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  • 適配體的篩選方法

    適配體靶標范圍廣,靶標的大小與可溶性均不同,因此應用 SELEX 技術篩選核酸適配體可以采用不同的具體操作方法。離心沉淀法常用于針對細胞、細菌與病毒的適配體篩選,固相吸附與洗脫技術可以用于可溶性小分子的適配體篩選。適配體篩選的具體方法包括以下幾個方面。基于不同固定介質的篩選方法。硝酸纖維素膜過濾法是一種常用于蛋白質適配體篩選的方法。Joshi 等基于硝酸纖維素膜設計了一種橫向流動色譜裝置,結合應用該裝置與 SELEX 篩選技術,作者經過7輪正篩和3輪反篩獲得了針對鼠傷寒沙門氏菌外膜蛋白(Omp)的高親和力適配體33和45序列,檢出限為10-40 cfu/mL。凝膠柱亦是適配體篩選常見的固定介質。Tang等基于瓊脂糖凝膠樹脂應用SELEX 技術篩選獲得對紅豆毒素具有高特異性與高親和力的適配體,其解離常數低至幾nmoL范圍。近些年來,以微孔板為固定介質篩選適配體應用廣泛。王立峰等基于微孔板技術篩選獲得能與癌胚抗原(CEA)特異性結合......閱讀全文

    如何分辨單齒配體和多齒配體

    單齒配體一個配體中只有一個配位原子的配體。多齒配體一個配體中有兩個或兩個以上配位原子的配體。如二亞乙基三胺( 簡寫為DEN)和乙二胺四乙酸根(簡寫為EDTA)。由一定數目的陰離子或中性分子與陽離子(或原子)以配位鍵形成的復雜分子或離子成為配位個體,含配位個體的化合物稱為配合物,而含有一個配位原子的配

    免疫篩選的的技術方法

    中文名稱免疫篩選英文名稱immunoscreening定  義根據抗原-抗體相互作用的原理從群體中選出目的物的技術。如用抗體檢測表達型的基因文庫所合成的蛋白質,從而篩選出目的基因的克隆。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    陽性克隆篩選方法匯總

    ——基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9基因敲除方法近幾年來,基因重組的技術層出不窮,包括TALEN和CRISPR/Cas9在內的重組技術給基礎研究提供更為方便和快捷的分子生物學工具。關于這些技術的具體原理和操作細節,這里不做展開介紹,主要談一談在用這些技術進行細胞株構建的過程中,如何做才

    陽性克隆篩選方法匯總

    陽性克隆篩選方法匯總 ——基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9基因敲除方法 近幾年來,基因重組的技術層出不窮,包括TALEN和CRISPR/Cas9在內的重組技術給基礎研究提供更為方便和快捷的分子生物學工具。 關于這些技術的具體原理和操作細節,這里不做展開介紹,主要

    細胞篩選方法和步驟

    篩選步驟:a.殺滅曲線的確定將未轉染的細胞按每孔0.05million鋪入24孔板,孵育過夜,2.第二天,除去24孔板中舊的培養基,3.將含不同濃度嘌呤霉素(1ug/mL,2ug/mL,3ug/mL,4ug/mL,5 ug/mL,6ug/mL,7ug/mL)的新鮮培養基加入已鋪有細胞的24孔板,4.

    常見配體介紹

    常見配體列表配體名稱化學式(粗體為鍵結的原子)帶電分類注解碘離子I-1單齒配體溴離子Br-1單齒配體硫離子S-2單齒配體 (M=S) 或雙齒配體 (M-S-M')硫氰酸根S-CN-1單齒配體氯離子Cl-1單齒配體也可作為橋接配體硝酸根離子O-NO2-1單齒配體疊氮根離子N-N2-1單齒配體氟

    常見配體介紹

    常見配體列表配體名稱化學式(粗體為鍵結的原子)帶電分類注解碘離子I-1單齒配體溴離子Br-1單齒配體硫離子S-2單齒配體 (M=S) 或雙齒配體 (M-S-M')硫氰酸根S-CN-1單齒配體氯離子Cl-1單齒配體也可作為橋接配體硝酸根離子O-NO2-1單齒配體疊氮根離子N-N2-1單齒配體氟

    他格適的成份介紹

      化學名稱:替考拉寧 化學結構式: 分子式:A 2-2,C 88H 97Cl 2N 9O 33 分子量:無 輔料:氯化鈉,注射用水

    他格適的用法用量

      本品既可以靜脈注射也可以肌肉注射。可以快速靜脈注射,注射時間為3~5分鐘之間,或緩慢靜脈滴注,滴注時間不少于30分鐘。一般每日給藥一次,但第一天可以給藥兩次。對敏感菌所致感染的大多數病人,給藥后48~72小時會出現療效反應,療程長短則依據感染的類型、嚴重程度和病人的臨床反應而定。心內膜炎和骨髓炎

