原位PCR配置
主機一臺，個人存儲卡一張，原位PCR適配器 1.適用于96×0.2ml PCR管或77×0.5ml PCR管或8×12PCR板不需要更換模塊； 2.反應槽溫控范圍：4-99℃； 3.控溫精度：±0.2℃； 4.模塊均一性：≤±0.5℃； 5.溫控速率：升3℃/秒,降2℃/秒，速率可調； 6.程序數目：儀器可存100個，配單獨的個人卡，卡上可存10個，方便插入其他同類機器上直接調用預設好的程序； 7.設有斷電自動重啟選項 8. RS-232接口和打印機接口 9. 編程模式：梯度功能、可調升降溫速率、時間和溫度增幅、孵育模式、原位模式、鏈接功能、暫停功能； 10. 帶熱蓋，熱蓋溫度和高度可調，控溫范圍：37-110℃； 11.尺寸(長x 寬x 高) cm：26 x 41 x 27 12.重量(kg)：12.4 13.最大功率要求: 500 W 14.電源：所有型號均為230 V/50-60 Hz......閱讀全文
怎樣設定原位PCR對照實驗
設立陽性對照，即用已知陽性細胞或組織切片做陽性標志，實驗結果應呈陽性，表明實驗方法準確可靠。同時要設立陰性對照，即用已知陰性細胞或組織切片作陰性對照，實驗結果應呈陰性，表示實驗方法無假陽性結果；也可以用實驗細胞或組織切片，不加標記的dUTP（直接法），PCR結果顯示陰性，或不加引物或不加TaqD
配置PCR反應混合液為什么混合配置再分裝
原理是：先將含有所需擴增分析序列的靶DNA雙鏈經熱變性處理解開為兩個寡聚核苷酸單鏈，然后加入一對根據已知DNA序列由人工合成的與所擴增的DNA兩端鄰近序列互補的寡聚核苷酸片段作為引物，即左右引物。此引物范圍就在包括所欲擴增的DNA片段，一般需20-30個堿基對，過少則難保持與DNA單鏈的結合。引物與
配置PCR液時的注意方法
在做克隆鑒定的時候經常需要在酶切鑒定前進行PCR鑒定，每次配置PCR反應液很繁瑣，可以將其配置類似kit的形式，按你需要的反應體系列表，然后放大100倍配置100×主反應液（100次反應），其中含buffer，Mg2＋，dNTPs，但不含引物和Taq酶，然后可以10×分裝或一管儲存在－20度，在需要
qRTPCR中體系的配置
qRT-PCR要求對每個樣品做三個平行體系。一般來說，每個最終的反應體系為10μl（然而試劑盒上推薦的體系為25 μl，但這樣既浪費酶，用中號槍頭加樣還降低了重復性）。最好用10 μl小號進口槍頭加入。配體系時，一般先將水、MIX及引物混成3倍體積的總體系（此時應給每管留1.5ul的損耗，另外有些儀
普通PCR儀/梯度PCR儀/實時熒光定量PCR儀/原位PCR儀應用對比
PCR：聚合酶鏈式反應。是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。 PCR原理示意圖： 1589863475231958.jpg PCR儀的種類有：常規的普通PCR儀，梯度P
普通PCR儀/梯度PCR儀/實時熒光定量PCR儀/原位PCR儀應用對比
PCR：聚合酶鏈式反應。是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。PCR原理示意圖：PCR儀的種類有：常規的普通PCR儀，梯度PCR儀，原位PCR儀，實時熒光定量PCR儀四類！1、普通PCR儀一般把一次PCR
原位免疫PCR的IHC增敏方法
（一）基本原理Sano等（1992）率先利用基因工程的方法表達了A蛋白與鏈霉親和素的嵌合體分子獲得成功，建立了免疫PCR技術。這是一種新的抗原檢測系統，利用細胞工程和基因工程技術，巧妙地將抗原抗體反應的特異性同PCR的敏感性相結合，通過構建單克隆抗體與重組核酸的嵌合體分子，使得利用PCR技術檢測蛋白
逆轉錄酶原位－PCR－實驗
這一部分介紹了一種原位 PCR，特別是逆轉錄酶原位 PCR 的簡略方法。詳細討論了其中的每個實驗程序。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗方法原理原位 PCR 儀，蓋玻片，培養箱，濕盒，RT-PCR 試劑盒，Permount實驗材料組織樣品和細胞培養物試劑、試劑盒Nuc
逆轉錄酶原位－PCR－實驗
實驗方法原理 原位 PCR 儀，蓋玻片，培養箱，濕盒，RT-PCR 試劑盒，Permount實驗材料 組織樣品和細胞培養物試劑、試劑盒 Nuclear Fast Red甲醛緩沖液檢測溶液DEPC 處理的水PBSKH2P04二甲苯乙醇牛血清白蛋白SSC NBT BCIP 顯色劑胃蛋白酶DNA
原位PCR技術的定義和方法介紹
1.概述：原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR是Hasse等于1990年建立的，實驗用的標本是新鮮組織、石蠟包埋組織、脫落細胞、血細胞等.2.其基本方法為? ?
