前沿顯微成像技術專題之：光片熒光顯微鏡（三）
關于光片顯微鏡，通過前面第一，第二期的介紹，相信大家已經有了較為全面的了解。在本期中，我們將介紹另外幾種光片顯微技術，它們和第二期最后介紹的晶格光片顯微鏡一樣，都是對傳統光片顯微技術的改進，以滿足更高的成像要求。最后，我們將為大家總結如何挑選適合光片顯微鏡的科學相機。倒置平面照明顯微鏡 (d)iSPIM雙向倒置平面照明顯微鏡（Dual-view inverted SPIM，diSPIM）是由NIH的Hari Shrof 實驗室和 Applied Scientific Instrumentation (ASI) 公司合作開發的。它本質上是L-SPIM，通過柱形透鏡來產生光片，不同的是它是倒置的，兩個相互垂直，規格相同的物鏡位于樣品上方，浸入介質中，輪流進行照明和成像，可以達到各個方向上相同的分辨率（330nm）。iSPIM (inverted SPIM)與之原理相同，只是采用單向照明與成像，因此和其他傳統光片系統一樣，軸向分辨率要......閱讀全文
前沿顯微成像技術專題之：光片熒光顯微鏡（二）
上一篇簡單介紹了光片熒光顯微鏡的一些基本知識，光片顯微鏡的誕生大大拓展了生命科學的研究視野，但它也有一些需要克服的天生缺陷和技術難點。本期就讓我們從這里開始，一步步追尋光片顯微鏡的發展足跡。靜態光片和技術難點正如我們在上一期提到的那樣，傳統的光片是由高斯光束通過一個柱形透鏡來實現的。 最初，只用一個
前沿顯微成像技術專題之：光片熒光顯微鏡（三）
關于光片顯微鏡，通過前面第一，第二期的介紹，相信大家已經有了較為全面的了解。在本期中，我們將介紹另外幾種光片顯微技術，它們和第二期最后介紹的晶格光片顯微鏡一樣，都是對傳統光片顯微技術的改進，以滿足更高的成像要求。最后，我們將為大家總結如何挑選適合光片顯微鏡的科學相機。倒置平面照明顯微鏡 (d)iSP
前沿顯微成像技術專題之：光片熒光顯微鏡（一）
在過去二十多年中，光學顯微成像技術發展迅速，不斷突破傳統極限。生命科學研究，要求成像系統在不影響生物活性的前提下，實現更大視野，更高分辨率，更高速度的三維成像。這也意味著對成像探測器 - 科研相機的要求也越來越高。從本周開始，我們將為大家帶來前沿顯微成像技術專題系列，和大家一起探討前沿的顯微成像技術
光片成像模塊升級共聚焦顯微鏡：成像更快速光毒性更低
對生物樣品進行快速可靠的原位成像以揭示與復雜的多細胞生物相關的動態過程一直都是光學成像的一大目標。傳統的激光共聚焦顯微鏡雖然具有優異的3D熒光成像功能，提供了非常高的空間分辨率，但是在某些實驗中，成像速度不夠快和光漂白問題依然不容忽視。光片技術的提出就很好地解決了這些問題，同時還保有優異的空間分辨率
熒光成像與高光成像區別
熒光成像與高光成像區別如下：1、原理：熒光成像是利用熒光標記的分子在激發后發出特定波長的光來成像，而高光成像是基于樣本的反射或透射光強度的差異來成像。2、樣本處理：熒光成像需要在樣本中引入熒光標記物，通常是通過染色或基因工程技術來實現，而高光成像則不需要對樣本進行特殊處理，直接觀察樣本的自然反射或透
微型光片發生器可用于大腦活動光片成像
讓神經科學家能夠記錄和量化活體大腦功能活動的工具需求量很大。傳統上，研究人員使用功能磁共振成像等技術，但這種方法不能記錄高空間分辨率的神經活動或運動的受試者。近年來，光遺傳學工具利用光來控制神經元，并記錄組織中的信號，這些組織經過基因改造后可以表達光敏和熒光蛋白。然而，現有的腦光信號成像技術在大
熒光顯微鏡：內置了照明和濾光片用于成像
相機技術的發展進步使生物應用和工業應用中的顯微鏡發生了革命性的變化。因此，生物學家或工程師再也無需耗費數小時使用目鏡進行觀察和不斷地對焦。此外，當今的數字視頻顯微鏡系統也簡化了數據記錄和數據分析的流程。更多有關此系統類型的一般信息，請參閱數字視頻顯微鏡調整件設置。要真正了解數字視頻顯微鏡系統的好處，
熒光顯微鏡：內置了照明和濾光片用于成像
熒光顯微鏡的基礎熒光顯微鏡非常適用于測量和分析各種光波長的吸收和激發。內置熒光顯微鏡設置利用平板分光器將照明器的光源轉折平行光學路徑。從機械的角度來說，此設置的復雜程度低于其他數字視頻顯微鏡系統，其設置就如圖1所示。與大多數光學系統一樣，此系統同樣具備了傳感器、光學組件以及受檢測物體。基于本次討論目
