前沿顯微成像技術專題之:光片熒光顯微鏡(一)
在過去二十多年中,光學顯微成像技術發展迅速,不斷突破傳統極限。生命科學研究,要求成像系統在不影響生物活性的前提下,實現更大視野,更高分辨率,更高速度的三維成像。這也意味著對成像探測器 - 科研相機的要求也越來越高。從本周開始,我們將為大家帶來前沿顯微成像技術專題系列,和大家一起探討前沿的顯微成像技術以及他們對科研相機的相關性能要求。首期我們的主角是近年來廣受關注和發展的光片熒光顯微鏡(Light Sheet Fluorescence Microscopy) 。光片熒光顯微鏡的誕生大家知道,傳統的寬場熒光顯微鏡通過物鏡將激發光聚焦,同時收集樣品的熒光信號成像。觀察其照明方式(圖1)不難發現,雖然焦平面上的光最強,但其上下的樣品也會被照亮,導致以下局限性:引入額外的光毒性,影響樣品生物活性,甚至造成細胞死亡;成像焦平面以外的干擾信號進入圖像,導致圖像分辨率和反差降低。圖1 寬場顯微鏡照明方式示意 (Brad Amos, M......閱讀全文
前沿顯微成像技術專題之:光片熒光顯微鏡(一)
在過去二十多年中,光學顯微成像技術發展迅速,不斷突破傳統極限。生命科學研究,要求成像系統在不影響生物活性的前提下,實現更大視野,更高分辨率,更高速度的三維成像。這也意味著對成像探測器 - 科研相機的要求也越來越高。從本周開始,我們將為大家帶來前沿顯微成像技術專題系列,和大家一起探討前沿的顯微成像技術
前沿顯微成像技術專題之:光片熒光顯微鏡(三)
關于光片顯微鏡,通過前面第一,第二期的介紹,相信大家已經有了較為全面的了解。在本期中,我們將介紹另外幾種光片顯微技術,它們和第二期最后介紹的晶格光片顯微鏡一樣,都是對傳統光片顯微技術的改進,以滿足更高的成像要求。最后,我們將為大家總結如何挑選適合光片顯微鏡的科學相機。倒置平面照明顯微鏡 (d)iSP
前沿顯微成像技術專題之:光片熒光顯微鏡(二)
上一篇簡單介紹了光片熒光顯微鏡的一些基本知識,光片顯微鏡的誕生大大拓展了生命科學的研究視野,但它也有一些需要克服的天生缺陷和技術難點。本期就讓我們從這里開始,一步步追尋光片顯微鏡的發展足跡。靜態光片和技術難點正如我們在上一期提到的那樣,傳統的光片是由高斯光束通過一個柱形透鏡來實現的。 最初,只用一個
光片顯微鏡的前世今生
光片熒光顯微鏡(Light Sheet Fluorescence Microscopy, LSFM)的概念產生于1903年,但此后很長時間并無太多發展。上世紀九十年代,華盛頓大學的Francis Spelman實驗室為了對小鼠毛細胞的結構和耳蝸的其他特性進行定量測量,發展了一系列實驗方法
認識熒光顯微鏡的光立方
什么是熒光? 熒光即為物質中的電子吸收光的能量由低能狀態轉變為高能狀態,再回到低能狀態時釋放出的光,是非溫度輻射光——冷光。即:物質吸收短波光,進入激發態, 發射出的長波光。 無論是物質的自發熒光、熒光染料還是融合表達的熒光蛋白,均需經過特定波長的光激發(激發光Excitation),電子發
認識熒光顯微鏡的光立方
什么是熒光?熒光即為物質中的電子吸收光的能量由低能狀態轉變為高能狀態,再回到低能狀態時釋放出的光,是非溫度輻射光——冷光。即:物質吸收短波光,進入激發態, 發射出的長波光。無論是物質的自發熒光、熒光染料還是融合表達的熒光蛋白,均需經過特定波長的光激發(激發光Excitation),電子發生遷移后,能
ZEISS-Lightsheet-7光片顯微鏡共享
儀器名稱:ZEISS Lightsheet 7光片顯微鏡儀器編號:A23000102產地:德國生產廠家:ZEISS型號:Lightsheet7出廠日期:20230510購置日期:20231010所屬單位:醫研院>生物醫學測試中心>共享儀器平臺>透明化制樣與成像機組放置地點:生物技術館4110固定電話
熒光顯微鏡是什么光路系統?
