比色法的基本反應

比色法是以生成有色化合物的顯色反應為基礎的，一般包括兩個步驟：首先是選擇適當的顯色試劑與待測組分反應，形成有色化合物，然后再比較或測量有色化合物的顏色深度。比色分析對顯色反應的基本要求是： 光電比色法是在光電比色計上測量一系列標準溶液的吸光度，將吸光度對濃度作圖，繪制工作曲線，然后根據待測組分溶液的吸光度在工作曲線上查得其濃度或含量。光電比色計通常由光源（鎢燈）、濾光片、吸收池、接收器(光電池或光電管)、檢流計五部分組成（見圖）。光路結構上有單光電池式和雙光電池式兩種：單光電池式儀器的測量結果受光源強度變化影響較大，而雙光電池式儀器則避免了這種影響。
與目視比色法相比,光電比色法消除了主觀誤差,提高了測量準確度，而且可以通過選擇濾光片和參比溶液來消除干擾，從而提高了選擇性。光電比色計和紫外－可見分光光度計的光路結構非常相似，它們之間所不同的地方在于：①分光光度計采用棱鏡或光柵作色散元件，因而可以得到純度較高的單色光束。而光電比色計采用濾光片，只能得到一定波長范圍的光譜帶(復合光)；②紫外－可見分光光度計采用紫外和可見區的光源，即氫燈和鎢燈，而光電比色計只用一種鎢燈光源，因而前者適用于紫外－可見光譜區，而后者只適用于可見光譜區；③紫外－可見分光光度計可以測定待測組分的精細吸收光譜，不僅可用于定量分析，而且可以作有機化合物的定性和結構分析，而光電比色計只能作定量分析。此外，分光光度計一般都采用靈敏度高的光電倍增管作檢測器，而光電比色計一般用光電池或光電管作檢測器。因此，光電比色計無論在測量的準確度、靈敏度和應用范圍上都不如紫外－可見分光光度計。
在20世紀30～60年代，是比色分析發展的繁盛時期，它廣泛用于冶金、地質、金屬材料中微量的金屬和部分非金屬元素的測定。隨著光學儀器制造技術的發展，紫外－可見分光光度計應用日益普及，精密度較高而價格又較低的紫外－可見分光光度計已逐漸代替光電比色計，分光光度法也隨之逐漸代替了比色法。