分子生物學技術診斷瘧原蟲的方法
PCR和核酸探針已用于瘧疾的診斷,分子生物學檢測技術的最突出的優點是對低原蟲血癥檢出率較高。用核酸探針檢測惡性瘧原蟲,其敏感性可達感染紅細胞內0.0001%的原蟲密度。國內學者采用套式PCR技術擴增間日瘧原蟲 SSU rRNA基因120bp的特定片段,其敏感性達0.1原蟲/μl血。......閱讀全文
分子生物學技術診斷瘧原蟲的方法
PCR和核酸探針已用于瘧疾的診斷,分子生物學檢測技術的最突出的優點是對低原蟲血癥檢出率較高。用核酸探針檢測惡性瘧原蟲,其敏感性可達感染紅細胞內0.0001%的原蟲密度。國內學者采用套式PCR技術擴增間日瘧原蟲 SSU rRNA基因120bp的特定片段,其敏感性達0.1原蟲/μl血。
瘧原蟲的病原學診斷方法
厚、薄血膜染色鏡檢是目前最常用的方法。從受檢者外周血液中檢出瘧原蟲是確診的最可靠依據,最好在服藥以前取血檢查。取外周血制作厚、薄血膜,經姬氏或瑞氏染液染色后鏡檢查找瘧原蟲。薄血膜中瘧原蟲形態完整、典型,容易識別和鑒別蟲種,但原蟲密度低時,容易漏檢。厚血膜由于原蟲比較集中,易檢獲,但染色過程中紅細胞溶
瘧原蟲病原學診斷方法
厚、薄血膜染色鏡檢是目前最常用的方法。從受檢者外周血液中檢出瘧原蟲是確診的最可靠依據,最好在服藥以前取血檢查。取外周血制作厚、薄血膜,經姬氏或瑞氏染液染色后鏡檢查找瘧原蟲。薄血膜中瘧原蟲形態完整、典型,容易識別和鑒別蟲種,但原蟲密度低時,容易漏檢。厚血膜由于原蟲比較集中,易檢獲,但染色過程中紅細胞溶
如何診斷惡性瘧原蟲?
主要靠外周血涂片檢查。 間日瘧原蟲用磷酸氯喹及磷酸伯氨喹治療,惡性瘧原蟲用氯喹,對抗氯喹株則宜用青蒿素類藥物、奎寧、咯萘啶、磺胺多辛和乙胺嘧啶等聯合用藥。
分子生物學實驗診斷技術
一、酸雜交技術檢驗方法建立的基本要素是特異性和靈敏度,在復雜的物體中,使無法感覺的特定物質進入人類的觀察范圍。核酸雜交檢測技術就是利用核酸堿基嚴格配對的特異性,核酸標記物的靈敏度而建立的檢測核酸結構與功能的方法。該法建立以來已有二十年,目前研究實驗室用得多,臨床實驗室用得較少,除成本高外,關鍵是操作
口蹄疫分子生物學診斷技術
近年來,由于分子生物學技術的迅速發展及其在FMD診斷中的應用,建立了各種FMD的分子生物學診斷技術,主要包括以下幾種方法,核酸雜交、等電點聚焦電泳、寡核苷酸指紋圖譜分析、聚丙烯酰胺凝膠電泳、聚合酶鏈式反應、單克隆抗體技術等。(1)核酸探針 核酸探針即應用FMD的cDNA克隆片段,用32P或生物素等標
分子生物學實驗診斷技術
一、酸雜交技術檢驗方法建立的基本要素是特異性和靈敏度,在復雜的物體中,使無法感覺的特定物質進入人類的觀察范圍。核酸雜交檢測技術就是利用核酸堿基嚴格配對的特異性,核酸標記物的靈敏度而建立的檢測核酸結構與功能的方法。該法建立以來已有二十年,目前研究實驗室用得多,臨床實驗室用得較少,除成本高外,關鍵是操作
分子生物學實驗診斷技術(一)
一、核酸雜交技術????? ? 檢驗方法建立的基本要素是特異性和靈敏度,在復雜的物體中,使無法感覺的特定物質進入人類的觀察范圍。核酸雜交檢測技術就是利用核酸堿基嚴格配對的特異性,核酸標記物的靈敏度而建立的檢測核酸結構與功能的方法。該法建立以來已有二十年,目前研究實驗室用得多,臨床實驗室用得較少,除成
豬丹毒分子生物學診斷技術
? 常規細菌培養檢測豬丹毒至少要3天,鑒定血清型大約要lo天,而這種PCR法可在5h內完成。它使用兩步擴增法,先用高度特異性引物組M0101-M0102進行初步擴增之后,再添加4種特異性寡核苷酸引物組對4種不同血清型豬丹毒的16SrRNA序列進行擴增。???? rRNA基因簇包括16SrRNA、23
分子生物學實驗診斷技術(二)