    他格適的藥理毒理

      本品的活性成份是替考拉寧,一種新型糖肽類抗生素。 本品抑制細胞壁合成的途徑與萬古霉素一樣,干擾肽聚糖中新的部分的合成過程。本品通過肽聚糖亞單位中的氨基酰-D-丙氨酰-D-丙氨酸部分結合而起效應,這種結合將正常可被細菌細胞的延長和交叉一橋酸識別的部位“隱藏”起來。 這種結合抑制兩個方面:形成細胞壁

    腸胃適膠囊的成分介紹

      功勞木、雞骨香、黃連須、葛根、救必應、鳳尾草、兩面針、防己。

    土壤養分速測方法的篩選

    平衡配套施肥是在施用農家肥、秸稈還田培肥地力的基礎上,根據目標產量需肥量、土壤供 肥能力、肥料效應,科學地搭配N、P、K肥及微肥,提出合理的施用時期、方法來達到高產,同時提高土壤肥力,是農業部“九五”期末“沃土工程”的重要內容 之一。普及平衡施肥技術的關鍵是解決快速測定出不同土壤的有機質、速效磷、速

    電腦篩選器的操作方法

    ?? 一般來說,沒有經過篩選的種子,其中會含有蟲蝕粒、病斑粒、生芽粒、霉變粒、破損粒等不完善的種子和一些雜質,而這些雜質不僅影響種子的品質,而且也會影響種子檢驗的結果,因此為了將它們篩選開了,需要用到專業的電腦篩選器。? ? 隨著檢驗技術的不斷發展,檢驗儀器在種子檢驗中發揮了越來越重要的作用,用好

    細胞轉染所需細胞的篩選方法

    1.確定抗生素作用的最佳濃度:不同的細胞株對各種抗生素有不同的敏感性,因此在篩選前要做預試驗,確定抗生素對所選擇細胞的最低作用濃度。1) 提前24 小時在96 孔板或24 孔板中接種細胞8 孔,接種量以第二天長成25%單層為宜,置CO2 孵箱中37℃培養過夜。2) 將培養液換成含抗生素的培養基,抗生

    谷物篩選器的操作方法

    ??? 谷物篩選器在糧食檢驗中的主要作用是用于檢驗雜質、不完善粒和純糧(質)率,而其中所說的雜質,一般是指夾雜在糧食、油料中既沒有食用價值而又影響糧食、油料品質的物質,或異種糧粒。谷物中產生雜質的原因有很多,主要是收割、收獲后的清理程度和貯運等環節。??? 而谷物篩選器檢驗的另外一個項目就是不完善粒

    單克隆篩選的幾種方法

      單克隆篩選是新一代細胞克隆篩選和挑取技術,細胞克隆篩選系統能夠更少時間里,自動化篩選并挑取更高水平表達的細胞克隆,擁有5組熒光通道,可以同時使用3組,細胞克隆篩選系統避免有限稀釋,快速高效篩選挑取雜交瘤克隆,建立穩定細胞株,干細胞及特殊表面標記細胞挑取及昆蟲細胞篩選挑取。  單克隆篩選方法有有限

    關于重組子的篩選方法介紹

      1、抗生素篩選法:菌株為某種抗生缺陷型,而質粒上帶有該抗性基因(如氨芐青霉素,卡拉霉素等)這樣只有轉化子才能在含該抗生素的培養基上長出。本實驗利用抗生篩選轉化子。  2、互補法:至今使用的許多載體(如PUC系列)有含有一個大腸桿菌DNA的短區段,其中含有β-半乳糖苷酸基因(lacZ)的調控序列和

    配體誘導胞吞的定義

    中文名稱配體誘導胞吞英文名稱ligand-induced endocytosis定  義配體與膜受體結合后引起配體-受體復合體被胞吞的現象。其結果可以導致細胞表面受體數量及信號猝滅。是受體-配體復合體解離和某些受體的再循環所必須,也是細胞高效、高選擇性和快速攝取胞外親水分子的唯一手段。應用學科生物化

    配體提呈的定義

    中文名稱配體提呈英文名稱ligand presentation定  義通過細胞表面的分子與特異性配體結合而使配體濃縮富集,然后提呈給同一細胞或其他細胞上受體的現象。如在脂代謝中蛋白聚糖提呈脂蛋白相關蛋白的配體載脂蛋白E等。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),信號轉導(二級學科)