光學顯微鏡落射光激發的熒光法成像光路系統的調整方法介紹
光學顯微鏡落射光激發的熒光法簡稱為落射熒光法，是近代顯微鏡檢術中新發展出來的一種強有力的反差增強法。它將激發熒光用的光源改在物鏡的上方，光由物鏡上方經反光鏡射入物鏡去激發樣品，從樣品上被激發的熒光經物鏡成像并穿透反光鏡而由目鏡觀察。該方法較簡便，效率高，50W的光源強度比透射熒光法的250W還強
光學顯微鏡成像光路系統的調整
p.p1 {margin: 0.0px 0.0px 0.0px 0.0px; line-height: 19.0px; font: 13.0px 'Helvetica Neue'}顯微鏡成像光路系統的調整，是根據不同顯微鏡檢術的需要而進行的。所謂顯微鏡檢術（microscopy），概括而言就是以顯微
平鋪光片顯微鏡如何實現均一高分辨率成像
隨著組織透明化技術和光片熒光顯微技術的發展，3D熒光成像技術實現了快速獲取3D組織信息的能力。光片顯微鏡由于其獨特的3D成像能力以及更快的成像速度逐漸成為生命科學研究中3D熒光成像的強有力工具。光片顯微鏡的實現方式是將激發光片限制在探測焦平面內，使得激發光對樣品的光漂白和光毒性降到最低，具有高的三維
認識熒光顯微鏡的光立方
什么是熒光? 熒光即為物質中的電子吸收光的能量由低能狀態轉變為高能狀態，再回到低能狀態時釋放出的光，是非溫度輻射光——冷光。即：物質吸收短波光，進入激發態, 發射出的長波光。 無論是物質的自發熒光、熒光染料還是融合表達的熒光蛋白，均需經過特定波長的光激發(激發光Excitation)，電子發
認識熒光顯微鏡的光立方
什么是熒光？熒光即為物質中的電子吸收光的能量由低能狀態轉變為高能狀態，再回到低能狀態時釋放出的光，是非溫度輻射光——冷光。即：物質吸收短波光，進入激發態, 發射出的長波光。無論是物質的自發熒光、熒光染料還是融合表達的熒光蛋白，均需經過特定波長的光激發（激發光Excitation），電子發生遷移后，能
光片顯微鏡的前世今生
光片熒光顯微鏡（Light Sheet Fluorescence Microscopy, LSFM）的概念產生于1903年，但此后很長時間并無太多發展。上世紀九十年代，華盛頓大學的Francis Spelman實驗室為了對小鼠毛細胞的結構和耳蝸的其他特性進行定量測量，發展了一系列實驗方法
植物熒光成像儀——熒光成像原理
熒光是自然界常見的一種發光現象。熒光是光子與分子的相互作用產生的，這種相互過程可以通過雅布隆斯基(Jablonslc)分子能級圖描述：大多數分子在常態下，是處于基態的最低振動能級So，當受到能量（光能、電能、化學能等等）激發后，原子核周圍的電子從基態能級So躍遷到能量較高的激發態（第一或第二激發
植物熒光成像儀——熒光成像簡介
熒光是自然界常見的一種發光現象。熒光是光子與分子的相互作用產生的，這種相互過程可以通過雅布隆斯基(Jablonslc)分子能級圖描述：大多數分子在常態下，是處于基態的最低振動能級So，當受到能量（光能、電能、化學能等等）激發后，原子核周圍的電子從基態能級So躍遷到能量較高的激發態（第一或第二激發
植物多光譜熒光成像系統UV紫外光激發多光譜成像技術
UV紫外光激發多光譜熒光成像技術：長波段UV紫外光（320nm－400nm）對植物葉片激發，可以產生具有4個特征性波峰的熒光光譜，4個波峰的波長為藍光440nm（F440）、綠光520nm（F520）、紅光690nm（F690）和遠紅外740nm（F740），其中F440和F520統稱為BGF，
熒光顯微鏡的落射光裝置
新型的落射光裝置是從光源來的光射到干涉分光濾鏡后，波長短的部分（紫外和紫藍）由于濾鏡上鍍膜的性質而反射，當濾鏡對向光源呈45。傾斜時，則垂直射向物鏡，經物鏡射向標本，使標本受到激發，這時物鏡直接起聚光器的作用。同時，濾長長的部分（綠、黃、紅等），對濾鏡是可透的，因此，不向物鏡方向反射，濾鏡起了激
熒光顯微鏡是什么光路系統？
在顯微鏡下，由于某些物質的光學特性，普通正置顯微鏡不能看清楚其內部結構，而其擁有另外一種特性，比如細胞中有些物質，如葉綠素等，受紫外線照射后可發熒光；另有一些物質本身雖不能發熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經紫外線照射亦可發熒光，利用這種物質的光學特性，研發出了專業的顯微顯示設備，即熒光顯微
