張川／洪佳旭團隊開發雜合外泌體囊泡，靶向遞送siRNA，治療干眼癥

　　核酸療法已成為下一代藥物的一個關鍵類別，在最近的新冠大流行期間經歷了快速發展。盡管在疫苗和肝病治療方面取得了顯著成功，但開發組織特異性核酸藥物遞送系統以拓寬其應用范圍的迫切需求仍然存在。為了實現這一目標，許多研究直接對傳統的遞送系統（例如病毒載體、LNP，以及基于聚合物的載體）進行了修改，以實現肝外核酸遞送。然而，每一種方法都有其各自的優點和局限性。因此，人們投入了大量精力開發新型遞送載體，以實現更高的遞送效率、特異性和安全性。

　　外泌體是一種具有良好生物相容性和歸巢能力的內源性細胞外囊泡，被認為是負載siRNA進行治療的理想載體。然而，現有的將siRNA加載到外泌體中的策略通常無法有效封裝，并且可能破壞外泌體的完整性。

　　近日，上海交通大學張川教授團隊與復旦大學附屬眼耳鼻喉科醫院洪佳旭主任醫師團隊合作，在 Advanced Materials 期刊發表了題為：Membrane Fusion-Mediated Loading of Therapeutic siRNA into Exosome for Tissue-Specific Application 的研究論文。

　　該研究提出了一種DNA拉鏈介導的膜融合方法構建雜合外泌體囊泡（HEV）的新策略，用于組織特異性siRNA遞送，通過將封裝了抗NFKBIZ的siRNA的脂質體與角膜上皮細胞（CEC）來源的外泌體融合，構建了用于治療干眼癥（DED）的siRNA-HEV。在干眼癥小鼠模型上的實驗結果顯示，siRNA-HEV能夠有效靶向并將siRNA遞送到角膜，進而沉默NFKBIZ基因并顯著減少了眼表促炎細胞因子的分泌，重塑了其炎癥微環境，實現了出色的治療效果。

　　作為一個多功能平臺，該研究開發的具有靶向能力以及攜帶了設計的治療型siRNA的雜合外泌體囊泡（HEV），可能在各種疾病治療中具有巨大潛力。

　　利用互補拉鏈DNA結構的特性，DNA拉鏈（DNA-zipper）介導的膜融合已成為將功能性核酸載入外泌體的一種有前景的方法。當兩個囊泡配備一組互補DNA鏈時，每個囊泡的互補DNA鏈會由于堿基配對相互作用而“拉鏈式”結合在一起，觸發囊泡的對接和膜融合，并最終使兩個囊泡的內容物混合。DNA拉鏈介導的膜融合提供了一種特定的膜融合以及對外源內容物進行非破壞性載入外泌體的方式，避免了顯著的內容物泄漏。

　　在這項研究中，研究團隊提出了一種DNA拉鏈介導的膜融合策略，以有效地將治療性siRNA載入靶細胞來源的外泌體中，從而創建用于組織特異性siRNA遞送的雜合外泌體囊泡（hybrid exosome vesicle，HEV）。

　　在這項概念驗證研究中，研究團隊通過將攜帶siRNA的脂質體與角膜上皮細胞（CEC）的外泌體融合，專門設計了一種雜合外泌體囊泡（HEV），能夠針對眼表進行靶向治療，以治療干眼癥（DED）。

　　干眼癥（DED）是一種影響全球成百上千萬人的常見眼表疾病，以淚膜不穩定、高滲性為特征，可導致眼部不適、視力障礙甚至失明。盡管干眼癥的確切機制仍不清楚，但炎癥在驅動病理循環中發揮了關鍵作用。因此，減輕眼表炎癥并恢復其穩態成為干眼癥治療的關鍵選擇。免疫抑制劑和免疫調節劑是治療中重度干眼癥的常用藥物，但由于缺乏更有效的治療藥物，且角膜屏障的緊密阻礙了給藥，導致治療效果欠佳。

　　針對這一顯著未滿足的需求，新的治療方法（例如抗氧化劑全氟辛烷、來自患者自身血液的富含血小板的血漿、siRNA、來自干細胞的外泌體）已被廣泛探索用于緩解干眼癥的癥狀和體征。其中siRNA尤其引人關注，因為它可以在基因水平上直接調控疾病驅動因素，提供了更持久的治療效果，以緩解干眼癥的炎癥。

　　在干眼癥的典型進展中，異常淚液滲透壓刺激上皮細胞中的NF-