(三)Northern blot用于RNA分析,電泳條件與轉膜方法與Southern blot不同外,RNA不必變性與中和,電泳時加電醛防止RNA發夾結構形成。其它步驟相同。為了防止RNase水解需分析的mRNA,盡可能將器皿在160-180℃干熱滅菌8小時以上,也可加0.1%焦碳酸二乙酯(DEPC
瘧原蟲免疫學診斷的措施
(1)循環抗體檢測:常用的方法有間接熒光抗體試驗、間接血凝試驗和酶聯免疫吸附試驗等。由于抗體在患者治愈后仍能持續一段時間,且廣泛存在著個體差異,因此檢測抗體主要用于瘧疾的流行病學調查、防治效果評估及輸血對象的篩選,而在臨床上僅作輔助診斷用。(2)循環抗原檢測:利用血清學方法檢測瘧原蟲的循環抗原能更好
布氏桿菌病分子生物學診斷技術
? 隨著分子生物學的迅速發展出現了分子雜交技術,通過分析布氏桿菌的遺傳物質而達到特異、敏感的檢出和鑒定的目的。Russell等采用生物素標記牛布氏桿菌S19DNA作為探針來檢測布氏桿菌病,對布氏桿菌屬DNA進行分子雜交,其結果全部為陽性,證實有較高的靈敏度和特異性。近年來,國外學者運用PCR技術成功
絕對干貨分享:《瘧原蟲檢測技術》
絕對干貨分享:《瘧原蟲檢測技術》
《瘧疾的診斷》解讀
本標準規定了瘧疾診斷依據、診斷原則、診斷標準和鑒別診斷,適用于各類醫療機構和各級疾病預防控制機構對瘧疾的診斷。? 本次修訂與2006年版相比主要做了如下改變:? 1.為了和世界衛生組織的通用文件相一致,修改了原標準術語和定義中的“帶蟲者carrier”,將其改為“無癥狀感染者Asymptomat
梅毒分子生物學實驗診斷方法的研究進展
裴瑞青綜述;曾鐵兵,吳移謀審校(南華大學病原生物學研究所,衡陽421001)摘要:梅毒的臨床表現十分復雜,診斷主要依靠實驗室檢測方法。傳統的梅毒實驗室診斷方法暴露出諸多缺點,本文綜述了國外一些分子生物學技術用于梅毒實驗室診斷的方法(以基因工程重組抗原的血清學方法和聚合酶鏈反應)的研究進展。關鍵詞:梅
瘧原蟲鏡檢技術經驗交流
瘧疾是由瘧原蟲寄生于人體所發生的一種寄生蟲性傳染病,俗稱“打擺子”,屬于我國《傳染病防治法》規定的乙類傳染病,近年來隨著國內人口的流動、外出非洲等國家務工或旅游人員的增多,輸入性瘧疾病例也有增多的風險,但原發性病例在減少,幾乎每年都有輸入性瘧疾的報告,這就給臨床醫生和實驗室檢驗人員帶來更大的挑戰,對
瘧疾的診斷方法介紹
1、流行病學 有在瘧疾流行區居住或旅行史,近年有瘧疾發作史或近期曾接受過輸血的發熱患者都應被懷疑。 2、臨床表現 典型的周期性寒戰、發熱、出汗可初步診斷。不規律發熱,而伴脾、肝大及貧血,應想到瘧疾的可能。兇險型多發生在流行期中,多急起,高熱寒戰,昏迷與抽搐等。流行區嬰幼兒突然高熱、寒戰、昏
概述斑疹傷寒病毒的分子生物學診斷方法
1.斑疹傷寒—DNA探針(DNA Probe) DNA探針是用DNA制備的診斷試劑,用于檢測或鑒定特定的細菌,方法是用一段已標記的特定的DNA片段(探針)與標本中已變性的細菌DNA雜交,通過測定是否發生雜交反應來達到檢測目的,由于此探針是以細菌專有的特異性基因片斷制備,故特異性很高。用DNA探針
LAMP方法通過微波照射檢測瘧原蟲
圖片:Blockthermostat BT 200微波照射是有前景的平臺,一套程序通過微波照射從人血和瘧原蟲體內快速可靠地提取核酸。雖然血液涂片的顯微鏡檢仍被視為診斷瘧疾感染的金標準,但是顯微鏡檢常檢測不到低密度感染,且要求高度技巧。德國蒂賓根大學的科學家與剛果共和國的同行合作收集了嚴重惡性瘧原蟲感
基因芯片技術在瘧原蟲研究中的應用
基因芯片技術的出現有力地促進了人們對瘧原蟲生物學的認識。早在2000年,惡性瘧原蟲的基因組測序尚未完成, Hayward等根據惡性瘧原蟲綠豆核酸酶基因文庫, 制成“鳥槍”DNA ( shotgunDNA)芯片,分析了瘧原蟲滋養體和配子體之間的基因表達差異,為瘧原蟲發育阻斷劑和疫苗研究提供了有益線
