵不能吸液，可以擰開出口單向閥的出口螺絲，直至有液體流出再擰緊（建議用注射器把溶劑過濾頭到比例閥入口那段管路的氣泡抽光，免得柱塞桿長時間干跑而損壞柱塞桿）；3.把柱子換成雙通，不接流通池，擰緊排氣閥，開大流速把系統管路里的氣泡沖走
高效液相色譜(HPLC）流動相的性質要求
高效液相色譜(HPLC)流動相溶劑具有粘度低、與檢測器相容性好、產品易得、毒性低等特點。選擇填料（固定相）后，強溶劑對填料表面溶質的吸附降低，相應的容量因子K降低。然而，較弱的溶劑增加了溶質在填料表面的吸附，相應的容量因子k也增加了? 因此，k值是流動相組成的函數? 塔板數n通常與流動相的粘度成反比
高效液相（HPLC）流動相走干了怎么辦
1.換上足量新的流動相或超純水；2.擰開排氣閥，開大流速進行排氣，如果泵不能吸液，可以擰開出口單向閥的出口螺絲，直至有液體流出再擰緊（建議用注射器把溶劑過濾頭到比例閥入口那段管路的氣泡抽光，免得柱塞桿長時間干跑而損壞柱塞桿）；3.把柱子換成雙通，不接流通池，擰緊排氣閥，開大流速把系統管路里的氣泡沖走
高效液相（HPLC）流動相走干了怎么辦
1.換上足量新的流動相或超純水；2.擰開排氣閥，開大流速進行排氣，如果泵不能吸液，可以擰開出口單向閥的出口螺絲，直至有液體流出再擰緊（建議用注射器把溶劑過濾頭到比例閥入口那段管路的氣泡抽光，免得柱塞桿長時間干跑而損壞柱塞桿）；3.把柱子換成雙通，不接流通池，擰緊排氣閥，開大流速把系統管路里的氣泡沖走
高效液相（HPLC）流動相走干了怎么辦
1.換上足量新的流動相或超純水；2.擰開排氣閥，開大流速進行排氣，如果泵不能吸液，可以擰開出口單向閥的出口螺絲，直至有液體流出再擰緊（建議用注射器把溶劑過濾頭到比例閥入口那段管路的氣泡抽光，免得柱塞桿長時間干跑而損壞柱塞桿）；3.把柱子換成雙通，不接流通池，擰緊排氣閥，開大流速把系統管路里的氣泡沖走
高效液相(HPLC)流動相走干了怎么辦
1、Dry Prime，呵呵，既然流動相都干了，那流路大概也干了進行dryprime的操作步驟如下1.輕輕振搖溶劑瓶中的過濾頭以除去可能留存的氣泡.2.在灌注排液閥出口插上一支注射器,然后打開排液閥(反時針旋轉半圈).不要將注射器固定在排液閥上,而要用手將其貼緊閥的出口.3.選擇DryPrime,然
高效液相（HPLC）流動相走干了怎么辦？
1.換上足量新的流動相或超純水；2.擰開排氣閥，開大流速進行排氣，如果泵不能吸液，可以擰開出口單向閥的出口螺絲，直至有液體流出再擰緊（建議用注射器把溶劑過濾頭到比例閥入口那段管路的氣泡抽光，免得柱塞桿長時間干跑而損壞柱塞桿）；3.把柱子換成雙通，不接流通池，擰緊排氣閥，開大流速把系統管路里的氣泡沖走
HPLC分析方法開發中流動相的調整
秘訣1：由強到弱： 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗， 這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。秘訣2 三倍規則 ：每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量，保留因子約增加3倍，此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中，注意
HPLC對流動相的一般要求
? 流動相就比如人體的血液，其質量直接影響到整個系統的正常運行與否。 應該使用HPLC級的溶劑，不能互相混溶的溶劑不可以直接切換!一般在水相和與其不混溶的溶劑切換時，使用異丙醇作為過渡溶劑。 注意溶劑的截止波長。截止波長是指該溶劑可以在紫外檢測器中使用的最低波長，低于該波長后，溶劑會
