mRNA的穩定性
中文名稱mRNA穩定性英文名稱mRNA stability定 義信使核糖核酸(mRNA)在細胞內存在的穩定程度。mRNA易為外界環境,包括物理的、化學的和酶的因素所破壞,與其他種類RNA相比,半壽期較短,一般為數分鐘。體內mRNA的穩定性與特異結合蛋白的存在與否有關。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)......閱讀全文
mRNA的穩定性
中文名稱mRNA穩定性英文名稱mRNA stability定 義信使核糖核酸(mRNA)在細胞內存在的穩定程度。mRNA易為外界環境,包括物理的、化學的和酶的因素所破壞,與其他種類RNA相比,半壽期較短,一般為數分鐘。體內mRNA的穩定性與特異結合蛋白的存在與否有關。應用學科生物化學與分子生物學(
細胞化學詞匯mRNA穩定性
中文名稱:mRNA穩定性英文名稱:mRNA stability定 義:信使核糖核酸(mRNA)在細胞內存在的穩定程度。mRNA易為外界環境,包括物理的、化學的和酶的因素所破壞,與其他種類RNA相比,半壽期較短,一般為數分鐘。體內mRNA的穩定性與特異結合蛋白的存在與否有關。應用學科:生物化學與分子
mRNA穩定性的概念及影響因素
中文名稱mRNA穩定性英文名稱mRNA stability定 義信使核糖核酸(mRNA)在細胞內存在的穩定程度。mRNA易為外界環境,包括物理的、化學的和酶的因素所破壞,與其他種類RNA相比,半壽期較短,一般為數分鐘。體內mRNA的穩定性與特異結合蛋白的存在與否有關。應用學科生物化學與分子生物學(
研究揭示RNA甲基化調控斑馬魚母源mRNA穩定性機制
斑馬魚母源-合子轉換 (maternal-to-zygotic transition, MZT)過程伴隨著母源RNA和蛋白質的降解以及合子基因組的激活(maternal-to-zygotic transition, ZGA)。已有研究表明多種關鍵因素通過母源和合子途徑促進母源mRNA降解,其中包
mRNA的分離
與rRNA和tRNA不同的是,哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用 oligo(dT)-纖維素親和層析法從大量的細胞RNA中分離mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在構建cDNA文庫時, 必須經上述純化步驟制備mRNA
mRNA的純化
實驗概要本文介紹了mRNA的純化方法。實驗原理mRNA的分離方法較多,其中以寡聚(dT)-纖維素柱層析法最為有效,已成為常規方法。此法利用mRNA ?3‘末端含有Poly(A ?)的特點,在RNA流經寡聚(dT)纖維素柱時,在高鹽緩沖液的作用下,mRNA被特異地結合在柱上,當逐漸降低鹽的濃度時或在低
mRNA的分離
與rRNA和tRNA不同的是,哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纖維素親和層析法從大量的細胞RNA中分離mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在構建cDNA文庫時, 必須經上述純化步驟制備mRNA模板。進行
mRNA的分離
與rRNA和tRNA不同的是,哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纖維素親和層析法從大量的細胞RNA中分離mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在構建cDNA文庫時,?必須經上述純化步驟制備mRNA模板。進行
Polyadenylation-of-mRNA
Gene expression requires the coordination and integration of multiple processes, including transcription, splicing, polyadenylation, nucleocytoplasmic
mRNA差異顯示技術(mRNA-differetial-display)(2)
6.技術路線 mRNA 差異顯示技術 The fluoroDD System ?Builds on the HIEROGLYPH? system –TMR-labeled anchored primers –Increased primer concentrations –I
mRNA差異顯示技術(mRNA-differetial-display)(1)
1.概 述mRNA差異顯示技術(mRNA differetial display)是一種快速有效的克隆差異性表達基因的方法。 方法建立:1992年 Liang P和Pardee首次應用DD技術對比人類乳腺癌細胞與正常細胞所表達的mRNA,以此來克隆癌細胞所特有的基因 目前已應用于個各領域:
mRNA工藝技術平臺之mRNA制劑
mRNA疫苗或藥物的生產工藝,主要分為質粒DNA原液制備、mRNA原液制備、mRNA制劑制備三個階段。本文討論第三階段的工藝平臺,也是當前挑戰最大的環節。 關鍵的制劑技術突破解決了mRNA的成藥性問題,使其從60年的科研之路走向臨床商業化應用,并在此次新冠疫苗應用中大放異彩。據公開信息, BN
mRNA-的分離實驗
oligo(dT)-纖維素親和層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 ?哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以
mRNA-的分離實驗
實驗方法原理?哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纖維素親和層析法從大量的細胞RNA中分離mRNA。實驗步驟1.? 用0.1?mol/L NaOH懸浮0.5~1.0 goligo(dT)-纖維素。?2. ?將懸浮液裝入滅菌的一次性層
隱蔽mRNA的定義
與專一性蛋白質結合不能被核糖體識別的mRNA,在受精前儲存并不起始翻譯。因為卵細胞核和精細胞核在融合時,無法轉錄出mRNA以進行必要的蛋白合成,所以隱蔽mRNA由起著母源性短暫提供蛋白合成模板的作用。