在顯微鏡下,由于某些物質的光學特性,普通正置顯微鏡不能看清楚其內部結構,而其擁有另外一種特性,比如細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后可發熒光;另有一些物質本身雖不能發熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經紫外線照射亦可發熒光,利用這種物質的光學特性,研發出了專業的顯微顯示設備,即熒光顯微
熒光顯微鏡的落射光裝置
新型的落射光裝置是從光源來的光射到干涉分光濾鏡后,波長短的部分(紫外和紫藍)由于濾鏡上鍍膜的性質而反射,當濾鏡對向光源呈45。傾斜時,則垂直射向物鏡,經物鏡射向標本,使標本受到激發,這時物鏡直接起聚光器的作用。同時,濾長長的部分(綠、黃、紅等),對濾鏡是可透的,因此,不向物鏡方向反射,濾鏡起了激
熒光顯微鏡的落射光裝置簡介
新型的落射光裝置是從光源來的光射到干涉分光濾鏡后,波長短的部分(紫外和紫藍)由于濾鏡上鍍膜的性質而反射,當濾鏡對向光源呈45。傾斜時,則垂直射向物鏡,經物鏡射向標本,使標本受到激發,這時物鏡直接起聚光器的作用。同時,濾長長的部分(綠、黃、紅等),對濾鏡是可透的,因此,不向物鏡方向反射,濾鏡起了激
ZEISS-Lightsheet-Z.1光片顯微鏡共享
儀器名稱:ZEISS Lightsheet Z.1光片顯微鏡儀器編號:17002189產地:中國生產廠家:Zeiss型號:LightsheetZ.1出廠日期:201706購置日期:201701所屬單位:醫研院>生物醫學測試中心>共享儀器平臺>透明化制樣與成像機組放置地點:生物技術館1102-B固定電
關于熒光顯微鏡的落射光裝置介紹
新型的落射光裝置是從光源來的光射到干涉分光濾鏡后,波長短的部分(紫外和紫藍)由于濾鏡上鍍膜的性質而反射,當濾鏡對向光源呈45。傾斜時,則垂直射向物鏡,經物鏡射向標本,使標本受到激發,這時物鏡直接起聚光器的作用。同時,濾長長的部分(綠、黃、紅等),對濾鏡是可透的,因此,不向物鏡方向反射,濾鏡起了激
熒光顯微鏡檢測熒光
生物顯微鏡是用來觀察生物切片、生物細胞、細菌以及活體組織培養、流質沉淀等的觀察和研究,同時可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細小顆粒等物體。左圖所示為生產的倒置生物顯微鏡型,該生物顯微鏡也是食品廠、飲用水廠辦QS、HACCP認證的必備檢驗設備。生物顯微鏡供醫療衛生單位、高等院校、研究所用于微生
熒光顯微鏡濾光片系統的組成
? ? 顯微鏡:熒光顯微鏡與普通顯微鏡一樣均由光學系統(物鏡和目鏡)和鏡架機械裝置組成。但是,熒光顯微鏡中的物鏡最好用消色差物鏡,因其自身熒光極微且透光性能(波長范圍)適合于熒光。由于圖像在顯微視野中的熒光亮度與物鏡數值孔徑的平方成正比,而與其放大倍數成反比,所以,為提高熒光圖像的亮度,熒光顯微鏡使
熒光顯微鏡最常用的濾光片
dapi紫外激發,看見的藍色熒光;gfp的藍激發,看見的綠色熒光;rfp的綠激發,紅色熒光短波長激發出長波長的熒光紫外---藍---綠---紅---紅外,波長越來越長
熒光顯微鏡
熒光顯微鏡熒光顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,?使之發出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。 細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后可發熒光;另有一些物質本身雖不能發熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經
熒光顯微鏡
熒光顯微鏡一般分為透射和落射式兩種類型。a.透射式:激發光來自被檢物體的下方,聚光鏡為暗視野聚光鏡,使激發光不進入物鏡,而使熒光進入物鏡。b.落射式:透射式目前幾乎被淘汰,新型的熒光顯微鏡多為落射式,光源來自被檢物體的上方,在光路中具有分光鏡,所以對透明和不透明的被檢物體都適用。由于物鏡起了聚光鏡的
熒光顯微鏡
折疊熒光顯微鏡在螢光顯微鏡上,必須在標本的照明光中,選擇出特定波長的激發光,以產生熒光,然后必須在激發光和熒光混合的光線中,單把熒光分離出來以供觀察。因此,在選擇特定波長中,濾光鏡系統,成為極其重要的角色。熒光顯微鏡原理:(A) 光源:光源輻射出各種波長的光(以紫外至紅外)。(B) 激勵濾光源:透過
熒光顯微鏡
