雙鏈DNA探針標記法
分子生物研究中，最常用的探針即為雙鏈DNA探針，它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。 雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。 1.切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的3'羥基末端。同時該酶具有從5'→3'的核酸外切酶活性,能從切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同時又在切口的3'端補上核苷酸,從而使切口沿著DNA鏈移動,用放射性核苷酸代替原先無放射性的核苷酸，將放射性同位素摻入到合成新鏈中。最合適的切口平移片段一般為50-500個核苷酸。切口平移反應受幾種因素的影響: (a) 產物的比活性取決于[α-32 P]dNTP的比活性和模板中核苷酸被置換的程度。(b) DNA酶Ⅰ的用量和E.coli DNA聚合酶的質量會影響產物片段的大小。(c) D......閱讀全文
雙鏈DNA探針標記法
分子生物研究中，最常用的探針即為雙鏈DNA探針，它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。 雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。 1.切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連
雙鏈DNA探針標記法介紹
分子生物研究中，最常用的探針即為雙鏈DNA探針，它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。1.?切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的
雙鏈DNA探針標記法的介紹
分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。 雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。 切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到
切口平移法雙鏈DNA探針標記法
?切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的3'羥基末端。同時該酶具有從5'→3'的核酸外切酶活性,能從切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同時又在切口的3'
隨機引物合成法雙鏈DNA探針標記法
隨機引物合成雙鏈探針是使寡核苷酸引物與DNA模板結合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探針。合成產物的大小、產量、比活性依賴于反應中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,產物平均長度為400-600個核苷酸。利用隨機引物進行反應的優點是：(1)Klenow片段沒有5'→3'外切酶活
雙鏈DNA探針切口平移法
當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的3'羥基末端。同時該酶具有從5'→3'的核酸外切酶活性,能從切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同時又在切口的3'端補上核苷酸,從而使切口沿著DNA鏈移動,
雙鏈DNA探針切口平移法
?? 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的3'羥基末端。同時該酶具有從5'→3'的核酸外切酶活性,能從切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同時又在切口的3'端補上核苷酸,從而使切口沿著DNA鏈移動,用
雙鏈DNA探針切口平移法
當雙鏈DNA 分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA 聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的3'羥基末端。同時該酶具有從5'→3'的核酸外切酶活性,能從切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同時又在切口的3'端補上核苷酸,從而使切口沿著DNA
雙鏈DNA探針隨機引物合成法
? 隨機引物合成雙鏈探針是使寡核苷酸引物與DNA模板結合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探針。合成產物的大小、產量、比活性依賴于反應中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,產物平均長度為400-600個核苷酸。利用隨機引物進行反應的優點是：(1)Klenow片段沒有5'→3'外切
細胞凋亡檢測實驗——熒光探針雙標記法
實驗方法原理本實驗用1μg/ml 三尖杉酯堿HT在體外誘導培養的HL-60細胞發生凋亡，同時也有少數細胞發生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）對細胞進行雙重染色，可以區別凋亡、壞死及正常細胞。三尖杉酯堿（HT）是我國自行研制的一種對急性粒細胞白血病，
單鏈DNA探針技術簡介
用雙鏈探針雜交檢測另一個遠緣DNA時,探針序列與被檢測序列間有很多錯配。而兩條探針互補鏈之間的配對卻十分穩定,即形成自身的無效雜交,結果使檢測效率下降。采用單鏈探針則可解決這一問題。單鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:(1) 以M13載體衍生序列為模板,用Klenow片段合成單鏈探針; (2)
末端標記法介紹DNA探針的標記方法
末端標記法不是將DNA進行全長標記，只在其5'端或3’端導入標記物進行部分標記。該標記方法可得到全長DNA探針，因為攜帶的標記分子較少，所以標記比活性不高。