簡介高效液相色譜(HPLC）流動相的性質要求
（1）流動不會相應地改變填料的任何性質 低交聯度離子交換樹脂和排斥色譜填料有時會遇到一些有機相的膨脹或收縮，從而改變色譜柱填料床的性能。堿性流動相不能用于硅膠柱體系中，酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附柱體系中。 （3）必須與探測器配套。當使用紫外檢測器時，所用的流動相在檢測波長上不應吸收
簡述hplc級流動相使用前如何處理
一、基質（擔體） HPLC填料可以是陶瓷性質的無機物基質，也可以是有機聚合物基質。無機物基質主要是硅膠和氧化鋁。無機物基質剛性大，在溶劑中不容易膨脹。有機聚合物基質主要有交聯苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有機聚合物基質剛性小、易壓縮，溶劑或溶質容易滲入有機基質中，導致填料顆粒膨脹，結果減少
HPLC常見問題和解決方法－沒有壓力顯示沒有流動相流動
沒有壓力顯示，沒有流動相流動原?因解決方法1、電源問題1、接通電源，開機2、保險絲被燒壞2、更換保險絲3、控制器設定不正確或設定失敗3、a、采取恰當的設定b、修理或更換控制器4、柱塞桿折斷4、更換柱塞桿5、泵頭內有空氣5、溶劑脫氣、啟動泵抽出空氣6、流動相不足6、a、補充流動相b、更換入口濾頭7、單
液相色譜HPLC流動相的溶劑怎么選擇應遵循什么原則？
流動相溶劑的選擇：正確選擇流動相溶劑對高效液相色譜的成功至關重要。目前還沒有理想的選擇模式這主要取決于經驗的積累。流動相溶劑選擇的一般要求是:（1）溶劑應純度高，不溶于固定相，并能保持色譜柱的穩定性；（2）溶劑的性能應與所用的檢測器相匹配；（3）溶劑應具有足夠的樣品溶解能力；（4）溶劑應該具有低粘度
藥品研發中HPLC液相色譜柱的選擇和流動相的優化
???? 分析方法的開發主要包括色譜柱的選擇、流動相的選擇、檢測波長的選擇和梯度的優化幾個方面。目前高效液相色譜法（HPLC)多使用反相色譜法，本文主要以反相為例講解。1.液相色譜柱的選擇????? 原料藥生產對產品的純度和雜質含量的要求非常苛刻，要求檢測使用的色譜柱有較高的理論塔板數，能提
藥品研發中HPLC液相色譜柱的選擇和流動相的優化
分析方法的開發主要包括色譜柱的選擇、流動相的選擇、檢測波長的選擇和梯度的優化幾個方面。目前高效液相色譜法（HPLC)多使用反相色譜法，本文主要以反相為例講解。 1.液相色譜柱的選擇 原料藥生產對產品的純度和雜質含量的要求非常苛刻，要求檢測使用的色譜柱有較高的理論塔板
關于HPLC的流動相，十個你不知道的“坑”
流動相相當于液相的血液，在使用過程中會有各種需要注意的事項。其中有些“坑”千萬要注意。加入有機溶劑之后測量移動相酸堿度 校準pH計，得到水溶液的正確pH回讀值——您要驗證的緩沖液是含水的。如果你用有機添加劑測量pH值，得到的pH值會與添加有機溶劑之前的值不同。 然而，最重要的一點是要保持一致
反相HPLC平衡柱子時每換一次流動相都會出峰
基線的穩定只是相對穩定的流動相，所以這是很正常的。
HPLC常見問題和解決方法流動相正常，但沒有壓力顯示
? 流動相流動正常，但沒有壓力顯示原?因解決方法1、儀表損壞1、更換儀表2、壓力傳感器損壞2、更換壓力傳感器
流動相脫氣
流動相脫氣對于避免HPLC系統出問題，順利得到一個理想的數據是一個很有效的措施。HPLC系統內是不能夠有氣泡存在的。HPLC泵在輸送液體時要產生很大的壓力，由于氣體的壓縮比與液體相比大的多，因而當氣泡存在時，你將觀察到瞬間的流速降低和系統壓力下降。如果這個氣泡足夠大，液相泵將不能輸送任何溶劑，而且如