細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后可發熒光;另有一些物質本身雖不能發熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經紫外線照射亦可發熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一。 當前位置: 生命經緯 > 實驗技術 > 實驗室安全 熒光顯微鏡 BIOX.C
熒光顯微鏡
熒光顯微鏡熒光顯微鏡是用短波長的光線照射用熒光素染色過的被檢物體,使之受激發后而產生長波長的熒光,然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應用于生物,醫學等領域。(1)熒光顯微鏡一般分為透射和落射式兩種類型。a.透射式:激發光來自被檢物體的下方,聚光鏡為暗視野聚光鏡,使激發光不進入物鏡,而使熒光進入物鏡。b.落射式
光片顯微鏡技術小課堂(五)——-數據的處理
處理數據應對高速且大量的數據光片顯微鏡的一個顯著優點是能夠在數小時(或數天)內以非常高的時間與空間分辨率對大樣本進行成像,但由此導致的結果是會產生巨大的數據量,很容易達到TB級別,于是樣本成像的速度不再受圖像采集速度的限制,而是受數據處理電腦、存儲容量和數據傳輸速度的限制。當以中等幀速成像時,相機采
光切顯微鏡原理
儀器是采用光切法測量被測表面的微觀平面幅度 ,其工作原理,如下所示。
偏振光顯微鏡
偏振光顯微鏡?(1)偏光顯微鏡的特點 將普通光改變為偏振光進行鏡檢的方法,以鑒別某一物質是單折射(各向同行)或雙折射性(各向異性)。雙折射性是晶體的基本特性。因此,偏光顯微鏡被廣泛地應用在礦物、化學等領域,在生物學和植物學也有應用。?(2)偏光顯微鏡的基本原理 偏光顯微鏡的原理比較復雜,在此不作過多
偏振光顯微鏡
(1)偏光顯微鏡的特點 將普通光改變為偏振光進行鏡檢的方法,以鑒別某一物質是單折射(各向同行)或雙折射性(各向異性)。雙折射性是晶體的基本特性。因此,偏光顯微鏡被廣泛地應用在礦物、化學等領域,在生物學和植物學也有應用。 (2)偏光顯微鏡的基本原理 偏光顯微鏡的原理比較復雜,在此不作過多介
光片成像模塊升級共聚焦顯微鏡:成像更快速光毒性更低
對生物樣品進行快速可靠的原位成像以揭示與復雜的多細胞生物相關的動態過程一直都是光學成像的一大目標。傳統的激光共聚焦顯微鏡雖然具有優異的3D熒光成像功能,提供了非常高的空間分辨率,但是在某些實驗中,成像速度不夠快和光漂白問題依然不容忽視。光片技術的提出就很好地解決了這些問題,同時還保有優異的空間分辨率
熒光顯微鏡和普通顯微鏡
熒光顯微鏡和普通顯微鏡到底有什么區別呢?第一,熒光顯微鏡的照明方式通常為落射式,就是光源通過物鏡直接投射于樣品上。第二,熒光顯微鏡的光源為紫外光,波長相對而言比較短,但它的分辨力卻要高于普通顯微鏡。第三,熒光顯微鏡它有兩個特殊的濾光片,光源前的用來以過濾除可見光,目鏡和物鏡之間的用于過濾除紫外線,用
熒光顯微鏡和普通顯微鏡
熒光顯微鏡和普通顯微鏡到底有什么區別呢?,熒光顯微鏡的照明方式通常為落射式,就是光源通過物鏡直接投射于樣品上。第二,熒光顯微鏡的光源為紫外光,波長相對而言比較短,但它的分辨力卻要高于普通顯微鏡。第三,熒光顯微鏡它有兩個特殊的濾光片,光源前的用來以過濾除可見光,目鏡和物鏡之間的用于過濾除紫外線,用以保
按光源類型可分為普通光、熒光和激光顯微鏡
按光源類型可分為普通光、熒光和激光顯微鏡等1、普通光顯微鏡采用的就是普通光源,是zui常用的。2、熒光顯微鏡是以紫外線為光源,通常是照射被檢物體(落射式),使之發出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。3、激光共聚焦掃描顯微
光學顯微鏡落射光激發的熒光法的概述
簡稱為落射熒光法,是近代顯微鏡檢術中新發展出來的一種強有力的反差增強法。它將激發熒光用的光源改在物鏡的上方,光由物鏡上方經反光鏡射入物鏡去激發樣品,從樣品上被激發的熒光經物鏡成像并穿透反光鏡而由目鏡觀察。該方法較簡便,效率高,50W的光源強度比透射熒光法的250W還強。熒光方法是利用波長較短的紫
Lavision光片照明(SPIM)顯微鏡—淋巴管形成機制
Rene′ Ha¨ gerling1,7, Cathrin Pollmann1,7,Martin Andreas1, Christian Schmidt1,Harri Nurmi2, Ralf H Adams3, Kari Alitalo2,Volker Andresen4, Stefan