雙鏈DNA的結構特點
中文名稱雙鏈DNA英文名稱double-stranded DNA;dsDNA定 義由兩條DNA單鏈通過堿基互補作用而構成的DNA分子。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
細胞化學詞匯雙鏈DNA
中文名稱：雙鏈DNA英文名稱：double-stranded DNA;dsDNA定 義：由兩條DNA單鏈通過堿基互補作用而構成的DNA分子。應用學科：遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
雙鏈DNA的結構特點
中文名稱雙鏈DNA英文名稱double-stranded DNA;dsDNA定 義由兩條DNA單鏈通過堿基互補作用而構成的DNA分子。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
雙鏈互補DNA的定義
中文名稱雙鏈互補DNA英文名稱double-strand cDNA;dscDNA定 義以雙鏈互補DNA為模板合成的雙鏈DNA。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
DNA雙鏈末端的概念
中文名稱平端英文名稱blunt end定 義DNA雙鏈末端平齊而無突出單鏈。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
PCR擴增標記法探針標記
PCR擴增標記法探針標記???? PCR擴增標記法的原理與普通的核酸PCR相同。即Taq?DNA多聚酶以DNA為模板，在特異引物引導下，在PCR儀中合成cDNA探針。由于在反應體系中加入一定量的標記dNTP，因此擴增的同時又是一個標記過程。cDNA探針PCR擴增法標記原理
細胞化學詞匯雙鏈互補DNA
中文名稱：雙鏈互補DNA英文名稱：double-strand cDNA;dscDNA定 義：以雙鏈互補DNA為模板合成的雙鏈DNA。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
解旋酶打開DNA雙鏈過程破解
美國溫安洛研究所近日發布公告稱，該所科學家和洛克菲勒大學合作，成功破解CMG解旋酶參與真核生物內DNA（脫氧核糖核酸）復制的結構過程，并首次觀察到其與DNA間的相互作用。這項發表在美國《國家科學院學報》上的最新研究，為生命繁殖之謎提供了全新注解。 溫安洛研究所教授李慧琳（音譯）從酵母生物體內提
解旋酶打開DNA雙鏈過程破解
美國溫安洛研究所近日發布公告稱，該所科學家和洛克菲勒大學合作，成功破解CMG解旋酶參與真核生物內DNA（脫氧核糖核酸）復制的結構過程，并首次觀察到其與DNA間的相互作用。這項發表在美國《國家科學院學報》上的最新研究，為生命繁殖之謎提供了全新注解。 溫安洛研究所教授李慧琳（音譯）從酵母生物體內提
細胞化學詞匯DNA雙鏈體
中文名稱：DNA雙鏈體英文名稱：DNA duplex定 義：兩條以3′，5′-磷酸二酯鍵相連而成的反向多核苷酸鏈通過沿著其軸向的互補堿基對的氫鍵交聯在一起形成的雙鏈DNA，通常形成雙螺旋的結構。可以共價閉合成環狀分子，形成超螺旋DNA。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學
抗雙鏈DNA抗體(aniDNA)的簡介
抗DNA抗體包括抗雙鏈DNA抗體、抗單鏈DNA抗體和抗zDNA抗體。 檢驗中一般是指與雙鏈DNA和單鏈DNA都反應的抗雙鏈DNA抗體。 抗雙鏈DNA抗體陽性是系統性紅斑狼瘡的標志，陽性率達90%以上，有較高的特異性，因而抗雙鏈DNA抗體對系統性紅斑狼瘡的診斷和治療監控極重要。抗雙鏈DNA抗體在其
分子遺傳學詞匯雙鏈DNA
中文名稱：雙鏈DNA英文名稱：double-stranded DNA;dsDNA定 義：由兩條DNA單鏈通過堿基互補作用而構成的DNA分子。應用學科：遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
什么是抗雙鏈DNA抗體測定
抗雙鏈DNA抗體測定是對抗雙鏈DNA抗體的測定。抗雙鏈DNA抗體又稱為抗天然DNA抗體，是抗核抗體的一種類型，幾乎所有紅斑狼瘡病人都有該抗體的升高。目前認為，它在紅斑狼瘡的發病中起一定的作用，在一些病人中，DNA的大分子可存在于循環血液中或者粘附于多種器官的微血管上，如腎臟、肺和腦組織，與血液中
抗雙鏈DNA抗體參考值
健康人血清1：10稀釋為陰性（綠蠅短膜蟲法）。 健康人結合率≤20%（放射免疫分析法Farr試驗）。 一般以待測血清A值/陰性對照A值（P/N）≥2.1為陽性，正常人P/N值＜2.1（ELISA法）。 正常人為陰性（NC膜上不出現著色點）（滴金免疫滲濾試驗）。
限制酶切割雙鏈DNA的方式
限制酶切割雙鏈DNA的方式有兩種，產生的末端也有兩種：第一種是交錯切割，即兩條鏈的切點不在同一水平而是相隔數個堿基，故斷口產生兩小段自身互補的單鏈，這種末端容易互補連接，稱為粘性末端（cohesive terminus）；第二種為平整切割。
細胞化學詞匯雙鏈DNA結合域
中文名稱：雙鏈DNA結合域外文名稱：dsDNA-binding domain定?????? 義：雙鏈DNA結合域，DNA結合蛋白中與雙鏈DNA結合的結構域。作?????? 用：雙雜交系統的基礎是在一些轉錄因子上發現的模域(modular domains)：一個DNA結合域，它可以結合一段特異的DNA
DNA測序——雙脫氧鏈末端終止法
實驗方法原理DNA聚合酶催化的DNA鏈延伸是在3'-OH末端上進行的。由于2’，3’-雙脫氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3'-位脫氧而失去游離-OH，當它參入到DNA鏈后，3'-OH末端消失，使DNA鏈的延伸終止。?本實驗根據此原理，將待測DNA片段插入單鏈噬菌體M13載體，
DNA雙鏈體的結構和功能
中文名稱DNA雙鏈體英文名稱DNA duplex定 義兩條以3′，5′-磷酸二酯鍵相連而成的反向多核苷酸鏈通過沿著其軸向的互補堿基對的氫鍵交聯在一起形成的雙鏈DNA，通常形成雙螺旋的結構。可以共價閉合成環狀分子，形成超螺旋DNA。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）