x光成像和電子顯微鏡成像原理一樣嗎
電子顯微鏡是根據電子光學原理,用電子束和電子透鏡代替光束和光學透鏡,使物質的細微結構在非常高的放大倍數下成像的儀器.電子顯微鏡的分辨能力以它所能分辨的相鄰兩點的最小間距來表示.20世紀70年代,透射式電子顯微鏡的分辨率約為0.3納米(人眼的分辨本領約為0.1毫米).現在電子顯微鏡最大放大倍率超過30
ZEISS－Lightsheet－7光片顯微鏡共享
儀器名稱：ZEISS Lightsheet 7光片顯微鏡儀器編號：A23000102產地：德國生產廠家：ZEISS型號：Lightsheet7出廠日期：20230510購置日期：20231010所屬單位：醫研院>生物醫學測試中心>共享儀器平臺>透明化制樣與成像機組放置地點：生物技術館4110固定電話
光學顯微鏡透射光相差法成像光路系統的調整方法介紹
透射光相差法是現代顯微鏡檢術中的一種反差增強法。 一、基本部件：相差物鏡、明視野與相差兼用的多用途聚光鏡、對中望遠鏡、綠色濾光片。 二、調整方法： a. 在庫勒照明系統調整好的基礎上，用明視野方法把樣品調焦清晰； b. 把聚光鏡轉到Ph1對準轉盤刻度線位置，選用10×相差物鏡，換上待觀察
熒光顯微鏡成像質量的決定因素
熒光光學系統的成像質量主要取決于像的襯度和像的亮度，像的襯度是由樣品中激發出的熒光與背景上觀察到的光之比決定的。背景光包括透過截止激發光的濾色片的雜散激發光，樣品組織成分的自發熒光和光學系統的自發熒光和雜散光，在熒光顯微術中盡全力要解決的是既獲得最佳的像襯度，同時又維持像有足夠亮度，這兩者往往是矛盾
光學顯微鏡的主要觀察方法之熒光觀察
熒光現象熒光是指熒光物質在特定波長光照射下，幾乎同時發射出波長更長光的過程(圖1)。當特定波長(激發波長)的光照射一個分子(如熒光團中的分子)時，光子能量被該分子的電子吸收。接著，電子從基態(S0)躍遷至較高的能級，即激發態(S1’)。這個過程稱為激發①。電子在激發態停留10-9–10-8秒，在此過
熒光成像系統
用熒光顯微鏡進行3D球狀體熒光成像時，需要進行儀器設置優化和使用高級功能才能得到更好的成像結果。對球狀體進行Z軸層掃時，需要選擇合適的物鏡并進行合適地聚焦才能拍出更清晰的圖片。EVOS細胞成像系統和配套的CellesteTM成像分析軟件可以完美地對球狀體的大小、結構和蛋白表達水平進行定性和定量分析。
熒光成像系統
對完全校準好的熒光成像系統，當用不同的濾色鏡組時，樣品上一個點在檢測器上精確成像為一個點，也就是像素對像素。然而，不同顏色的通道 merge 時，物鏡的色差校正不夠、濾鏡光路沒有完全對準都會使得熒光信號之間的記錄有差錯。對具有復雜圖案的圖像或明暗信號相混的圖像，這個可能就檢測不到。會得出這樣的結論：
熒光顯微鏡的落射光裝置簡介
新型的落射光裝置是從光源來的光射到干涉分光濾鏡后，波長短的部分（紫外和紫藍）由于濾鏡上鍍膜的性質而反射，當濾鏡對向光源呈45。傾斜時，則垂直射向物鏡，經物鏡射向標本，使標本受到激發，這時物鏡直接起聚光器的作用。同時，濾長長的部分（綠、黃、紅等），對濾鏡是可透的，因此，不向物鏡方向反射，濾鏡起了激
光控熒光染料的超分辨成像研究獲新進展
??近日，華東理工大學費林加諾貝爾獎科學家聯合研究中心與中科院上海藥物研究所、國家蛋白質中心、美國得克薩斯大學奧斯丁分校以及英國巴斯大學合作，在酶激活型光控熒光染料的超分辨成像研究中取得重要進展，研究成果以“光致變色熒光探針策略實現生物標志物超分辨成像”為題發表于《美國化學會志》。 酶是人體不可
顯微成像小課堂丨寬場熒光顯微鏡
在活體細胞成像應用中，寬場熒光顯微鏡有助于觀察放置于顯微鏡載物臺上特定的環境室中生長的粘附細胞的動力學特性。在最基本的配置中，配備有EPI熒光照明的標準倒置組織培養顯微鏡與區域陣列檢測器系統（通常是CCD攝像機）、合適的熒光濾色片和光閘系統耦合，以限制細胞過度暴露于有害的激發光。基本熒光顯微鏡依
暗視野法調整光學顯微鏡的成像光路系統
許多透明或半透明的樣品，如細菌、微生物、細胞內的精細結構及結晶體的內含物等，在明視野顯微鏡中不容易看清楚，如果采用暗視野法就可以大大提高樣品的可視度。以暗視野法所看到的是襯托在黑暗視野背景中發亮的樣品輪廓及其細節。普遍光學顯微鏡的最高分辨率為0.2μm，而暗視野顯微鏡雖然對樣品的細節構造分辨不清