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  • BARD1泛素化核小體在促進同源重組修復過程中的重要作用

    DNA雙鏈斷裂(DNA double-strand breaks,DSBs)是真核細胞中最為嚴重的DNA損傷類型之一,單個裸露的DSB即可誘發細胞凋亡。DSB主要通過非同源末端連接(NHEJ,non-homologous end-joining)和同源重組(HR,homologous recombination)兩種方式進行修復。HR修復發生在S和G2期,受損的DNA以姐妹染色單體上的同源序列為模板進行修復,因此,HR修復是十分精確的修復方式,一旦發生缺陷將導致基因組不穩定,引起包括腫瘤在內的多種疾病發生。 乳腺癌易感基因BRCA1編碼的蛋白促進DSB選擇精確的HR修復方式,并對于維持基因組穩定性至關重要。攜帶BRCA1種系突變的個體一生累計乳腺癌發病風險高達80%,卵巢癌發病風險也高達40%~60%。近年來在攜帶BRCA1或BRCA2突變的卵巢癌和乳腺癌治療中得到廣泛應用的PARP抑制劑(PARPi)就是利用“合成致死”......閱讀全文

    核小體的臨床意義介紹

      抗核小體抗體比抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體更早出現于系統性紅斑狼瘡的早期,并且特異性較高。陽性率為50-90%,特異性>98%。每個核小體單位包括200bp左右的DNA超螺旋和一個組蛋白八聚體及一個分子H1;組蛋白八聚體構成核小體的盤狀核心結構;146bp的DNA分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體1.

    關于核小體的實驗研究介紹

      早在1956年為雙螺旋模型提供X衍射證據的Wilkins和另一位科學家Vittorio Luzzati對染色質進行了X衍射研究,發現染色質中具有間隔為10 nm的重復性結構。蛋白質和DNA本身的結構從來不會表現出這種重復性。推測可能是組蛋白和DNA的結合方式迫使DNA折疊或纏繞成具有10 nm周

    核小體的基本原理

    人們接著用化學交聯、高鹽分離組蛋白,以及X衍射等方法進一步研究組蛋白多聚體的結構、排列以及怎樣和DNA結合的,從而建立了核小體模型。1984年Klug和Butler進行了修正。核小體的構造可用圖表示:每一個核小體結合的DNA總量為200bp左右,一般在150~250變化范圍(micrococcal

    核小體核心的基本概念

    中文名稱核小體核心英文名稱nucleosome core定  義由4種組蛋白各兩分子組成的八聚體結構。應用學科遺傳學(一級學科),細胞遺傳學(二級學科)

    核小體的概念和結構特點

    核小體是由DNA和組蛋白形成的染色質基本結構單位。每個核小體由146bp的DNA纏繞組蛋白八聚體1.75圈形成。核小體核心顆粒之間通過50bp左右的連接DNA相連。H1結合在盤繞在八聚體上的DNA雙鏈開口處,核小體的形狀類似一個扁平的碟子或一個圓柱體,此時DNA的長度壓縮7倍,稱染色質纖維。染色質就

    核小體的基本結構及特點

    核小體是由DNA和組蛋白形成的染色質基本結構單位。每個核小體由146bp的DNA纏繞組蛋白八聚體1.75圈形成。核小體核心顆粒之間通過50bp左右的連接DNA相連。H1結合在盤繞在八聚體上的DNA雙鏈開口處,核小體的形狀類似一個扁平的碟子或一個圓柱體,此時DNA的長度壓縮7倍,稱染色質纖維。染色質就

    核小體的基本單位

    核小體是染色體的基本單位,是染色質的基本結構亞基。生物學意義揭示了DNA作為遺傳物質穩定性的結構特征;確認了堿基互補配對原則。

    核小體的結構及功能特點

    核小體是由DNA和組蛋白形成的染色質基本結構單位。每個核小體由146bp的DNA纏繞組蛋白八聚體1.75圈形成。核小體核心顆粒之間通過50bp左右的連接DNA相連。H1結合在盤繞在八聚體上的DNA雙鏈開口處,核小體的形狀類似一個扁平的碟子或一個圓柱體,此時DNA的長度壓縮7倍,稱染色質纖維。染色質就

    ?DNA損傷修復信號通路BARD1基因的臨床解釋

    這個基因編碼一種與BRCA1的N端區域相互作用的蛋白質。除了在體內和體外結合BRCA1的能力外,它還與BRCA1最保守的2個區域具有同源性:N端環基序和C端BRCT域。環基序是一個富含半胱氨酸的序列,存在于多種調節細胞生長的蛋白質中,包括腫瘤抑制基因和顯性原癌基因的產物。該蛋白還含有3個串聯錨蛋白重