分子生物學技術的分類
目前,常用的分子生物學技術有如下幾種[1]: PCR單鏈構象多態性分析 PCR-單鏈構象多態性分析(PCR -single strand conformation analysis,PCR -SSCP) 是近年來在基因突變檢測中運用最廣泛的方法之一。PCR -SSCP 技術憑借突變可引起單鏈
分子生物學技術的應用
分子生物學技術:可應用于遺傳性疾病的研究和病原體的檢測及腫瘤的病因學、發病學、診斷和治療等方面的研究提高到了基因分子水平。 生物學定義:生物學是研究生命現象和生物活動規律的科學。 據研究對象分為動物學、植物學、微生物學、古生物學等;依研究內容,分為分類學、解剖學、生理學、細胞學、分子生物學、
分子生物學技術的分類
目前,常用的分子生物學技術有如下幾種 : PCR- 單鏈構象多態性分析(PCR- single strand conformation analysis,PCR- SSCP) 是近年來在基因突變檢測中運用最廣泛的方法之一。PCR- SSCP 技術憑借突變可引起單鏈DNA三級構象改變,通過觀察單鏈DN
分子生物學概念的發展與檢驗診斷—分子生物學到生物...
分子生物學概念的發展與檢驗診斷—分子生物學到生物... 經過了免疫學的熱潮,20世紀中葉開始興起了又一門新的學科“分子生物學”。人們懷著滿腔熱忱,期待這一學科能夠對那些機理不清的疾病予以新的認識。眾多科學家經過了半個世紀的努力,終于用分子生物學方法整理出一批單基因病等和基因相關的疾病。隨著基因基礎
基因診斷的分子生物學基礎(二)
三、RNA分子結構 (一)RNA類型 細胞內含有三類主要的RNA,即核蛋白體RNA(Ribosomal RNA, rRNA)、轉運RNA(Transfer RNA,tRNA)及信使(Messenger RNA,mRNA)。 1.rRNA。是核蛋白體的組成部分,含量最多,約占細胞內全部RNA
基因診斷的分子生物學基礎(一)
基因診斷操作的對象為基因或其片段。基因是遺傳學上的一個概念,是在染色體上占有一定的位置,表現一定功能的基本單位。基因的物質基礎是脫氧核糖核酸(DNA)(有些病毒的基因是核糖核酸,RNA)。原核細胞(如細菌和病毒)的基因單位較小,其排布一般是連續的。真核細胞的基因一般較大,其排布是不連續的,它被稱為插
瘧原蟲的形態鑒別
?隨著現在醫學水平的提高,寄生蟲病得到了良好的控制。但由于人們飲食的不注意,各省(尤其沿海城市)感染寄生蟲病的案例層出不窮。今天我們一起來看一下關于瘧原蟲的各期形態。?? ?四種瘧原蟲在紅細胞內的各期形態不盡相同,是診斷、鑒別各種瘧原蟲的依據。瑞氏染色或姬氏染色后瘧原蟲的細胞質呈藍色,細胞核呈紅色,
殺死瘧原蟲的新方法:居然是細菌!
?中科院上海植生生態所等發現能在按蚊中進行持續跨代傳播的新共生細菌,能高效驅動抗瘧效應分子快速散播到整個蚊群中,使按蚊成為無效的瘧疾媒介,實現從源頭上阻斷瘧疾傳播。圖片由中科院上海植生生態所提供。 作為一種古老的疾病,瘧疾已經有幾千年的歷史。即使是在21世紀的今天,包括非洲、東南亞、拉丁美
輸入性瘧疾診斷標準有了修訂版
日前,國家衛計委發布強制性衛生行業標準《瘧疾的診斷》(WS 259-2015,代替 WS 259—2006),2016年6月1日起施行,原WS 259-2006同時廢止。 隨著《中國消除瘧疾行動計劃(2010-2020年)》執行推進,原標準部分診斷內容或指標需要修訂,新的檢測方法需要增加。
分子生物學技術都包括哪些技術
分子生物學技術: PCR、分子克隆、核酸電泳、瓊脂糖凝膠電泳測序、DNA, RNA 提取、轉化外源DNA、體外轉錄、逆轉錄、cDNA文庫構建、原位雜交、酵母雙雜交、差減雜交、扣除雜交、藍白斑篩選、抗生素篩選 、基因工程技術大部分都是依據分子生物學原理設計出來的。 分子生物學的基本含義