    束縛配體的功能作用

    中文名稱束縛配體英文名稱tethered ligand定  義被受體掩遮的配體。如凝血酶受體的真正配體是在受體內部。當表觀配體——凝血酶與受體結合時就將受體降解,而被暴露出來束縛配體就將受體激活并發揮生理作用。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),信號轉導(二級學科)

    配體誘導內化的特點

    中文名稱配體誘導內化英文名稱ligand-induced internalization定  義配體和膜受體的復合體通過胞吞作用進入細胞并在溶酶體中都被降解,使細胞表面受體數量減少的現象。內化使信號猝滅。但是有的受體在內化后并不降解,而且還能傳遞信號或迅速再循環而回到細胞表面。應用學科生物化學與分子

    核酸適配體的應用

    1990 年,Tuerk與Ellingtong基于 SELEX 技術率先分別篩選獲得了噬菌體T4DNA聚合酶與有機染料的特異性RNA適配體。自此以來,適配體已經被廣泛應用于細胞成像、新藥研發、疾病治療與微生物檢測等眾多方面。細胞成像:熒光標記適配體或適配體復合物是適配體應用于細胞成像的基礎。流式細胞

    概述適配體的應用

      1990 年,Tuerk與Ellingtong基于 SELEX 技術率先分別篩選獲得了噬菌體T4DNA聚合酶與有機染料的特異性RNA適配體。自此以來,適配體已經被廣泛應用于細胞成像、新藥研發、疾病治療與微生物檢測等眾多方面。  細胞成像:熒光標記適配體或適配體復合物是適配體應用于細胞成像的基礎。

    Fas配體的功能介紹

    中文名稱Fas配體英文名稱Fas ligand;FasL定  義Fas分子的配體。與受體Fas結合后啟動死亡信號轉導,使表達Fas的細胞發生凋亡。應用學科免疫學(一級學科),免疫病理、臨床免疫(二級學科),腫瘤免疫(三級學科)

    核酸適配體的優點

    自20世紀90 年代適配體的概念被提出以來,科研工作者不斷致力于適配體的研究,發現適配體具有許多優點。首先,相比較傳統微生物培養,檢測周期短、檢測限低且具有高親和力與強特異性,這源于適配體具有較大表面積和大量受體結合位點且空間三維構型易形成螺旋、發卡、莖環、凸環、三葉草和假結等結構,能夠與靶標物質基

    配體的結構和特點

    配體(ligand,也稱為配基)是一個化學名詞,表示可和中心原子(金屬或類金屬)產生鍵結的原子、分子和離子。一般而言,配體在參與鍵結時至少會提供一個電子。配體扮演路易斯堿的角色。但在少數情況中配體接受電子,充當路易斯酸。

    配體的分類和特點

    按配體中配位原子的多少,可將配體分為單齒配體和多齒配體。單齒配體:一個配體中只有一個配位原子的配體。如 NH3、H20等。多齒配體:一個配體中有兩個或兩個以上配位原子的配體。如二亞乙基三胺H2NCH2CH2NHCH2CH2NH2( 簡寫為DEN) 和乙二胺四乙酸根(簡寫為EDTA) 。兩可配體:有些

    簡述適配體的優點

      自20世紀90 年代適配體的概念被提出以來,科研工作者不斷致力于適配體的研究,發現適配體具有許多優點。首先,相比較傳統微生物培養,檢測周期短、檢測限低且具有高親和力與強特異性,這源于適配體具有較大表面積和大量受體結合位點且空間三維構型易形成螺旋、發卡、莖環、凸環、三葉草和假結等結構,能夠與靶標物

    核酸適配體的優點

    自20世紀90 年代適配體的概念被提出以來,科研工作者不斷致力于適配體的研究,發現適配體具有許多優點。首先,相比較傳統微生物培養,檢測周期短、檢測限低且具有高親和力與強特異性,這源于適配體具有較大表面積和大量受體結合位點且空間三維構型易形成螺旋、發卡、莖環、凸環、三葉草和假結等結構,能夠與靶標物質基

    重組子的篩選的原理和方法

    根據載體 的遺傳特征篩選重組子,如α-互補、抗生素基因等。現在使用的許多載體都帶有一個大腸桿菌的DNA的短區段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調控序列和前146個氨基酸的編碼信息。在這個編碼區中插入了一個多克隆位點(MCS),它并不破壞讀框,但可使少數幾個氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而

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