關于siRNA機制的基本介紹
1.長dsRNA（可來自發夾，互補RNA和RNA依賴性RNA聚合酶）被稱為Dicer的內切核糖核酸酶切割。Dicer切割長dsRNA以形成短干擾RNA或siRNA；這使得分子能夠形成RNA誘導的沉默復合物（RISC）。 2.一旦siRNA進入細胞，它就會被整合到其他蛋白質中以形成RISC。 3.一旦siRNA是RISC復合物的一部分，siRNA就展開以形成單鏈siRNA。 4.由于其在5'末端的堿基配對而在熱力學上較不穩定的鏈被選擇作為RISC復合物的一部分。 5.作為RISC復合物一部分的單鏈siRNA現在可以掃描并找到互補的mRNA。 6.一旦單鏈siRNA（RISC復合物的一部分）與其靶mRNA結合，它就會誘導mRNA切割。 7.現在切割mRNA并被細胞識別為異常。這導致mRNA的降解，并且反過來不將mRNA翻譯成氨基酸然后轉化為蛋白質。從而沉默編碼該mRNA的基因。 siRN......閱讀全文
siRNA－Design－Guidelines
Using siRNA for gene silencing is a rapidly evolving tool in molecular biology. There are several methods for preparing siRNA, such as chemical synthe
siRNA制備方法
體外制備1.化學合成許多國外公司都可以根據用戶要求提供高質量的化學合成siRNA。主要的缺點包括價格高，定制周期長，特別是有特殊需求的。由于價格比其他方法高，為一個基因合成3―4對siRNAs 的成本就更高了，比較常見的做法是用其他方法篩選出最有效的序列再進行化學合成。最適用于：已經找到最有效的si
siRNA對照解析
A．普通陰性對照??1.siRNA實驗應該有陰性對照；2.通用陰性對照為與目的基因的序列無同源性的普通陰性對照；3．Scrambled陰性對照和選中的siRNA序列有相同的組成，但是和mRNA沒有明顯的同源性；4．陰性對照需要確定和目的靶細胞中其它基因同源性很低。??B．熒光標記陰性對照??1. R
SiRNA用戶指南
Selection of siRNA duplexes from the target mRNA sequenceUsing Drosophila melanogaster lysates (Tuschl et al. 1999), we have systematically analyzed t
siRNA表達框架
siRNA表達框架(siRNA expression cassettes，SECs)是一種由PCR得到的siRNA表達模版，能夠直接導入細胞進行表達而無需事前克隆到載體中。這個方法最早是由Castanotto和其同事采用，包括一個RNA polⅢ啟動子，一段發夾結構siRNA，一個RNA pol I
siRNA－轉染程序
?A．siRNA轉染的方法???哺乳動物轉染的常見方法有：磷酸鈣共沉淀、電穿孔法、DEAE-葡聚糖和polybrene、機械法（例如,顯微注射和基因槍）、陽離子脂質體試劑，其中陽離子脂質體試劑轉染法是目前最常用的轉染方法。應用脂質體型轉染試劑進行轉染需要注重的幾個方面：1.???????轉染試劑的用
siRNA的體外轉錄合成方法的介紹
以DNA Oligo為模版，通過體外轉錄合成siRNAs，成本相對化學合成法而言比較低，而且能夠比化學合成法更快的得到siRNAs。不足之處是實驗的規模受到限制，雖然一次體外轉錄合成能提供足夠做數百次轉染的siRNAs，但是反應規模和量始終有一定的限制。而且和化學合成相比，還是需要占用研究人員相當的
果蠅Dicer2結合雙鏈RNA加工生成siRNA的分子機制
RNA干擾（RNAi）是許多真核生物中一種保守的RNA沉默機制， 小干擾RNA是RNA干擾的關鍵組成部分。在小RNA的加工過程中，Dicer家族蛋白起到了重要的作用，它們發揮作用的過程中常需要雙鏈結合蛋白（dsRBP）作為輔因子來幫助它們發揮功能。在果蠅中，siRNA的產生是由ATP依賴型的Dice
關于細胞壞死的機制介紹