    核小體的研究進展的介紹

      國內已有少數醫院開展了AnuA的檢測,也已發表了數篇相關報道。有文獻報道,以核小體多肽特異性抗原治療鼠狼瘡模型的研究發現,核小體多肽特異性抗原可以抑制TH細胞和B細胞的激活,從而為研究SLE的發病機制治療帶來了新的曙光[20]。但需要指出的是:AnuA的檢測對SLE的診斷有重要意義,不同的核小體

    抗核小體抗體檢測的原理

      將高度純化的核小體靶抗原固定于微孔板上,患者血清中的抗核小體抗體可與之結合,通過辣根過氧化物酶(HRP)標記的第二抗體(抗人IgG)反應及酶底物/色原顯色,即可檢測此抗體。

    抗核小體抗體的檢測及應用

      凋亡細胞是核小體的重要來源,當SLE患者的吞噬細胞對凋亡細胞的清除能力受損或降低,導致核小體在患者體內大量存積,多聚核小體與活化的單核細胞結合后被抗原遞呈細胞呈遞給CD4+Th2細胞,Th2細胞增殖活化,激活B細胞產生抗核小體抗體(AnuA)。  AnuA特異性高,與SLE病情活動性相關,通常采

    關于核小體的檢測技術的介紹

      許多不同的技術已被用于檢測AnuA,除了LE細胞試驗以外,還有染色質包被的串珠乳膠凝集試驗,以及免疫沉淀(用天然組織蛋白重組酸萃取的組織部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脫氧核苷蛋白”作抗原研制出一種孵育在1M生理鹽水中的染色質中的預備品,但未得到明確鑒定。后期報道已有更好的方法來鑒定

    核小體模型的建立基礎和研究

    人們接著用化學交聯、高鹽分離組蛋白,以及X衍射等方法進一步研究組蛋白多聚體的結構、排列以及怎樣和DNA結合的,從而建立了核小體模型。1984年Klug和Butler進行了修正。核小體的構造可用圖表示:每一個核小體結合的DNA總量為200bp左右,一般在150~250變化范圍(micrococcal

    核小體核心顆粒的基本概念

    中文名稱核小體核心顆粒英文名稱nucleosome core particle定  義由長度為146 bp的DNA區段與各兩分子的H3/H4/H2A/H2B組蛋白八聚體組成。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)

    關于核小體染色體的基本介紹

      染色體是一個獨立行動的結構單位,在細胞分裂時傳遞給子細胞一份染色體拷貝。因此每條染色體必須能復制,所復制的拷貝最后分離并被正確地分配到兩個子細胞中。這些基本功能是由真核生物染色體三種特定的DNA序列所控制,即DNA復制起點、著絲粒和端粒。  從DNA到染色體不論是形態還是長度都相差很大。人類最長

    關于核小體的注意事項的介紹

      AnuA被定義為與組織蛋白暴露在染色質的部分發生反應的抗體,在染色質內找到的DNA結構,或者一個由天然組織蛋白?DNA復合物構成的表位,特別要排除的是抗體與非組織蛋白的反應和隱藏在染色質內的組織蛋白表位的反應,以及與DNA結構如A、C以及Z構型的反應。這些在染色質中均不存在,因此,并不是所有組織

    單聚及二聚核小體的純化實驗

    實驗材料寡聚核小體中等或大的寡聚核小體成分試劑、試劑盒CaCl2MgCl2微球菌核酸酶EDTA甘油梯度緩沖液儀器、耗材超速離心機聚異質同晶管梯度制備裝置實驗步驟1. 解凍約 1 ml 寡聚核小體(約 1~2 mg/ml 比較理想),預熱到 30℃。2. 加入 100 mmol/L CaCl2?至終濃

    抗核小體抗體檢測的臨床意義

      1.抗核小體抗體近年來已成為系統性紅斑狼瘡(SLE)的標志抗體,其敏感性高、特異性強,對SLE診斷有越來越重要的意義。AnuA對SLE的敏感性為60%~80%,特異性為97%~99%。2.AnuA多見于活動性狼瘡,特別是狼瘡腎,尤其對抗dsDNA抗體、抗DNP抗體、抗Sm抗體、抗組蛋白抗體陰性的

    單聚及二聚核小體的純化實驗

    實驗材料寡聚核小體中等或大的寡聚核小體成分試劑、試劑盒CaCl2MgCl2微球菌核酸酶EDTA甘油梯度緩沖液儀器、耗材超速離心機聚異質同晶管梯度制備裝置實驗步驟1. 解凍約 1 ml 寡聚核小體(約 1~2 mg/ml 比較理想),預熱到 30℃。2. 加入 100 mmol/L CaCl2?至終濃

