逆轉錄酶原位PCR實驗
實驗方法原理 原位 PCR 儀，蓋玻片，培養箱，濕盒，RT-PCR 試劑盒，Permount實驗材料 組織樣品和細胞培養物試劑、試劑盒 Nuclear Fast Red甲醛緩沖液檢測溶液DEPC 處理的水PBSKH2P04二甲苯乙醇牛血清白蛋白SSC NBT BCIP 顯色劑胃蛋白酶DNA 酶Taq DNA 聚合酶RNA 酶 inhibitorDNA 酶緩沖液dUTP抗地高辛的偶聯物PCR 引物儀器、耗材 原位 PCR 儀蓋玻片培養箱濕盒RT-PCR 試劑盒Permount實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液Nuclear Fast Red10%(體積分數）甲醛緩沖液 (Polyscientific)檢測溶液（0.1mol/LTris-HCl、pH9.5，0.1mol/LNaCl)DEPC 處理的水磷酸鹽緩沖液（PBS)(137 mmol/LNaCl，2.7 mmolKCl,10 mmol/LNa2 HPO4)2 mmo......閱讀全文
逆轉錄酶原位－PCR－實驗
實驗方法原理 原位 PCR 儀，蓋玻片，培養箱，濕盒，RT-PCR 試劑盒，Permount實驗材料 組織樣品和細胞培養物試劑、試劑盒 Nuclear Fast Red甲醛緩沖液檢測溶液DEPC 處理的水PBSKH2P04二甲苯乙醇牛血清白蛋白SSC NBT BCIP 顯色劑胃蛋白酶DNA
逆轉錄酶原位－PCR－實驗
這一部分介紹了一種原位 PCR，特別是逆轉錄酶原位 PCR 的簡略方法。詳細討論了其中的每個實驗程序。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗方法原理原位 PCR 儀，蓋玻片，培養箱，濕盒，RT-PCR 試劑盒，Permount實驗材料組織樣品和細胞培養物試劑、試劑盒Nuc
逆轉錄酶原位－PCR－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原位 PCR 儀，蓋玻片，培養箱，濕盒，RT-PCR 試劑盒，Permount 實驗材料 組織樣品和細胞培養物
間接原位PCR（原位雜交PCR）實驗
實驗材料 組織或細胞樣品試劑、試劑盒 SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脫脂奶粉Denhardt’s 液SDS變性的鮭魚精DNARnaseDTT乙醇儀器、耗材 玻片石蠟膜橡皮泥濕盒實驗步驟 一、預雜交?1. ? 試劑與配制?2×SSC?50%去離子甲酰胺：用4×SSC配制（v/v）?預雜交液：2×SSC，5%硫
原位PCR實驗步驟
原位PCR實驗步驟，原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。一、組織切片和細胞樣品的制備試劑與配置10%福爾馬
原位PCR實驗相關
所需設備 原位PCR反應是在載玻片的平面上進行，保持水平可以使反應各組分均勻地分布在組織切片上，所以須在原位PCR儀上進行，該儀器不但可以使載玻片保持水平，而且還可以給載玻片進行均勻地加熱，保證擴增反應的順利進行。 探針種類 與原位雜交一樣，檢測原位PCR結果的探針可以是DNA探針，也可以
原位PCR實驗的大致過程
大致過程 實驗用的標本是新鮮組織、石蠟包埋組織、脫落細胞、血細胞等。其基本方法為多聚甲醛固定組織或細胞，蛋白酶消化處理組織；在組織細胞片上滴加PCR反應液進行擴增，覆蓋并加液體石蠟后，在原位PCR儀上進行PCR循環擴增，PCR擴增結束后用標記的探針進行原位雜交，最后顯微鏡觀察結果。 實驗玻片
原位PCR實驗的基本方法
① 固定組織或細胞：將組織細胞固定于預先用四氟乙烯包被的玻片上，并用多聚甲醛處理，再滅活除去細胞內源性過氧化物酶。 ②蛋白酶K消化處理：用60ug/ml的蛋白酶K將固定好的組織細胞片55℃消化處理2h后，96℃2min以滅活蛋白酶K。 ③PCR擴增：在組織細胞片上，加PCR反應液，覆蓋并加液
間接原位PCR（原位雜交PCR）
與直接原位PCR所不同的是，靶基因在擴增時不進行標記基團的摻入，而是標記一段與擴增片段互補的探針，在擴增結束后，應用此探針進行原位雜交。因此，此處主要介紹原位雜交，其余方法同原位PCR。實驗材料組織或細胞樣品試劑、試劑盒SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脫脂奶粉Denhardt’s 液SDS變性的鮭魚精DNAR
間接原位PCR（原位雜交PCR）
間接原位PCR（原位雜交PCR） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 組織或細胞樣品 試劑、試劑盒
間接原位PCR（原位雜交PCR）
與直接原位PCR所不同的是，靶基因在擴增時不進行標記基團的摻入，而是標記一段與擴增片段互補的探針，在擴增結束后，應用此探針進行原位雜交。因此，此處主要介紹原位雜交，其余方法同原位PCR。一、預雜交1. 試劑與配制2×SSC50%去離子甲酰胺：用4×SSC配制（v/v）預雜交液：2×SSC，5%硫酸葡
原位PCR
About in situ PCR?(Applied Biosystems)Basic information about in situ PCR and its applications.The?In Situ?PCR: Amplification and Detection in a Cellu
原位PCR
實驗概要原位PCR技術自上世紀90年代初建立至今，科學家就一直對原位PCR的技術和應用進行研究，目前該項技術已日臻完善。原位PCR既能分辨帶有靶序列的細胞又能標出靶序列在細胞內的位置，在分子和細胞水平上研究疾病的發病機理、臨床過程以及病理的轉歸，其特異性和敏感性均高于一般PCR技術。在病毒學、病理學
怎樣設定原位PCR對照實驗
設立陽性對照，即用已知陽性細胞或組織切片做陽性標志，實驗結果應呈陽性，表明實驗方法準確可靠。同時要設立陰性對照，即用已知陰性細胞或組織切片作陰性對照，實驗結果應呈陰性，表示實驗方法無假陽性結果；也可以用實驗細胞或組織切片，不加標記的dUTP（直接法），PCR結果顯示陰性，或不加引物或不加TaqD