人體細胞的死亡有兩種基本類型，一種死亡是由細胞基因控制的，是維持內環境穩定的一種自主性細胞凋亡，即細胞濁亡；另一種是細胞壞死，是指細胞在外傷、缺血、持續高溫、毒素及免疫細胞攻擊時發生的細胞崩解。細胞壞死與細胞凋亡是兩種截然不同的細胞死亡現象。細胞壞死是被動性細胞死亡，是不可逆的病理變化。在我國各
關于谷胱甘肽的作用機制介紹
谷胱甘肽作為一種細胞內重要的調節代謝物質，其既是甘油醛磷酸脫氫酶的輔基，又是乙二醛酶及丙糖脫氫酶的輔酶，參與體內三羧酸循環及糖代謝，并能激活多種酶，如巰基（SH）酶-輔酶等，從而促進糖類、脂肪和蛋白質代謝。GSH分子特點是具有活性巰基（-SH），是最重要的功能集團，可參與機體多種重要的生化反應，
siRNA表達載體的構建
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 多數的siRNA表達載體依賴三種RNA聚合酶III 啟動子(pol III)中的一種，操縱一段小的發夾RNA(short hairpin RNA, shRNA)在哺乳動物細胞中的表達。這三類啟動子包括大家熟悉的人源和鼠源的U
siRNA表達載體的構建
實驗方法原理 多數的siRNA表達載體依賴三種RNA聚合酶III 啟動子(pol III)中的一種，操縱一段小的發夾RNA(short hairpin RNA, shRNA)在哺乳動物細胞中的表達。這三類啟動子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6啟動子和人H1啟動子。之所以采用RNA pol
siRNA表達載體的構建
siRNA表達載體構建可應用于：（1）作為后基因組時代基因功能分析的有力工具；（2）基因組學、細胞信號傳導通路分析；（3）藥物靶點篩選、疾病治療。實驗方法原理多數的siRNA表達載體依賴三種RNA聚合酶III 啟動子(pol III)中的一種，操縱一段小的發夾RNA(short hairpin RN
關于混倍體的基本介紹
這種個體的染色體數仍表現為多倍性的和異倍性的變化。用秋水仙素處理引起體細胞的染色體數加倍時，二倍性細胞和多倍性細胞也往往混在一起。通常在菠菜的根尖上可看到混倍性。在昆蟲中，有由于內分裂所造成的內多倍化（參見內多倍性）而產生數目極多的巨核〔如已知在一種水（Gerris lateralis）的唾腺中
關于強啡肽的基本介紹
強啡肽是一種阿片肽，生理功能多種多樣，最早被人們認識到的是其顯著的鎮痛功能，但其對人體具有很強的成癮性和藥物依賴性，以后又發現它對機體的很多功能有明顯的調節作用，如對心血管系統、呼吸系統等 。
關于菌血癥的基本介紹
菌血癥指致病菌由局部侵入血流，但未在血流中生長繁殖，只是短暫的一過性通過血液循環到達體內適宜部位后再進行繁殖而致病。 一般來說，導尿管或者是體表的手術造口容易導致發生菌血癥。出現菌血癥的患者往往發生急性的多個器官的轉移性感染，并出現各種急性感染癥狀。一旦懷疑，應立即采血檢驗，確診后應立即針對感
關于阿司匹林的基本介紹
阿司匹林〔Aspirin,2-（乙酰氧基）苯甲酸，又名乙酰水楊酸 [98] 〕是一種白色結晶或結晶性粉末，無臭或微帶醋酸臭，微溶于水，易溶于乙醇，可溶于乙醚、氯仿，水溶液呈酸性。本品為水楊酸的衍生物，經近百年的臨床應用，證明對緩解輕度或中度疼痛，如牙痛、頭痛、神經痛、肌肉酸痛及痛經效果較好，亦用
關于依那普利的基本介紹
依那普利，為血管緊張素轉換酶抑制劑（ACEI）。口服后在體內水解成依那普利拉，對血管緊張素轉化酶起強烈抑制作用，降低血管緊張素Ⅱ的含量，造成全身血管舒張，血壓下降，用于治療高血壓。 中文名稱：依那普利 化學名稱：(S)-1-(N-(1-(乙氧羰基)-3-苯丙基)-L-丙氨酰基)-L-脯氨酸
關于安替比林的基本介紹
安替比林是一種有機化合物，分子式C11H12N2O。外觀為無色結晶或白色結晶性粉末，無臭，味微苦。易溶于水，乙醇，氯仿。微溶于乙醚。用作硝酸、亞硝酸及碘的分析試劑。測定能形成絡合陽離子的元素（如鉍、錫、銻和汞等）。重量分析測定鈦。
關于阿斯巴甜的基本介紹
阿斯巴甜作為一種重要的甜味劑,被廣泛應用于藥劑加工和食品加工中,其安全性非常重要。雖然市場上部分甜味劑已由阿斯巴甜更換成果葡?