    單聚及二聚核小體的純化實驗

    實驗方法原理 實驗材料 寡聚核小體中等或大的寡聚核小體成分試劑、試劑盒 CaCl2 MgCl2 微球菌核酸酶EDTA甘油梯度緩沖液儀器、耗材 超速離心機聚異質同晶管梯度制備裝置實驗步驟 1. 解凍約 1 ml 寡聚核小體(約 1~2 mg/ml 比較理想),預熱到 30℃。2. 加入 100 mmo

    人類遺傳物質中首次發現前核小體

      據美國物理學家組織網8月18日報道,美國科學家在人類遺傳物質中發現了一種新物質并將其命名為“前核小體”。科學家們認為,這種新物質是位于染色質和核小體之間的中間物質,新發現有望讓生物教科書小小地“變臉”。相關研究發表在8月19日的《分子細胞》雜志上。  染色質是細胞周期間期細胞核內能被堿性染料染色

    抗核小體抗體的檢測及應用是什么?

      凋亡細胞是核小體的重要來源,當SLE患者的吞噬細胞對凋亡細胞的清除能力受損或降低,導致核小體在患者體內大量存積,多聚核小體與活化的單核細胞結合后被抗原遞呈細胞呈遞給CD4+Th2細胞,Th2細胞增殖活化,激活B細胞產生抗核小體抗體(AnuA)。  AnuA特異性高,與SLE病情活動性相關,通常采

    華人科學家Nature公布核小體分布圖

      來自美國西北大學分子生物學系,統計系等處的研究人員發表了題為“A map of nucleosome positions in yeast at base-pair resolution”的文章,通過建立了一種新方法,在全基因組范圍內分析核小體分布的位置,這將有助于揭示體內與轉錄相關的核

    用梯度鹽透析的方法組裝核小體串實驗

    實驗方法原理 實驗材料 非標記的 G5E4 DNA末端標記的 G5E4 DNA 牛血清白蛋白(BSA)試劑、試劑盒 高鹽緩沖液低鹽緩沖液實驗步驟 1. 準備如下的重組混合液(最后加入組蛋白):約 100 ug/ml 9 份未標記和 1 份末端標記(摩爾數比)的 G5E4 DNA 混合物20 mmol

    用梯度鹽透析的方法組裝核小體串實驗

    實驗材料非標記的 G5E4 DNA末端標記的 G5E4 DNA牛血清白蛋白(BSA)試劑、試劑盒高鹽緩沖液低鹽緩沖液實驗步驟1. 準備如下的重組混合液(最后加入組蛋白):約 100 ug/ml 9 份未標記和 1 份末端標記(摩爾數比)的 G5E4 DNA 混合物20 mmol/L Tris·Cl,

    Nature:研究者揭示FACT蛋白操縱核小體機制

      眾所周知,包裝DNA的組蛋白(H2A、H2B、H3和H4)需要分子伴侶。FACT(Facilitates Chromatin Transcription)蛋白是一類至關重要的組蛋白伴侶(histone chaperone)。將基因組DNA組裝成核小體深刻地影響了真核生物中所有DNA相關過程。FA

    去-H1-的寡聚核小體的離心實驗

    實驗材料精核微球菌核酸酶試劑、試劑盒MSBHSBNaClLSBCaCl2EGTA無蔗糖的 HSBSDS透析緩沖液儀器、耗材勻漿器冷凍超速離心機MWCO 透析袋梯度制備裝置(用于離心)針頭管子實驗步驟1. 用 40 ml MSB 重懸約 2 ml 精核。4℃,10 000 g 離心 10 min(用

    酶聯免疫吸附法(ELISA)核小體測定的步驟

      1、將凋亡細胞裂解后高速離心,其上清液中含有核小體;  2、在微定量板上吸附組蛋白體;  3、加上清夜使抗組蛋白抗體與核小體上的組蛋白結合;  4、加辣過氧化物酶標記的抗DNA抗體使之與核小體上的DNA結合;  4、加酶的底物,測光吸收制。

    用逐步鹽透析的方法組裝核小體模板實驗

    實驗方法原理 實驗材料 牛胸腺 DNA放射性標記的 DNA純化的天然核心組蛋白試劑、試劑盒 NaClTE 緩沖液儀器、耗材 MWCO 透析管實驗步驟 1. 準備如下的重組混合液:約 8 ug 未標記的超聲破碎的牛胸腺 DNA (作為載體 DNA; 加自 1~2 mg/ml 儲液)200 000~40

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