原位PCR和原位RT
（一）、儀器設備?英國Thermo Hybaid原位PCR儀?。（二）、操作流程1、原位PCR?步驟1）預處理：（1）切片常規脫蠟；（2）0.2mol/L HCl處理10min；（3）5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10min；（4）Nase消化組織37℃ 30min；（5）梯度酒精脫水，室溫干燥
直接原位PCR（In－situ－PCR）
原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。一、組織切片和細胞樣品的制備試劑與配置10%福爾馬林；二甲苯；PBS操
直接原位PCR（In－situ－PCR）
原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。一、組織切片和細胞樣品的制備試劑與配置10%福爾馬林；二甲苯；PBS操
原位PCR儀
用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀，如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性，使PCR反應體系滲透到組織和細胞中，在細胞的靶DNA所在的位置上進行基因擴增，不但可以檢測到靶DNA，又能標出靶序列在細胞內的位置，于分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和
直接原位PCR
實驗方法原理 原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。實驗材料 細胞或組織樣品試劑、試劑盒 福爾馬林二甲苯PB
原位PCR儀
用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀，如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性，使PCR反應體系滲透到組織和細胞中，在細胞的靶DNA所在的位置上進行基因擴增，不但可以檢測到靶DNA，又能標出靶序列在細胞內的位置，于分子和細胞水平上研究疾病的發病機
原位PCR定義
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術，就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR既能分辨鑒定帶有靶序列的細胞，又能標出靶序列在細胞內的位置，于分子和細胞水平上研究疾
原位PCR配置
主機一臺，個人存儲卡一張，原位PCR適配器 1.適用于96×0.2ml PCR管或77×0.5ml PCR管或8×12PCR板不需要更換模塊； 2.反應槽溫控范圍：4-99℃； 3.控溫精度：±0.2℃； 4.模塊均一性：≤±0.5℃； 5.溫控速率：升3℃/秒,降2℃/秒，速率可調；
直接原位PCR
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法
原位PCR技術
除了經典的原位雜交外。原位雜交可與其他組織化學技術相結合，或與其他分子生物學技術相結合，使其應用范圍擴大，成為更有應用價值的技術。PCR技術是根據生物體內DNA復制的特點而建立的在體外經酶促反應將特定DNA序列進行高效和快速擴增的技術，它可將單一拷貝或低拷貝的待測核酸以指數形式擴增而達到用常規方法可
原位PCR和原位RTPCR操作規程
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術,就是在組織細胞里進行PCR反應,它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點,是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。一、儀器設備英國Thermo Hybaid原位PCR儀。二、操作流程1、原位PCR步驟（1）預處理
原位PCR和原位RTPCR操作規程
（一）、儀器設備 英國Thermo Hybaid原位PCR儀。 （二）、操作流程 1、原位PCR步驟 1）預處理： （1）切片常規脫蠟； （2）0.2mol/L HCl處理10min； （3）5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10m
原位PCR與PCR的區別
PCR是提取細胞或組織中的DNA進行基因擴增反應，而原位PCR是保持細胞或組織的完整性，使PCR反應體系滲透到組織和細胞中，在細胞的靶DNA所在的位置上進行基因擴增，不但可以檢測到靶DNA，而且還可以了解靶DNA存在于何種細胞中，更有利于探討靶DNA與細胞之間的關系。 PCR所采用的反應體系能
原位PCR的概念
原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和 高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR是Hasse等于1990年建立的，實驗用的標本是新鮮組織、石蠟包埋組織、脫落 細胞、血細胞等.?
DNA和RNA靶序列的原位PCR擴增實驗
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術，就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。實驗材料樣品試劑、試劑盒雙氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl儀
DNA和RNA靶序列的原位PCR擴增實驗
實驗材料 樣品試劑、試劑盒 雙氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl儀器、耗材 加濕盒熱循環儀實驗步驟 1. ?將載有固定樣品的載玻片置105℃加熱塊上5~120 s。?2. ?載玻片放入含0.3%H2O2中，于37℃或室溫溫育過夜，以滅活內源性過氧化物酶活性，然后以