山東大學第二醫院團隊發明早期乳腺癌血檢新方法

　　就在前兩年，乳腺癌的發病率超越肺癌，成為世界上最常見的惡性腫瘤[1]。

　　眾所周知，早篩早診是延長患者生存期、提升患者生存率的重要方法。不過，作為臨床上早期乳腺癌的主要篩查方法，乳腺鉬靶和超聲均存在局限性，要么是敏感性低，要么是假陽性率高[2,3]。因此，亟需靈敏度和特異性都高的檢測方法。

　　近日，山東大學第二醫院檢驗科王傳新、杜魯濤和李娟團隊，在知名期刊《自然·通訊》報道了一種新型早期乳腺癌診斷技術[4]。

　　他們發現，外周血單個核細胞（PBMCs）的四個DNA甲基化位點，可以作為檢測早期乳腺癌的生物標志物，并基于此開發了名為BC-mqmsPCR的檢測方法。多中心隊列的驗證結果表明，BC-mqmsPCR能有效區分早期乳腺癌患者和健康對照組受試者，AUC為0.940，靈敏度為93.2%，特異度為90.4%。

　　尤其值得一提的是，BC-mqmsPCR優于現有的臨床診斷方法，尤其是在檢測早期和微小乳腺癌病灶方面。

　　論文首頁截圖

　　王傳新團隊在2020年5月至2022年7月間，從中國6個省的10家醫院共招募了820名受試者，其中包括未經治療的乳腺癌患者（沒有患其他癌癥和炎癥性疾病），其他腫瘤患者，以及沒有惡性疾病且年齡和種族相匹配的健康受試者。

　　在經過入排標準篩選和質量控制之后，最終有781名受試者被納入本研究。所有患者被分到三個隊列：隊列I（標志物發現組），包括50名乳腺癌患者和30名健康受試者，鑒定PBMCs中存在的乳腺癌特異性DNA甲基化標記；隊列II（標志物確認組），包括110名乳腺癌患者和90名健康受試者，炎癥并確定標志物；隊列III（多中心隊列），包括206名乳腺癌患者，170名健康受試者和125名其他腫瘤患者。

　　研究流程圖

　　通過對隊列I測序數據的分析比較，王傳新團隊初步選擇了8個候選甲基化標記，包括4個高甲基化標記和4個低甲基化標記。

　　隨后，他們在隊列II中檢驗了這8個候選甲基化標記的效果，結果顯示，4個低甲基化標記不能很好的區分乳腺癌患者和健康受試者；而4個高甲基化標記復現了隊列I的研究結果。而且，每個高甲基化標記都能將早期乳腺癌和小腫瘤（≤1.5厘米）與健康對照區分開來。

　　于是，王傳新團隊就以這4個高甲基化標記為基礎，開發了可在一次反應中對四種甲基化標記物進行多重定量的乳腺癌高效診斷方法——BC-mqmsPCR。基于隊列III的研究數據報告了BC-mqmsPCR的性能，其在訓練集和驗證集中的AUC分別為0.925和0.918、靈敏度分別為83.1%和80.3%、特異度分別為90.4和89.1%。在區分乳腺癌和其他癌癥方面，BC-mqmsPCR的AUC為0.913。

　　BC-mqmsPCR的性能

　　在診斷早期乳腺癌方面，對于0/I期乳腺癌患者而言，BC-mqmsPCR在訓練集和驗證集中的AUC分別為0.940和0.927，靈敏度分別為93.3%和85.7%；對于≤1.5厘米的腫瘤，BC-mqmsPCR在訓練集和驗證集中的AUC分別高達0.945和0.936，靈敏度分別高達93.2和90.0%。

　　王傳新團隊認為，這些結果表明，BC-mqmsPCR是一種有效的輔助方法，可用于發現難以通過超聲和X光檢查識別的小腫瘤。

　　BC-mqmsPCR在診斷早期乳腺癌上的表現

　　在研究的最后，王傳新團隊比較了BC-mqmsPCR與目前臨床上在使用的腫瘤標志物CA153、CEA和CA125的優劣。受試者為67例0/I期乳腺癌患者，以及113例腫瘤≤2.5厘米的乳腺癌患者。

　　總體來看，BC-mqmsPCR的檢出率為82.0%，明顯高于CA153的5.3%、CEA的6.0%和CA125的3.5%。讓他們吃驚的是，BC-mqmsPCR檢測出了17例0期乳腺癌（原位癌）中的15例（88.2%），而CEA僅檢測出1例（1/17，5.9%），CA153和CA125則連1例都未檢出。此外，對于≤1.5厘米的腫瘤，CA153和CEA未檢出，CA125只檢出其中的2.1%，而BC-mqmsPCR則檢出了91.7%。

　　以上數據說明，BC-mqmsPCR具有作為乳腺癌臨床診斷方法的潛力，尤其是檢測早期乳腺癌。

　　總的來說，王傳新/杜魯濤/李娟團隊基于PBMCs的4個DNA甲基化標記物，開發了一種便捷、靈敏度高、特異性強的乳腺癌無創檢測方法——BC-mqmsPCR。重要的是，BC-mqmsPCR對于早期乳腺癌和體積較小的腫瘤也有非常高的靈敏性。

　　不難相見，以上結果一旦被前瞻性隊列研究證實，BC-mqmsPCR必將改善乳腺癌的早篩早診，進一步改善乳腺癌患者的預后。

　　參考文獻：

　　[1].Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al. Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN Estimates of Incidence and Mortality Worldwide for 36 Cancers in 185 Countries. CA Cancer J Clin. 2021；71(3):209-249. doi:10.3322/caac.21660

　　[2].Nelson HD, Pappas M, Cantor A, et al. Harms of Breast Cancer Screening: Systematic Review to Update the 2009 U.S. Preventive Services Task Force Recommendation. Ann Intern Med. 2016；164(4):256-267. doi:10.7326/M15-0970

　　[3].Welch HG, Prorok PC, O'Malley AJ, et al. Breast-Cancer Tumor Size, Overdiagnosis, and Mammography Screening Effectiveness. N Engl J Med. 2016；375(15):1438-1447. doi:10.1056/NEJMoa1600249

　　[4].Wang T, Li P, Qi Q, et al. A multiplex blood-based assay targeting DNA methylation in PBMCs enables early detection of breast cancer. Nat Commun. 2023；14(1):4724. doi:10.1038/s41467-023-40389-5