mRNA的功能特點
mRNA含A、U、G、C四種核苷酸,每三個相聯而成一個三聯體,即密碼,代表一個氨基酸的信息,故按數學中排列組合法則計算,可形成43=64個不同的密碼。根據實驗結果,推得64個密碼與氨基酸的對應關系如下表。?mRNA密碼與氨基酸的對應關系64個密碼中,61個密碼分別代表各種氨基酸。每種氨基酸少的只有一
mRNA的結構基礎
mRNA是翻譯的模板。在原核生物和真核生物細胞內,mRNA的化學基礎有所差異。原核生物mRNA在原核細胞內,參與翻譯的mRNA具有以下特點:(1)具有多個開放閱讀框(ORF),即多順反子,意味著同一條mRNA可以編碼多個蛋白。特別注意可讀框之間不重疊(除移碼翻譯涉及終止密碼子和起始密碼子的2個堿基重
mRNA的功能介紹
mRNA含A、U、G、C四種核苷酸,每三個相聯而成一個三聯體,即密碼,代表一個氨基酸的信息,故按數學中排列組合法則計算,可形成43=64個不同的密碼。根據實驗結果,推得64個密碼與氨基酸的對應關系如下表。mRNA密碼與氨基酸的對應關系64個密碼中,61個密碼分別代表各種氨基酸。每種氨基酸少的只有一個
喂食mRNA-mimics和inhibitors研究昆蟲mRNA調控發育的機制
棉鈴蟲(Helicoverpa armigera),夜蛾科昆蟲的一種,是棉花蕾鈴期的重要鉆蛀性害蟲,主要蛀食蕾、花、鈴,也取食嫩葉。MicroRNA是一類非編碼小分子 RNAs(18-25 nt),其在各種生物進程中發揮著重要的作用,包括發育和基因調控。澳大利亞昆士蘭大學研究人員通過人工
如何提取mrna
1 細胞總RNA的提取1)、6孔板細胞(CNE-2)匯合度為90-100%時,取出無菌室,去其上清,用PBS洗兩次后,每孔加TRIZOL試劑(Gibco公司) 1 ml,搖勻,無菌罩內消化3-5分鐘(觀察:液體變粘稠,細胞脫壁).2)、將各孔內消化好的細胞裂解液吸到一DEPC處理過的1.5 ml E
細胞凋亡的mRNA檢測
研究者們發現了很多在細胞凋亡時表達異常的基因,檢測這些特異基因的表達水平也成為檢測細胞凋亡的一種常用方法。據報道,Fas?蛋白結合受體后能誘導癌細胞中的細胞毒性T細胞(cytotoxic T cells)等靶細胞。Bcl-2 和bcl-X (長) 作為抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的調節物,它們
mRNA的分離與純化
真核細胞的mRNA分子最顯著的結構特征是具有5’端帽子結構(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。絕大多數哺乳類動物細胞mRNA的3’端存在20-30個腺苷酸組成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。這種結構為真核mRNA的提取,提供了極為方便的選擇性標志,寡聚(dT)纖維素或寡聚(U)
細胞凋亡的mRNA檢測
研究者們發現了很多在細胞凋亡時表達異常的基因,檢測這些特異基因的表達水平也成為檢測細胞凋亡的一種常用方法。據報道,Fas?蛋白結合受體后能誘導癌細胞中的細胞毒性T細胞(cytotoxic T cells)等靶細胞。Bcl-2 和bcl-X (長) 作為抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的調節物,它們
原核mRNA的降解
原核生物mRNA的降解是不同核糖核酸酶包括核酸內切酶,3'核酸外切酶和5'核酸外切酶的共同作用的結果。在一些情況下,長度為數十至數百個核苷酸的小RNA分子(sRNA)可通過與互補序列堿基配對來促進RNase III對特定mRNA的降解。
mRNA的分離與純化
[實驗原理]真核細胞的mRNA分子最顯著的結構特征是具有5’端帽子結構(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。絕大多數哺乳類動物細胞mRNA的3’端存在20-30個腺苷酸組成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。這種結構為真核mRNA的提取,提供了極為方便的選擇性標志,寡聚(dT)纖維素或
隱蔽mRNA的結構特點
1.mRNA的3′-末端有一段含30~200個核苷酸殘基組成的多聚腺苷酸(polyA)。此段polyA不是直接從DNA轉錄而來,而是轉錄后逐個添加上去的。有人把polyA稱為mRNA的“靴”。原核生物一般無polyA的結構。此結構與mRNA由胞核轉位胞質及維持mRNA的結構穩定有關,它的長度決定mR
mRNA的分離與純化
實驗概要mRNA的分離與純化實驗原理??真核細胞的mRNA分子最顯著的結構特征是具有5’端帽子結構(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。絕大多數哺乳類動物細胞mRNA的3’端存在20-30個腺苷酸組成的Poly(A)尾,通常用Poly(A)表示。這種結構為真核mRNA的提取,提供了極為方便的選擇性
關于mRNA疫苗的簡介
mRNA疫苗是將含有編碼抗原蛋白的mRNA導入人體,直接進行翻譯,形成相應的抗原蛋白,從而誘導機體產生特異性免疫應答,達到預防免疫的作用。 [6] mRNA疫苗是繼滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗和病毒載體疫苗后的第三代疫苗,具有針對病原體變異反應速度快、生產工藝簡單、易規模化擴大等特點。
真核mRNA的降解
真核細胞的翻譯和mRNA衰變之間存在著平衡。正在被翻譯的mRNA被核糖體,真核起始因子eIF-4E和eIF-4G以及poly(A)結合蛋白結合,不能接觸外泌體復合物,mRNA得到保護。mRNA的poly(A)尾巴被特異性外切核酸酶縮短,該核酸外切酶通過RNA上的順式調節序列和反式作用RNA結合蛋白的
mRNA的轉運和翻譯
mRNA的轉運真核生物和原核生物之間的另一個區別是mRNA的轉運。由于真核轉錄和翻譯是在不同的細胞器內進行的,真核mRNA必須從細胞核輸出到細胞質。 這一過程可能受不同信號通路的調節。成熟的mRNA通過其加工的修飾被識別,在結合帽結合蛋白CBP20和CBP80及轉錄/輸出復合物(TREX)后通過核孔