逆轉錄酶原位－PCR－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原位 PCR 儀，蓋玻片，培養箱，濕盒，RT-PCR 試劑盒，Permount 實驗材料 組織樣品和細胞培養物
原位聚合酶鏈式反應（in－situ－PCR）和原位反轉錄
一、儀器設備英國Thermo Hybaid原位PCR儀。二、操作流程（一）原位PCR步驟1、預處理： （1）切片常規脫蠟； （2）0.2mol/L HCl處理10min； （3）5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10min； （4）Nase消化組織37℃ 30min； （5）梯度酒精脫水，
DNA和RNA靶序列的原位PCR擴增實驗
實驗材料 樣品試劑、試劑盒 雙氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl儀器、耗材 加濕盒熱循環儀實驗步驟 1. ?將載有固定樣品的載玻片置105℃加熱塊上5~120 s。?2. ?載玻片放入含0.3%H2O2中，于37℃或室溫溫育過夜，以滅活內源性過氧化物酶活性，然后以
DNA和RNA靶序列的原位PCR擴增實驗
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術，就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。實驗材料樣品試劑、試劑盒雙氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl儀
原位聚合酶鏈式反應（in－situ－PCR）和原位反轉錄聚合酶...
原位聚合酶鏈式反應（in situ PCR）和原位反轉錄聚合酶鏈式反應原位聚合酶鏈式反應（in situ PCR）和原位反轉錄聚合酶鏈式反應（in situ RT-PCR）操作規程 （一）、儀器設備 英國Thermo Hybaid原位PCR儀。 （二）、操作流程 1、原位PCR步驟
原位免疫PCR的IHC增敏方法原理和操作流程
（一）基本原理Sano等（1992）率先利用基因工程的方法表達了A蛋白與鏈霉親和素的嵌合體分子獲得成功，建立了免疫PCR技術。這是一種新的抗原檢測系統，利用細胞工程和基因工程技術，巧妙地將抗原抗體反應的特異性同PCR的敏感性相結合，通過構建單克隆抗體與重組核酸的嵌合體分子，使得利用PCR技術檢測蛋白
原位PCR技術基本原理、類型、步驟和應用2
在科學研究中，每一項新技術的創立都會帶來一系列新的研究成果問世，從而推動著各學科的發展。縱觀形態研究領域，50年代電子顯微鏡引入形態學觀察領域，帶來了從細胞水平到亞細胞水平的深入研究；60-70年代，免疫組織化學與免疫細胞化學技術的廣泛應用，又將觀察的水平由亞細胞結構推向了蛋白質分子
原位PCR技術基本原理、類型、步驟和應用2
標本的制備原位PCR技術可應用于細胞懸液、細胞涂片、冰凍切片以及石蠟切片。相比較而言，以懸浮的完整細胞做原位PCR效果最好，石蠟切片效果最差。隨著技術方面的一些問題被解決，近年也有從石蠟切片中得到滿意的PCR效率的報道。效果不好的原因是多方面的，如：玻片上做PCR，熱傳導較差，熱對流不均勻，TaqD
原位PCR技術基本原理、類型、步驟和應用2
在科學研究中，每一項新技術的創立都會帶來一系列新的研究成果問世，從而推動著各學科的發展。縱觀形態研究領域，50年代電子顯微鏡引入形態學觀察領域，帶來了從細胞水平到亞細胞水平的深入研究；60-70年代，免疫組織化學與免疫細胞化學技術的廣泛應用，又將觀察的水平由亞細胞結構推向了蛋白質分子水平，使細胞內眾
一個完善PCR實驗室各分區功能及設備配置
PCR實驗室建設原則上應當設置4個區域：試劑儲存和準備區、標本制備區、擴增區、擴增產物分析區。根據使用儀器的功能，區域可適當合并。用實時熒光定量PCR儀，擴增區、擴增產物分析區可合并；采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀，則標本制備區、擴增區、擴增產物分析區可合并。? ? 各區功能必
羊源性成分核酸檢測PCR熒光探針試劑盒試劑配置
羊源性成分核酸檢測PCR-熒光探針試劑盒解決該情況的辦法是：ELISA試劑盒①用F（ab）2替代完整的IgG；②標本用聯有熱變性（63℃，10 min）IgG的固相吸附劑處理（將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有效）；③檢測抗原時，可以用等加入到標本稀釋液中，使RF降解。（2）補體ELISA系統中
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針，使用非放射檢測系統或放射自顯影系統，在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法，具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一，廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針，使用非放射檢測系統或放射自顯影系統，在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法，具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一，廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH) 是用標記的核酸探針，使用非放射檢測系統或放射自顯影系統，在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法，具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一，廣泛應
基本配置
杯凸儀放大鏡操作手冊
熒光原位雜交的熒光原位雜交
熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization，FISH）是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術，以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。探針首先與某種介導分子（reporter molecule）結
原位雜交儀原位雜交的意義
原位雜交：在研究DNA分子復制原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，能過氫鍵結合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點，應用帶有標記的（有放射性同位素，如3H、35S、32P、熒光素生物素、地高辛等非放射性物質）DNA或R
原位雜交儀—原位雜交試驗（一）
收集斑馬魚的胚胎，在Holfretor水中培養，到達所需要的發育時期時，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃保存，二十四小時后用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗，然后換成甲醇，在-20C 保存，待用（兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧水處理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養，可阻斷色素的形成）
原位雜交儀—原位雜交實驗（三）
原位雜交第三天 1） 用1ml含10%熱滅活血清的MABT溶液置換抗體溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時以上，最后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。 2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置
原位雜交儀—原位雜交實驗（二）
原位雜交第二天 1. 1）將探針回收，放于－20C保存（通常探針可重復使用十次左右）。 2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復一次。 3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。 4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復一次。